镉诱导中华绒螯蟹肝胰腺氧化损伤及机理研究

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1、分类号:06UDC:540学号:12112822275密级:公开f盖州太#硕士学位论文镉诱导中华绒螯蟹肝胰腺氧化损伤及机理研究作者姓名彭雪学科、专业化学生物学研究方向化学生物毒理学指导教师应雪萍(教授)完成日期2015年5月30曰温州大学学位委员会分类号:06UDC:540学号:12112822275密级:公开温州大学硕士学位论文镉诱导中华绒螯蟹肝胰腺氧化损伤及机理研究作者姓名:ii,学科、专业:化学生物学研宄方向:化学生物毒理学指导教师:^^^完成日期:2015年3月温州大学学位委员会温州大学

2、学位论文独创性声明本人郑重声明:所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人己经发表或撰写过的研宄成果,也不包含为获得温州大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研宄所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示了谢意。论文作者签名每日期:年Z月}曰温州大学学位论文使用授权声明本人完全了解温州大学关于收集、保存、使用学位论文的规定,g卩:学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的

3、复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅。本人授权温州大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本人在导师指导下完成的论文成果,知识产权归属温州大学。保密论文在解密后遵守此规定。论文作者签名:ti参导师签名:日期:年<月'^日日期:>丨阵{月)日镉诱导中华绒螯蟹肝胰腺氧化损伤及机理研究摘要采用急性毒性实验方法,将中华绒螯蟹(Eriocheirsinensis)暴2+露于不同Cd浓度组(0、0.63、1.26、5.03、10.0

4、7mg/L)6d,采用2+生化和分子生物学方法研究Cd对中华绒螯蟹肝胰腺代谢酶、抗氧化相关物质、线粒体的影响和损伤,采用DNA-Ladder和AO/EB双荧光染色法检测肝胰腺细胞凋亡情况,旨在探明镉对中华绒螯蟹肝胰腺2+的氧化损伤机理。结果显示:雌蟹和雄蟹对Cd的敏感度不同,肝胰2+腺中GPT、AKP被抑制,GOP被激活,ACP活力随着Cd浓度的升高呈现出先上升后下降的变化趋势;SOD、CAT和GPx变化趋势与ACP相同,H2O2和MDA含量持续积累,GSH/GSSG减少;MTmRNA表达量持续

5、增加;线粒体状态-4呼吸、MDH和COX活性均2+被抑制;细胞损伤和凋亡程度随着Cd浓度增加而加剧,Caspase-3,2+8,9均被激活。结果表明:Cd诱导中华绒螯蟹肝胰腺产生大量的自2+由基,导致代谢发生异常、出现氧化损伤,且雌蟹和雄蟹对Cd胁迫2+的敏感程度和应激程度不同;Cd诱导肝胰腺发生凋亡是Caspase依2+赖型,推测线粒体介导的内源性凋亡途径是Cd诱导中华绒螯蟹肝胰腺凋亡最主要的途径。关键词:中华绒螯蟹,镉,肝胰腺,氧化损伤,细胞凋亡OXIDATIVEDAMAGEINHEPATO

6、PANCREASOFERIOCHEIRSINENSISINDUCEDBYCADMIUMABSTRACTToexplorethetoxicityofcadmium,Eriocheirsinensiswereexposed2+todifferentCdtreatment(0,0.63,1.26,2.52,5.03,10.07mg/L)for6d.Activityandcontentofmetabolicenzymes(GPT,GOT,AKP,ACP),antioxidants(SOD,GPx,CAT

7、,GSH,MT,H2O2,MDA),mitochondriadamage(ST-4,COX,MDH)andCaspase-3,8,9weredetermined.AO/EBandDNA-Ladderwereusedtoexamineapoptosis.Reflactionofmaleandfemaleweredifferent.ActiviationGTPandAKPandinhibitionofGOTwereobservedwhiletheactivityofACPwasactiviation

8、2+followedinhibitedwithincreasingCdconcentrationaswellasSOD,GPxandCAT.DepletionofGSH/GSSGwasobservedwhileincreasingofH2O2andMDAwereobserved.IncreamentofMTmRNAprogressivelyincreased.ST-4,MDHandCOXactivitiesweresupressed.2+Apoptosisoccurswithincreasing

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