芍药种子中α-亚麻酸生物合成相关基因的克隆与表达

芍药种子中α-亚麻酸生物合成相关基因的克隆与表达

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1、:苗'絕菊C中管‘蘇:苗據叫大麥也焉^角V娘^?YANU、八、別LWIVE艮SITY、<:、聲IJ卿,、、—t.挣’;為峡.;扩如:續硕壬学化冷文巧^^^、' ̄-?>、;?:T.;(学术型)祟、V誘'’;"’..*六六J二朱>托;成户^?药种子中a-亚麻酸生物合成相关基因的克隆与表达'心一、、-告t';'蕭乃矣終巧嗦夸V方至*'^@心:;;x.i.-f追、令私"-X追、^fV八、运六,:;%可苗'‘"争‘-’指导教师姓名:陶俊i:授,

2、扬州大学,江苏扬舟,225009卢怒申请学位级别;硕壬学科专业名称:果树学嫁’’'‘?--论文提交日期;2015.06.17论文答辩日期:2015.06.03公/学位授予单位、:扬州大学学位授予日期;:二、;、三;三^答辩委’员会主席:陈鹏教授¥笔寧琴泰靖據喔-.;:::?r寫^.亦味,藝,等m.、苗兴六怎.;;^衫矣互^,聲-:-户:托处谓《爲軟祭巧;/;.為痴缘《私占andanalssofa-noencacdoniiiexr的sionyililiidgp

3、biosyntheticgenesinseedsofHerbaceousPeonyPaeonialac^oraYiXL{ifi)ByYaoJiangSuervisedbypProfessorJunTaoADissertationSubmittedasPartialFulfillmentoftheReuirementsforMasterDegreeofScienceqInYanzhouUniversitgyJune2015Yanzhou

4、Chinag,-1姜瑶:巧药种子中a亚麻酸生物合成相关基因的克隆与表达_摘要植物油脂中的脂肪酸与人体健康具有密切联系,根据其饱和度可分为饱和脂肪酸、单和脂肪酸又可分为n-3和n-6-不饱和脂肪酸及多不饱和脂肪酸;多不饱等系列。其中,a亚-n3,是人体必需脂肪酸,在调节血脂,麻酸(ALA)为植物源性脂肪酸、降低血压和血糖预防癌症等,抗炎症,增强免疫力,保护视力和提高记忆力等方面具有重要作用。因此,挖掘富含ALA的巧药种质资源,明晰调控ALA生物合成的关键基因及其合成与调控的分LA含子机制,可W

5、为今后选育优良品种W及通过遗传工程提高巧药枯油A量奠定理论基-MS技术测定了9础,本论文利用GC个巧药品种脂肪酸成分及其相对含量,明确了。为此ALA含量差异显著的'’不同发育时期脂肪酸相对含量的变化,筛选出两个品种PL1和''ALAPL2,2;运用民ACE技术克隆了7个与种子中合成相关基因分析了个巧药代表品种''''PL1PL2ALA含量变化及其相关合成基因表达的差异,主要结果如下和形成过程中:-MS技术分析了(1)利用GC9个巧药品种的脂肪酸成分,鉴定出了15种脂肪酸成分:一月桂酸(C2:0)、豆4

6、:0)、5:0)、栋楠酸(PA,C16:0)、1寇酸(仁1十五烧酸(。栋搁稀一16l)、(7:0)、7:l)、(AC1:)、,酸(C:十韦焼酸C1十屯碳稀酸(C1硬脂酸S,80油酸(0A8ALA-C18:l)、亚油酸(LA,C1:2)、(C18:3)、10十九婦酸(C19:l)、花生酸(C20:0)、一20花生婦酸(C:l)、花生二稀酸(C20:2)。种子成熟时期,巧油中总不饱和脂肪酸占到总脂肪酸的90%W上,其中相对含量超过1%的脂肪酸有5种:LA(33.44%±3.45%)、OA〇〇〇〇2.66/〇±

7、1.7(2679/±2.75%)A(51/社0.)47(38/〇)、ALA.〇、P.84%和SA〔1.4%±0.8%)。’同时,对9个品种不同发育时期脂肪酸含量的变化进行了分析,在TL1种子发育过程ALA,1(4±.),中,好油中的相对含量不断下降S时期时为最大值3.76%687%S4时期下3,OA降到最低值(41.53S1.49%±%)。与么相反的巧对含量不断升高,时期为〇20.〇±048%,L.70%±021%,在S4时期达到最高值30.01/.A的相对含量也基本呈增长趋势,只是在S3时期稍有下降,

8、从S1时期的28.35%±8.49%逐渐增加到S4时期的30.13%±1.53%。其他8个巧药品种特油中的脂肪酸均呈现相似的变化趋势。'’RNA(2)W杭巧种子中所提取的为模板,根据Genbank中其他植物已登陆的相关基>7/?/义因序列设计引物

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