冬虫夏草相关菌株生物学特性及其与冬虫夏草菌相互关系的研究

《冬虫夏草相关菌株生物学特性及其与冬虫夏草菌相互关系的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、中图分类号０９３５：公开：密级ＵＤＣ：；本校编号讀Ｗ灸通乂肇硕±学位论文论文题目：冬虫夏草相关菌株生物学特性及其与冬虫夏草菌相互关系的研究‘研究生妓名：朱玉芝学号：０２１２６０４学校指导教师姓名：谢放职称：副教授申请学位等级：硕壬专业：微生物学２０１５．０４论义答辩日期１５．６．６论文提交日期：：２０独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究王作和取得的研究成果，除了文中特别加Ｗ标注和致谢之处外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含获

2、得盖州巧通大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料一。与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示了谢意。学位论文作者签名：五签字日期：；》巧审＾月／ｙ日矣＇学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解兰州交通大学有关保留、使用学位论文的规定。特授权兰州交通大堂可Ｗ将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，并采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编Ｗ供查阅和借阅。同意学校向国家有关部口或机构送交论文的复印件和磁盘。（保密的学位论文在解密后适用本授权说明）学签位字论文作者签名：＾五￡

3、导师签名；＾日期：年＾月辰日签字日期：＞／；年《月么、日硕士学位论文冬虫夏草相关菌株生物学特性及其与冬虫夏草菌相互关系的研究StudiesonBiologicalCharacteristicsofStrainsRelatedtoCordycepsandtheirRelationshipwithOphicordycepssinensis作者姓名：朱玉兰学科、专业：微生物学学号：0212604指导教师：谢放完成日期：2015-3-28兰州交通大学LanzhouJiaotongUniversity兰州交通大学硕士学位论文摘要本文通过阐述冬虫夏草的分类地位

4、、形态特征、生活史、寄主蝙蝠蛾幼虫等几个方面的研究概况，针对冬虫夏草菌存在多种学说以及到目前为止还未实现科赫法则的情况，提出研究冬虫夏草相关菌株这一问题的必要性；此外，文章中还详细阐述了冬虫夏草无性型、冬虫夏草相关菌株和微生物相互作用的研究情况。在此基础上，明确本研究的目的和意义，即通过普通生物学研究，了解相关菌株的生理特性并发现相关菌株对冬虫夏草菌的影响，为相关菌株的开发利用和侵染蝙蝠蛾幼虫提供一定的理论基础。利用实验室已有的冬虫夏草菌、蝙蝠蛾幼虫等资源以及中国被毛孢实验室培养技术。以甘肃省甘南榨油沟产冬虫夏草虫体为实验材料，分离得到13株相关菌株，用平板划

5、线和显微镜挑取单个菌丝的方法对13株菌分别进行纯化，通过平板对峙试验的方法筛选出对冬虫夏草菌产生明显抑制作用的7株真菌，提取总DNA后以此为模板进行ITS序列扩增，测序并建立系统发育树。同时，对筛选的供试菌株进行最适温度、pH、最优碳源和氮源的生物学特性研究。另外，采用平板对峙的研究方法，分别和不同接菌时间的中国被毛孢进行3次对峙培养研究，观察共同生长时对中国被毛孢产生的影响，用供试相关菌株侵染蝙蝠蛾幼虫，观察记录相关菌株对蝙蝠蛾幼虫侵染力以及侵染后蝙蝠蛾幼虫的形态特征。最后，以上述结果为基础，分析相关菌株的生物学特性、对中国被毛孢的影响以及对蝙蝠蛾幼虫的侵染

6、力。通过相关菌实验筛选实验得到了7株相关菌株，本研究对相关菌株定义为分离自冬虫夏草，对中国被毛孢的生长产生一定影响并对寄主幼虫有侵染力的菌株。形态学和分子生物学鉴定结果显示：3-2-1、3-4-2和3-5-2分别是曲霉属的杂色曲霉、肉色曲霉和田纳西曲霉，2F-2是棒束孢属的玫烟色棒束孢，JC-1是拟青霉属的蝙蝠蛾拟青霉，1-1是白僵菌属的白僵菌，其相似性均为99%以上。生物学特性研究表明：3-2-1、3-4-2和3-5-2的最适生长温度为23℃，最适pH为6.5，3-2-1的最优碳源为麦芽糖，3-4-2和3-5-2的最优碳源为蔗糖，这三株菌的最适氮源均为麸皮；

7、2G-3-2的最适生长温度为23℃，最适pH为6.5，最优碳源为麦芽糖，最优氮源为牛奶；2F-2的最适生长温度为20-23℃，最适pH为7.5，最优碳源为可溶性淀粉，最优氮源为黄豆粉；JC-1的最适生长温度为20-23℃，最适pH为7.5，最优碳源为麦芽糖，最优氮源为牛奶和黄豆粉；1-1的最适生长温度为20-23℃，最适pH为7.5，最优碳源为蔗糖，最优氮源为麸皮。平板对峙实验结果显示：同时接菌时，相关菌株对中国被毛孢均产生了抑制作用，当中国被毛孢提前接菌30天时，相关菌株对中国被毛孢的抑制作用发生变化。三次试验中，3-2-1和3-4-2对中国被毛孢的抑制作用

8、随着中国被毛孢生长稳定而减弱，甚至会I