中华绒螯蟹性早熟分子机制的初步研究

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1、学校代码：10264研究生学号：M120101065上海海洋大学硕士学位论文中华绒螯蟹性早熟分子机制的题目：初步研究Preliminarystudyonmolecularmechanism英文题目：ofpreciousChineseMittenCrab专业：水产养殖研究方向：水产动物种质资源与种苗工程姓名：慈元吉指导教师：王成辉教授二O一五年六月上海海洋大学学位论文原创性声明本人郑重声明：我恪守学术道德，崇尚严谨学风。所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经明确注明和引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品及成果的

2、内容。论文为本人亲自撰写，我对所写的内容负责，并完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：日期：年月日上海海洋大学学位论文版权使用授权书学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅或借阅。本人授权上海海洋大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密□，在年解密后适用本版权书。本学位论文属于不保密□学位论文作者签名：指导教师签名：日期：年月日日期：年月日上海海洋大学博/硕士学位论文答辩委员会成员名单姓名工作单位

3、职称备注李思发上海海洋大学教授主席赵金良上海海洋大学教授委员傅萃长复旦大学教授委员罗永巨广西水产科学研究院研究员委员委员委员委员王军上海海洋大学讲师秘书答辩地点水产与生命学院C217答辩日期2015.6.11上海海洋大学硕士学位论文中华绒螯蟹性早熟分子机制的初步研究摘要中华绒螯蟹（Eriocheirsinensis），俗称河蟹，是我国非常重要的水产经济动物。然而在中华绒螯蟹幼蟹阶段的培育过程中，性早熟问题一直困扰着河蟹产业的健康发展，给河蟹的养殖造成了较大损失。本文采取同一家系个体从仔蟹开始，直到幼蟹和性早熟蟹进行不同发育阶段生长、外形观察和相关基因（如蜕皮抑制激素MIH、蜕皮激

4、素受体EcR、维甲类X受体RXR、性腺抑制激素GIH、高血糖激素CHH和卵黄蛋白原Vg基因）的表达研究，以及性早熟蟹与非早熟蟹的比较转录组学研究，将幼蟹生长、外形变化与基因表达进行关联分析，探讨了河蟹性早熟的内在分子基础。具体结果如下：一、中华绒螯蟹仔蟹在不同饲养环境中的生长观察与蜕壳相关基因表达分析中华绒螯蟹在不同饲养环境条件下生长存在巨大差异，为探讨不同环境条件对仔蟹生长、蜕壳相关基因表达的影响，了解基因表达的时空变化及其与环境的互作关系，本研究选取同一家系的大眼幼体和仔蟹分别饲养于室内水槽和室外池塘两种环境，观察它们在不同环境中的生长差异，并应用荧光定量PCR(qRT-PC

5、R)技术对甲壳动物高血糖素（CHH）、蜕皮抑制激素（MIH）、蜕皮激素受体（EcR）、维甲类X受体（RXR）以及性腺抑制激素（GIH）5个相关基因的表达情况进行了分析。研究发现：室外池塘饲养的仔蟹体重均显著大于室内水槽饲养的仔蟹体重（P<0.05）。环境对MIH和RXR基因的表达不I上海海洋大学硕士学位论文存在显著影响（P>0.05），而对CHH、EcR和GIH基因的表达均有显著的影响（P<0.01）；五个基因（MIH、CHH、EcR、GIH和RXR）均存在显著的不同发育时期表达差异（P<0.05）；四个基因（RXR、CHH、EcR和GIH）的表达存在极显著的环境与发育时期的交互

6、作用（P<0.01），但MIH基因的表达量无显著的交互作用（P>0.05）。研究还发现，MIH，GIH和CHH对河蟹的蜕壳具有协同调控作用，而RXR与GIH对河蟹蜕壳具有一定程度的拮抗作用。二、中华绒螯蟹幼蟹阶段生长与相关基因表达的关联分析性早熟是幼蟹培育过程中的一个特别生物学现象，而目前对性早熟产生的内在分子机制研究却相当不足。本部分论文以同一家系幼蟹为材料，在6－10月份定期对幼蟹进行生长测定、外形观察，以及生长、蜕壳和性腺发育相关基因的表达分析。结果发现：幼蟹在7月份的增长率最大，以后逐月下降；8月份幼蟹开始出现性早熟倾向，10月份的性早熟程度最高；蜕皮抑制激素（MIH）基

7、因的表达量随着月份增大而呈下降趋势，高血糖素（CHH）、蜕皮激素受体（EcR）和维甲类X受体（RXR）这三个基因在6月份的表达量显著高于其它月份，而性腺抑制激素（GIH）和卵黄蛋白原（Vg）在10月份的表达量显著高于其它月份；MIH、CHH、EcR、RXR这四个基因的表达量均存在两两间的显著正相关，CHH和GIH基因间的表达量也呈显著正相关；幼蟹体重和GIH、Vg基因的表达量呈显著正相关，而与MIH、CHH、RXR基因的表达量呈显著负相关（P<0.05）；性早熟蟹与非性早熟蟹间只