鹦鹉热嗜衣原体急性感染与持续性感染差异表达基因筛选

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3、２委：员李巧玉，教授，硕导，南华大学委３：员陈超群，，副教授，硕导南华大学４委员硕导南华大学：陆春雪，副教授，，；１５年月２日答辩日期２０５２南华大学学位论文原创性声明本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得。的研究成果尽我所知，除了论义中特别加１＾＾示注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得南华大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。作者签名－；年王月巧

4、日南华大学学位论文版权使用授权书本学位论文是本人在南华大学攻读硕±学位期间在导师指导下完成的学。本论文的研究成果归南华大学所有位论文，本论文的研究内容不得其它单。、位的名义发表本人同意南华大学有关保留使用学位论文的规定，即：学校，允许学位论文被查阅和借阅有权保留学位论文；学校可Ｗ公布学位论文的全部或部分内容，＾１采用复印、缩印或其它手段保留学位论文可１；学校可根据国家或湖南省有关部口规定送交学位论文。同意学校将论文加入《中国优秀博硕±学位论文全文数据库》，并按《中国优秀博硕±学位论文全文数据库出版章程》规定享受相关权益。同意授权中国科

5、学信息技术研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。对于涉密的学。位论文，解密后适用该授权＾：夺签日作者名月＾：＞心０导师签名年月皆Ｉ＾鹦鹉热嗜衣原体急性感染与持续性感染差异表达基因筛选摘要：[目的]基因芯片检测鹦鹉热嗜衣原体（Chlamydophilapsittaci，Cps）急性感染与持续性感染的差异表达基因，筛选与Cps6BC持续性感染有关的关键基因，探讨Cps持续性感染发生的可能分子机制。[方法]1.Cps6BC诱导细胞的急性感染：用Cps6BC标准株感染HeLa细胞，培养2h后从培养箱中取出，

6、吸弃感染液，更换为DMEM+10%FBS，37℃培养。2.Cps6BC诱导细胞的持续性感染：用Cps6BC标准株感染HeLa细胞，并在感染液中加入35ng/mLrhIFN-γ，培养2h后从培养箱中取出，吸弃感染液，更换为含35ng/mLrhIFN-γ的衣原体生长培养基，37℃培养。3.分别收集6、12、24、36、48、60hCps6BC急性感染与持续性感染的HeLa细胞，提取CpsRNA后，采用Agilent8×15KCps全基因组表达谱芯片检测、比较分析急性感染与持续性感染中Cps的差异表达基因，然后用AbsoluteFoldchange≥2为显著上调，Foldch

7、ange≤0.5为显著下调，同时Flag标记为Detected的标准进行差异基因筛选，运用GO分类、KEGG代谢通路及DAVID在线软件对差异基因进行功能聚类及通路分析，并通过Realtime-PCR确证部分差异基因。[结果]通过比较Cps急性感染与持续性感染，发现在12~60h共有持续性感染差异表达基因287个，包括74个表达上调基因，以及213个表达下调基因，GO分类的BP分析显示，21个持续性感染表达上调基因参与1个与翻I译相关的BP分类“translation”，EASEscore为3.58E-09，58个持续性感染表达下调基因参