四氯苯醌激活caspase 8t-bid诱导pc12细胞凋亡的信号通路分析

四氯苯醌激活caspase 8t-bid诱导pc12细胞凋亡的信号通路分析

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1、单位代码10635学号112012329002003硕士学位论文asase-四氯苯醌激活Cp8/tBid诱导PC12细胞馮亡的信号通路分析论文作者:胡丽华指导教师:宋杨教授学科专业:药物分析学研究方向:体内药物分析提交论文日期:2015年4月06日论文答辩日期:2015年5月22日学位授予单位:西南大学中国?重庆2015年5月A'DissertationforMastersDegreeofSouthwestUniversityTCB

2、Q--inducescasase8/tBiddeendentaototicppppsinalinathwainPC12cellsggpyCandidate:LihuaHuAdivisor:Prof.YangSongDiscipline:PharmaceuticalAnalysisDirection:BiopharmaceuticalAnalysisChonn-gqigChinaMa2015y独创性声明-学位论文题目:四氯苯醌激活Caspase

3、8/tBid诱导PC12细胞调亡的信号通路分析本人提交的学位论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。论文中引用他人已经发表或出版过的研究成果,文中已加了特别标注。对本研究及学位论文撰写曾做出贡献的老师。、朋友、同仁在文中作了明确说明并表示衷心感谢学位论文作者签字曰期Z月r日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解西南大学有关保留、使用学位论文的规定,有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅。本人授权西南大学研究生院(筹)可

4、以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学:□位论文在解密后适用本授权书,本论文不保密,□保密期限至年月止)。丨々J学位论文作者签名:佩讀签名r曰::T曰签字曰期丨义年M签字曰期年<月J4^Tm-^IABSTRACTIll缩写符号对照表a一1第章绪论11.弓1丨W1.2四氯苯醌11.211.四氯苯醌的性质1.2.2四氯苯醌的应用213.活性

5、氧简介214细胞.调亡21.4.13受体依赖的细胞凋亡的信号传导通路外部通路()1..42线粒体依赖的细胞凋亡的信号传导通路(内部通路)31.4.34内质网调亡通路-1.5Casase8/tBpid通路4151C..aspase841.5.2Bid516立5.题依据和意义asaset-BidPC12细胞第二章四氯苯醌激活Cp8/诱导调亡7217.弓m2.27实验材料2.2.1主要试剂72.2.2主要仪器和设备72.

6、2.3主要溶剂82.3实验方法92.3.1细胞培养、冻存和复苏922.3.细胞存活率92.3.3乳酸脱氧酶活性的检测102.41.3细胞形态观察02.35.线粒体膜电位(MMP)检测11-.VFITCPI方法检112.36Annexin/测细胞调亡122.3.7免疫焚光双染实验2.3.8细胞蛋白提取122.3.9Westernblot实验12i4西南大学硕士学位论文2.3.10数据统计13213.4实验结果2

7、.4.1TCBQ对于PC12细胞存活率的影响132.4.2TCBQ对PC12细胞乳酸脱氢酶的影响142.4.3TCBQ诱导PC12细胞凋亡152.4.4TCBQ通过激活线粒体通路诱导细胞凋亡172.4.5TCBQ通过激活死亡受体通路诱导细胞调亡18-2.4.6TCBQ通过tBid表达而激活内外凋亡通路182.4.7Caspase8抑制剂对TCBQ诱导凋亡的影响192.5讨论20第三章ROS在casase-8/tBid通路中的作用及机制研究23p

8、3.1弓23,3.2实验材料233.2.1溶剂与试剂233.2.2主要仪器和设备233.3实验方法243.3.1ROS的检测24332GSH24..含量的测定3.3.3MDA含量的测定243.3.4蛋白质羰基含量的测定253.3.5抗氧化剂NAC对死亡受体通路的影响253.4实验结果

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