斜纹夜蛾免疫基因dorsal和relish的克隆表达以及免疫通路研究

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1、分类号Ｓ４８２．３ｎｆｃＯｉｎ学号連ｍｍ苗京農读义餐硕±学位论文斜纹夜蛾免疫基因公０心口／和巧ｅ化Ａ的克隆表达ｋＸＲ免疫通路研究？—？．．？’—蔡杨杨Ｉ■、指导教师苏建亚教授整…＇－药学专业学位杀虫齐。毒理与抗药性研究方向答辩曰其月二〇—五年六月．■：．＾Ｅｘｒｅｓｓｉｏｎｒｏ巧ｌｅｓｏｆｔｗｏｓｌｉｃｅｄｖａｒｉａｎｔｓｏｆｐｐｐｄｏｒｓａｌａｎｄｒｅｌｉｓｈｉｎＳｐｏｄｏｐｔｅｒ

2、ａｌｉｔｕｒａｌａｒｖａｃｈａｌｌｅｎｅｄｗｉｔｈｍｉｃｒｏｂｅｓｇＢＹＹａｎｇｙａｎｇＣａｉＡＴＨＥＳＩＳＳｕｂｍｉｔｔｅｄｔｏＮａｎｉｎ乂ｒｉｃｕｋｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｉｎＰａｒｔｉａｌｊｇｇｙＦｕｌ打ｌｌｍｅｎｔｏｆｔｈｅＲｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔｓｆｏｒｔｈｅＭａｓｔｅｒＤｅｒｅｅｏｆＳｃｉｅｎｃｅｇＳｕｐｅｒｖｉｓｅｄｂｙＰｒｏｆｅｓｓｏｒＪｉａｎｙａＳｕＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＰｅｓｔｉｃｉｄｅＳｃｉｅｎｃｅ，

3、ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＰｌａｎｔＰｒｏｔｅｃ村ｏｎＮａｎｉｎＡｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｊｇｇｙＮａｎｉｎ２１００９５Ｐ．Ｒ．Ｃｈｉｎａｊｇ，化ｎｅ２０１５原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文是本人在导师的指导下独立进行研究工作所，，取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体己经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中Ｗ明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。６

4、＞学位论文作者（需亲笔）签名：厂年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子版。，允许论文被查阅和借阅本人授权南京农业大学可Ｗ将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密□在年解密后适巧本授权书。本学位论文属于不保密ｔｅｆｌ，＿＿＂＂（请在Ｗ上方框内打Ｖ）＾学位论文作者（需亲笔）签名：＾月日导师（需亲笔）年月心

5、日三目录目录摘要ＩＡＢＳＴＲＡＣＴＩｌｌ英文缩略词ＶＩＩ第一章文献综述１１昆虫先天免疫１Ｕ昆虫先天免疫１１．２免疫信号途径２２．斜纹夜蛾６３本研究的目的与意义６第二章Ｒｅｌｉｓｈ和Ｄｏｒｓａｌ及其剪切体基因克隆９１１．材料与方法０１．１供试昆虫１０１．２主要试剂和仪器设备１０１．３Ｒｅｌｉ化和Ｄｏｒｓａｌ基因片段的克隆和验证１１１．４斜纹夜蛾Ｄｏｒｓａｌ和Ｒｅｌｉ油基因的末端克隆１５１Ｄｏｒｓａｌ和民ｅ

6、ｌｉ化系统发育分析１７．５２．结果与分析１８２．１Ｄｏｒｓａｌ矛口民ｅｌｉｓｈ序歹！Ｊ分析１８２．２进化分析１８３．２５第兰章Ｄｏｒｓａｌ和Ｒｅｉｋｈ的时空表达特征和诱导表达研究Ｔ１１．材料与方法２８１．１供试昆虫２８１．２．微生物２８１．３试剂和仪器设备２９１４实时定量ＰＣ民２９．１４．．１引物设计巧１．５微生物对基因表达的诱导３１１．６数据分析３２２．结果与分析３２ｉ斜纹夜蛾免疫基因Ｄｏｒｓａｌ和Ｒｅｌｉ

7、ｓｈ的克隆表达Ｗ及免疫通路研究ｌｌｉ２１ｅｓｈ．斜纹夜蛾Ｄｏｒｓａ和民基因的时空表达３２２２斜纹夜蛾当被微生物侵染后ｄｏｒｓａｌ和ｒｅｌｉｓｈ的表达谱％．３．Ｗ论３９第四章Ｄｏｒｓａｌ和Ｒｅｌｉ油及其剪切体功能研究４１１材料和方法４１１１昆虫和微生物４１．１．２ＲＮＡ引物设计４２１３模板ＤＮＡ的合成４３１．４ｄｓＲＮＡ的体外转录合成４３１５ｄＲＮＡ４４．ｓ的注射及取样１ＲＮＡ．６ｄｓ和微生物悬浮液共同注射及统计死亡率４５１／７

8、ＲＮＡｉ效率的检测４５１．８ＲＮＡｉ处理后注射微生物生物测定４７２．结果与分析４７２．１ＲＮＡｉ效率的检测４７２．２ＲＮＡｉ处理后注射微生物悬浮液生物测定４９．４９３第五章表达ＤｏｒｓａｌｄｓＲＮＡ载体的构建５３１实验材料和主要器材５３１１．实验材料５３１．２主要试剂５３１．３培养基和缓冲液５３２．实验方法