超声对金黄色葡萄球菌生物膜的体外研究

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1、1«霣苓轮硕士学位论文超声对金黄色葡萄球菌生物膜的体外研究Ultrasoundofstaphylococcusaureusbiofllminvitrostudy作者：张伟导师：蔚艾二•一五年五月中图分类号R639学校代码10634UDC617.3密级授予单位川北医学院超声对金黄色葡萄球菌生物膜的体外研究Ultrasoundofstaphylococcusaureusbiofilminvitrostudy作者张伟导师蔚芃培养院系临床医学院授位类别学术学位授位级别硕士学科门类医学学科专业外科学研究方向骨与关节损伤修复与重建年级2012级学号201203096二○一五年五月致谢当文章写

2、到此处，也意示着我的硕士研究生生涯临近尾声，回首三年来的学习经历，以及近一年来完成论文的光阴，心中感慨良多。我满怀一颗感恩的心面对身边所有的老师、同学和朋友们，不知道感谢二字能否表达出心底那份最深厚的情谊。感谢我的导师蔚芃主任，一位才华横溢的学者，一位宽厚仁慈的长辈，一位可以谈心的朋友，尽管从中学到的东西仅仅九牛一毛，却能让我受益终生。在我的论文的每一次修改过程中，老师帮助我开拓研究思路，精心点拨，热忱鼓励，并为我指点迷津，才使得我在面对各种问题的时候得以豁然开朗。不仅教会我学术的点点常识，更教我做人道理，虽历时三载，却给以终生受益无穷之道。对老师的感激之情是无法用言语来表达的，

3、学生只有通过不断学习不断前进来作为对老师的报答。同时，我也要感谢川北医学院骨科的全体医生护士，感谢他们三年来对我的帮助和支持，要感谢吴青老师，何江涛老师，陈路老师，宋超敏老师，蒲劲松老师，蒋成老师，明伟老师在我学习中给予的帮助和指导，感谢为我的实验设计和完成过程中提出宝贵的意见。此外，也十分感激科室内的师兄师弟们，在工作中对我的帮助，我能成为这个大家庭的一员，感到非常的荣幸。感谢风湿研究所的各位老师在实验过程中对我的技术指导和帮助，感谢我的同学们在实验中给予的帮助。最后还要感谢我的家人对我读书的支持和鼓励，他们是我努力前进的不竭动力。超声对金黄色葡萄球菌生物膜的体外研究摘要目的：

4、研究超声对常见细菌（金黄色葡萄球菌）的杀菌作用及其生物膜的破坏作用方法：1.采用引导片培养法建立金黄色葡萄球菌的生物膜体外模型，分为对照组（假辐照）实验组一（低强度超声辐照）和实验组二（HIFU高强度辐照组）。采用碘化丙啶(PI)和FITC-ConA分别标记细菌DNA和多糖,激光扫描共聚焦显微镜检测生物膜成型情况。2.用超声振荡-活菌计数法评价超声空化对BF菌的影响；用激光共聚焦显微镜采集不同层面的图像，观察细菌生物膜和细菌在超声空化前后的变化。结果：1.超声振荡-活菌计数法：对照组，实验组一和实验组二的菌3落分别为(5.12±0.81，5.14±0.66，3.97±0.43)l

5、gcfu/cm,经统计学比较，对照组与低强度组无明显差异，与高强度组有统计学差异。2.在激光共聚焦显微镜下观察，可得超声空化作用后绿色荧光染色的EPS及红色荧光染色的细胞核DNA有减少，强度越高，且减少量越多。结论：低强度的超声空化作用不能杀灭细菌，且对细菌生物膜的破坏作用微小；高强度的超声空化作用能有效杀灭细菌，并且对细菌生物膜具有显著的破坏作用。关键词：细菌生物膜；激光共聚焦显微镜；免疫荧光技术；超声空化UltrasoundofstaphylococcusaureusbiofilminvitrostudyAbstractObject:Tostudyultrasoniccavi

6、tationoncommonbacterium(Staphylococcusaureus)anditsdestructiveeffectonthebiofilmofthebacterium.Methods:1.Usetheguidanceplatecultivationmethodtoestablishanextracorporealmodelofbiofilmofstaphylococcusaureus,whichisdividedintothecontrolgroup(falseirradiation),experimentalgroupI(lowintensityultra

7、sonicirradiation)andexperimentalgroupII(highintensityHIFUirradiation).Propidiumiodide(PI)andFITC-ConAarerespectivelyadoptedtomarkDNAandpolysaccharideofthebacteria,andconfocallaserscanningmicroscopeisusedtoexaminethemoldingofthebilfilm.2.Ultra