山核桃嫁接过程中auxiaa基因功能研究和小rna测序分析

《山核桃嫁接过程中auxiaa基因功能研究和小rna测序分析》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、々料鑛巧级不保密Ｕ口£５７７硕±学位论文５山核桃嫁梭过程中Ａｕｘ／ＩＡＡ遮因功能研究和小ＲＮＡ测序分析作者姓名：司马晚娇指皆教师＝涨炳松教授专业学位名称：化物化学与分子化物学研究方向：经巧林培巧巧利用所在学院：林业巧生物技术学院论义提交日期：２０１５年４月浙江农林大学２０１５年４月独创性声明本人卢明，所呈交的学位论文，是在郑柄松导师指导下，通边我的努力取得的成果，并置是白己撰写的。尽我所知，除ｒ文中作了标巧和致谢中已经作Ｔ笞

2、谢的地方外，论文中不包含其他人技表或撰写过的硏兜成聚，也不狂含在浙江农林大学或其化巧育机构喪得学位或化书而使用过丄一的村料，。如。ｊ我同巧本研巧做出贡献的同志都巧论义中作了叨贿的说明并巧示了谢意被查ｆ有严重怯犯他人知识产权化巧巧，由本人承担应有的责任－学位论文作者亲笔签名：弓受蜡去曰期：玉方论文使用授权的说明本人完全了解浙注林学院有关保留、使用学位论文的规巧，即学校有权送巧论文的复印件，Ｌ化许论文被查间和借閒，可：Ａ：学校巧Ｗ公布论文的全部或部分内容采用影印、缩印或其他复制手段

3、保存论立。。，在后解密可适用本授权书□保密＾年／■不保密。因，本学位论文属于不保密。＂（请在方框内打Ｖ）学位论文作者豪笔签名：曰期：，／、．Ｉ＊弓曼蜂手指导教师亲笔签名：丘堂技＿日巧；认也化ZhejiangA&FUniversityDissertationfortheDegreeofMasterFunctionalstudayofaprimaryauxin-responsiveAux/IAAgeneCcIAA1andsmallRNAsequencinganalysisdurin

4、ggraftprocessCandidate:SIMAXiaojiaoAdviser:ZhengBingsongSpecialty:BiochemistryandMolecularBiologyDateofSubmission:April,2015ZhejiangA&FUniversityLin’an,zhejiangprovince,P.R.ChinaApril,2015中文摘要中文摘要作为山区农民脱贫致富的主要经济树种，山核桃（CaryacathayensisSarg.）具有很多困难的问题比如童期较长，不

5、容易采收，树体高大以及园艺化栽培等，这就是山核桃的产业发展上的巨大难题。但是植物嫁接手段是植物的无性繁殖里面比较重要的植物栽培技术，也是解决山核桃优良种质及园艺栽培的重要手段。并且随着嫁接的成熟，人们开始探讨嫁接的机理问题，从而能够更好地指导嫁接。本研究根据基因克隆获得山核桃生长素原初响应基因（CcIAA）片段，采用RACE技术克隆CcIAA基因的cDNA全长，同时进行同源性比对和系统进化树分析，并利用qRT-PCR，Westernblot技术分析了在山核桃嫁接过程中CcIAA基因在转录和翻译水平上的表达情况

6、。同时为了探究小RNA在山核桃的嫁接过程里面所起到的功能作用，研究了山核桃嫁的接过程里三个不同阶段（0天，7天和14天）的小RNA测序数据生物信息学分析。主要的研究结果：1克隆获得的CcIAAcDNA从起始的密码子atg，到终止的密码子tga一共含有591个碱基，共编码196个氨基酸。CcIAA与17种树种的17个基因进行同源性比对，发现该基因与其他植物Aux/IAA基因同源性比较高。系统进化树分析同样表明CcIAA与蓖麻RcIAA基因聚为一类，说明它们的亲缘关系最相近，而与其关系比较远的则是鹰嘴豆CaIAA

7、和菜豆PvIAA。2利用qRT-PCR技术，对不同激素处理条件下（如空白的对照，4mg/lIAA和0.3ug/lNPA）不同嫁接时间段（0d,1d,3d,5d,7d和14d）山核桃CcIAA基因的转录表达进行分析。结果说明：对照组里面，山核桃CcIAA基因表达量在砧木和接穗中都是从嫁接前到嫁接后7天都是持续下降的，并且在7天时其表达量几乎为0，但是到14天其表达量会比嫁接前更高。通过IAA处理的山核桃CcIAA基因表达量在嫁接后1天会急剧升高，在随后的4天里，该基因的表达量逐渐下降，然后一直到14天，其表达量

8、都是上升的。砧木和接穗中该基因的表达趋势一致。通过NPA处理，无论是接穗还是砧木，山核桃CcIAA基因表达量明显在嫁接之后7天里都是比较低的，到14天明显升高。用IAA处理过的山核桃CcIAA基因表达量和对照相比是升高的，而用NPA处理过的山核桃CcIAA基因表达量和对照相比也是升高的，但是用IAA处理的表达量表达量则升嫁接前期却没有NPA处理后上升明显。I中文摘要3利用Westernblot技术，