抑制hedgehog信号通路对小鼠胚胎间充质干细胞成脂分化的影响

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1、分类号＿諭密级公开级ＵＤＣ５７９硕±学位论文Ｈｅｄｅｈｏ抑制ｇｇ信号通路对小鼠胚胎间充质干细胞成脂分化的影响Ｉ王利娟作者姓名：指导教师：岳万福副教授学科专业名称；巧生动植物保护与利用研究方向：干细胞分化所在学院；林业与生物技术学院论文提交日期；２０１５年５月３０日浙江农林大学２０１５年６月０１日ＩZhejiangA&FUniversityDissertationfortheDegreeofMasterEffectsofInhibitingHedgehogsignal

2、ingonadipogenicdifferentiationinmouseembryonicmesenchymalstemcellsCandidate:WANGLi-juanAdviser:YUEWan-fu,Vice-ProfessorSpeciality:WildFaunaandFloraProtectionResearchDirection:MesenchymalstemcellsdifferentiationDateofSubmission:May30th,2015ZhejiangA&FUniversityLin’an,Zhejiangpro

3、vince,P.R.ChinaJune,2015独创性声明，本人声明，所呈交的学位论文是在指导教帅指导下，逍过我的努力取得的成果，并且是自己撰写的。尽我所知，除了文中作了标注和致谢中己经作了答谢的地方外，论文中不包含其他人发表或撰与过的研究成果，也不化含在浙江农林大学或其他教育机构获巧学位或证书而使用过的材料一。与我同对本研究做出责献的同志，都在论文中作了明确的说明并表示了谢意。如被查有严重慢犯他人知识产权的行为，由本人承担巧有的责任。知础Ｗ１化如化学位论文作者亲笔签名：日期：论文使用授权的说明本人完全了解浙江农林大学

4、有关保留、巧用学拉论文的规定，即学校有权送交论文的复印件，允许论文被査阅和借阔！学校可臥公布论支的全部或部分内容，可Ｗ采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。保密，在年后解密可适用本授权书。□＿不保密本学位论文属于不保密。过，‘’（请在方框内打寸）省味化学垃论文作者亲窜签名：日期：指导教师亲笔签名；方福日撕；？。化ｆ摘要摘要肌内脂肪是影响猪肉风味的重要因素之一，肌内脂肪含量过低导致肉制品风味下降。肌内脂肪含量性状与瘦肉率性状之间呈负相关，单靠遗传育种同时解决猪的瘦肉率和肌内脂肪含量问题已经遇到瓶颈。因此我们试图寻求一种

5、育种方式能在提高瘦肉率的同时又保证肌内脂肪含量不降低。通过Hedgehog信号途径在胚胎发育期调控间充质干细胞向脂肪方向分化，以此机理指导猪的育种工作，筛选出提高猪的瘦肉率并能增加肌内脂肪含量的最佳育种组合，为我国瘦肉型猪的培育和猪肉品质调控研究提供新的研究思路。Hedgehog信号通路广泛存在于脊椎动物和无脊椎动物体内，在动物胚胎多种组织器官的生长发育过程中发挥重要作用。近年来，越来越多的国内外研究已证明，Hedgehog信号通路在动物脂肪细胞的生长发育过程中发挥调控作用。激活动物体内Hedgehog信号通路能够抑制脂肪细胞的生长发育，然而反过来抑

6、制动物体内的Hedgehog信号通路是否能促进脂肪细胞的分化尚未明确。因此，本文就此问题展开研究，旨在寻找一种能在不降低瘦肉率的前提下提高肌内脂肪含量的科学方法，为瘦肉型猪的培育和猪肉品质调控研究提供参考依据。本研究旨在解析Hedgehog信号通路在小鼠胚胎间充质干细胞成脂分化过程中发挥的作用，为瘦肉型猪的培育和猪肉品质调控研究提供参考依据。本研究构建小鼠间充质干细胞C3H10T1/2细胞系为试验模型，用不同浓度环靶明（5μmol/L,10μmol/L,15μmol/L或20μmol/L）处理细胞，同时参考添加成脂诱导剂（10μg/mL胰岛素，1mm

7、ol/L地塞米松，200μmol/L吲哚美辛，0.5mmol/LIBMX）对细胞的成脂分化诱导作用，分别在诱导的第1天、第2天、第3天、第7天、第14天和第21天提取细胞mRNA和蛋白用于后续试验。qRT-PCR法检测Hedgehog信号通路相关基因、成脂分化调控基因PPARγ，C/EBPα以及成脂分化标志基因FABP4在转录水平上的表达情况；采用westernblot法检测Hedgehog信号通路蛋白、成脂分化调控蛋白和FABP4蛋白的表达水平；利用油红O染色法，检测细胞内脂滴形成情况。摘要试验结果发现，使用环靶明诱导C3H10T1/2细胞导致细胞

8、Hedgehog信号通路各基因相对表达量下降，成脂分化调控基因以及成脂分化标志基因FABP4相对表达量升高。