多发性肌炎皮肌炎外周血单个核细胞microrna表达谱分析

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1、也，京碱如皆ｆ化临床医学专业学生毕业论文＾（八年制）巧雞鼠、ｍｉ為苗学校代码：１００２３学号：２００７０１０４３多发性肌炎／皮肌炎外周曲单个核细胞ｍｉｃｒｏＲＮＡ表达谱分析专业年级：北京协和医学院临床医学专业２００７级姓名：何林蓉导师；曾小峰（教授）指导老师：王迁（副教授）吴婢媛（副教授）北京协和医学院临床学院（北京协和医院）风湿免疫科完成日期；２０１５年６月１目录中Ｓ１：：摘要ＡＢＳＴＲＡＣＴ３前胃５基础实验一（）７肌炎

2、外周血单个核细胞Ｍ多发性肌炎／皮ＩＲＮＡ表达谱７Ｗ加的７ｍｍｍ？研？Ｅ施８１２研究结果１９基釉实验（二）２１－证ＲＥＡＬＴＩＭＥＰＣＲ验ＰＭ／ＤＭ患者阳ＭＣ中ＭＩＲＮＡ及其範基因的差异表达２１臟＠的２１細料２１献城２２織娜２５讨论３０３２一临床部分（）３３多发性肌炎／皮肌炎血清抗体与临床的相关性分析巧资料及方法３３结果３５４０紀论４２临床部分（二）４３多发性肌炎／皮肌炎患者住院死亡的相关危险因素分析

3、４３资料与方法４３４５Ｗ论４７４９参考文献４９综述５４多发性肌炎／皮肌炎病因及发病机制综述５４附录６４２中文摘要目的：（１证与多发性肌炎（ｏｌｍｓｉｔｉｓＰＭ）和皮肌炎（ｄｅｒｍａｔｏｍｏｓｉｔｉｓ）筛选并验ｐｙｙｏ，ｙ，ＤＭ）相关的外周血ｒａｉｃｒｏＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）标志物。（２）分析ＰＭ／ＤＭ患者血清中肌炎相关抗体（ｍｙｏｓｉｔｉｓａｓｓｏｃｉａｔｅｄａｎｔ化ｏｄｉｅｓ，ＭＡｓ）和肌炎特异性抗体（ｍｙｏｓｉｔｉｓｓｅｃｉｆｉｃａｎｙｂ

4、ｏｄｉｅｓＭＳＡｓ）的＾１。（３）ｐ，阳性率＞及与临床的相关性探索ＰＭ／ＤＭ患［者住院死ｔ相关危险因素。方叛１过ｍｉＲＮＡ表达谱芯片筛选未经治疗的ＰＭ／ＤＭ患者外周血单个核细胞（）通（ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌｂｌｏｏｄｍｏｎｏｎｕｃｌｅａｒｃｅｌｌｓ，ＰＢＭＣ）中差异性表达的ｍｉＲＮＡ。通过文献检索及生物信息学分析，对差异表达的ｍｉＲＮＡ进行进行靴基因预测及信号通路分ＮＡｒｅａ－ｔ析，挑选出与ＰＭ／ＤＭ发病相关的ｍｉＲ进行扩大样本的ｌｉｍｅＰＣＲ验证，并分析其表达水平与临床特征及实验室指标的

5、相关性。应用ｒｅａｌｔｉｍｅＰＣＲ方法探索差异表达ｍｉＲＮＡ的祀基因在ＰＢＭＣ中的表达水平。（２）回顾性收集北京协和医院诊治的ＰＭ／ＤＭ患者２２８例，收集患者住院及口诊病案记录的临床资料及血清ＭＡＡｓ、ＭＳＡｓ检测结果。分析每种ＭＡＡｓ和ＭＳＡｓ的阳性率，并将患者根据每种抗体分为抗体阳性组和阴性组，比较两沮间临床资料的差异，分析抗体和临床的相关性。（３）回顾性分析北京协和医院住院死亡的４５例ＰＭ／ＤＭ患者，Ｗ９０例存活患者作为对照，收集两组患者的往院病历资料，进行二元ｌｏｇｉｓｔｉｃ回归筛选和住院死

6、亡相关的危险因素。结果：１６ＰＭ／ＤＭ３ｅａｌｔｈｃｏｎｔｒｏｌｓＨＣ）的（）对例未经治疗的患者及例健康对照化，ＰＢＭＣ进行ｍｉＲＮＡ芯片检测３８ｉＲＮＡ２４，，筛选出条异性表达的ｍ，其中条表达上调１４条表达下调。结合ｍｉＲＮＡ差异表达倍数、表达丰度，通过文献检索和生物信息学ｈｓａ－ｍ－－－－－－－－－－分析，挑选出ｉＲ３２０ａ、ｈｓａｍｉＲ３３５化、ｈｓａｍｉＲ３４ａ日Ｐ、ｈｓａｍｉＲ４５４化一－进行进步验证。通过３４例ＰＭ／ＤＭ患者及２０例ＨＣ的ｒｅａｌｔｉｍｅＰＣＲ证实ｈ－－－ｓａｍｉ

7、Ｒ：３４ａ日Ｐ在ＰＭ／ＤＭ组ＰＢＭＣ中较ＨＣ组表达显著上调，相对表达量（ｒｅｌａｔｉｖｅ＝－－ｔｉｔＲＱ３．２０１．．２４．１．６＋０．９１Ｐ０００１ｍｉＲ３２０ｑｕａｎｙ，）为（８７９ｖｓ８，．。ｈｓａａ、，）－－－－－－显著差异ｈｓａｍｉＲ３３５ｈｓａｍｉＲ４５４３。亚沮分析中化、ｐ在两组间表达水平无，－－－ｉｉｈｓａｍｉＲ３４ａ５ＤＭ纽、肺间质病变（ｎｔｅｒｓｔｉｔａｌｌｕｎｇｄｉｓｅａｓｅＩＬＤ）ｐ的表达水平在，１－Ｄ组－－沮和ＤＭＩＬ表达较ＰＭ组、无肺间质病变（ｎｏｎ化Ｄ）组、Ｄ

8、ＭｎｏｎＩＬＤ组显著上调，ＲＱ值分别为４．８１２．３９１０．９２ｖｓ．１．４５＋０．８９片０．００１５．８５（２．６６１３．２２ｖｓ．１．９４（），；，），＝＋片－１１１１２（１．３６３．１３）戶０．００１６．３２３．３．３２ｖ