兔胫骨延长对半月板病理组织学影响的实验研究

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1、分类号：R687.3+5学校代码：10062密级：学号：2012602618硕士学位论文MASTER’SDISSERTATION论文题目：兔胫骨延长对半月板病理组织学影响的实验研究TITLEExperimentalstudyofhistopathologicalchangesofmeniscusduringtibiallimblengtheningofrabbit一级学科：临床医学二级学科：外科学骨外论文作者：赵锦伟指导教师：舒衡生天津医科大学研究生院二〇一五年五月分类号：R687.3+5学校代

2、码：10062密级：学号：2012602618学位类别：科学学位专业学位学科门类：医学硕士学位论文MASTER’SDISSERTATION论文题目：兔胫骨延长对半月板病理组织学影响的实验研究TITLEExperimentalstudyofhistopathologicalchangesofmeniscusduringtibialdistractionosteogenesisofrabbit一级学科：临床医学二级学科：外科学骨外论文作者：赵锦伟指导教师：舒衡生天津医科大学研究生院二〇一五年五月

3、学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的论文是我个人在导师指导下独立进行研究工作取得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容和致谢的地方外，论文中不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。学位论文作者签名：日期：年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解天津医科大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，并采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编

4、以供查阅和借阅。同意学校向国家有关部门或机构送交论文，并编入有关数据库。保密，在年解密后适用本授权书。本论文属于不保密。（请在相对应的方框内打“√”）学位论文作者签名：日期：年月日导师签名：日期：年月日中文摘要目的使用自行设计的微型外固定架行兔胫骨截骨肢体延长，观察在不同延长长度和不同矿化时间对半月板的病理组织学的影响，为认识及预防肢体延长过程中的半月板的并发症提供理论基础。方法40只成年实验用白兔，重量2.5-3.0Kg，随机挑选入组，对照组4只，实验组36只。A组为对照组（仅截骨不延长,截骨

5、后延长开始前进行取材）；实验组按照不同延长长度随机分为B组（延长1cm，约为肢体长度10%），C组（延长2cm组，约为肢体长度20%），D组（延长3cm组，约为肢体长度30%）；各组内根据矿化期不同时间各分为3个亚组，即延长终止日（矿化期0天），延长终止后30日（矿化期30天），和延长终止后60日（矿化期60天），共3个时间点，每组各4只动物。兔麻醉下行右胫骨近端截骨自制外固定架固定术。术后自由活动，抗生素使用3-5天。截骨后第6日进行延长，以1mm/2-3次/天的速度均匀延长兔胫骨，根据分组相

6、应延长1、2、3cm。相应时间点分别取材内侧半月板，取材前拍摄实验侧正位X片，观察胫骨延长区的骨痂生成及重塑愈合、骨延长长度、膝关节间隙及关节是否脱位等。取材的组织放入盛有10%福尔马林液的封闭容器内，制备石蜡包埋切片进行甲苯胺蓝染色、苏木精-伊红（HE）染色和Ⅱ型胶原的免疫组化染色，观察半月板的形态结构变化、软骨细胞组织学改变及蛋白多糖分泌情况，检测半月板内Ⅱ型胶原在延长期、矿化期不同时相的表达情况。结果1、顺利完成兔胫骨截骨延长步骤。X线示截骨端之间的距离随着延长期进展而增大；延长区的骨痂影

7、响随矿化期延长逐渐密度增高，后期可见骨痂愈合，肢体整体力线正常；各组均达到相应的延长长度、延长幅度越大关节间隙减小越明显,其余未见异常。2、大体观察:A组（正常对照组）:正常膝关节半月板为白色半透明状,质韧有弹性,表面光滑。B组半月板与对照组相比无明显改变，半月板向周边轻微位移，C组半月板外观稍苍白,游离缘可见轻微磨损,弹性变差,表面可见轻微压缩痕迹和划痕,光泽欠均匀，与胫骨平台关节软骨无明显粘连,向胫骨平台周围明显移动。D组半月板颜色灰白，表面有划痕，明显向周边移动，边缘毛糙且厚度变薄,I滑膜

8、轻度增生及粘连,半月板与胫骨平台无明显粘连。3、随着延长幅度增加，半月板内的陷窝中细胞失去正常形态、软骨陷窝减小，半月板的胶原纤维排列松散紊乱,并有部分纤维发生中断。在延长1、2cm组，随矿化时间延长，软骨的形态有一定恢复，半月板内纤维排列无明显变化。延长3cm组，软骨细胞退化更加明显，随矿化时间延长，软骨细胞未见恢复迹象，半月板内纤维排列更加松散，纤维中断现象增加且无明显恢复迹象。4、甲苯胺蓝染色及Ⅱ型胶原免疫组化染色：各组半月板内软骨细胞周围的甲苯胺蓝染色及Ⅱ型胶原免疫组织化学染色均呈现随着