egffoxm1在卵巢癌转移中的作用及作用机制研究

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1、夂考SOOCHOWUNIVERSITY硕士专业学位论文论文题目研究生姓名指导教师姓名专业名称研究方向论文提交日期苏州大学学位论文独创性声明及使用授权声明学位论文独创性声明本人郑重声明:所提交的学位论文是本人在导师的指导下,独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外,本论文不含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果,也不含为获得苏州大学或其它教育机构的学位证书而使用过的材料。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本人承担本声明的法律责任。论文作者签名:B期:学位论文使用授权声明本人完全了解苏

2、州大学关于收集、保存和使用学位论文的规定,即:学位论文著作权归属苏州大学。本学位论文电子文档的内容和纸质论文的内容相一致。苏州大学有权向国家图书馆、中国社科院文献信息情报中心、中国科学技术信息研究所(含万方数据电子出版社)、中国学术期刊(光盘版)电子杂志社送交本学位论文的复印件和电子文档,允许论文被查阅和借阅,可以采用影印、缩印或其他复制手段保存和汇编学位论文,可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索。涉密论文口本学位论文属在__年_月解密后适用本规定。非涉密论文El论文作者签名:I龜日期:2^:泰<导师签名:曰期:,

3、則EGF/FOXM1在卵巢癌转移中的作用及作用机制研究中文摘要EGF/FOXM1在卵巢癌转移中的作用及作用机制研究中文摘要研究目的:卵巢癌的发生伴随着各种基因通路的相互作用,研究这些基因的功能有助于癌症的基因靶向治疗。EGF、FOXM1基因均提示可能参与卵巢癌的发生与恶性进展,本课题通过临床标本及体外实验研究EGF/FOXM1在卵巢癌细胞增殖、转移中的作用及作用机制。方法:采用免疫组化SP法对临床上收集的卵巢癌组织标本和正常的卵巢组织标本检测FOXM1的表达情况;利用Westernblot技术分析人卵巢癌细胞HO8910PM、OV

4、CAR3、SKOV3等细胞中FOXM1的表达情况;不同浓度EGF作用于SKOV3细胞后用Westernblot法检测FOXM1的表达情况;cck8法检测不同浓度EGF对SKOV3细胞的增值影响;Transwell小室法检测不同浓度EGF对SKOV3细胞的迁移、侵袭影响;设计合成三种靶向人FOXM1基因的siRNA表达序列,应用脂质体TMLipofectamine2000共转染至SKOV3细胞作用24h后提取总蛋白,应用Westernblot技术分析转染后SKOV3细胞FOXM1蛋白表达量,选取敲除FOXM1效能最佳的siRNA序列

5、;cck8法检测敲除FOXM1后添加EGF与否对SKOV3细胞增殖的影响。结果:1、卵巢癌组织中FOXM1表达显著高于正常卵巢组织,FOXM1在卵巢癌OVCAR3细胞、SKOV3细胞、HO8910细胞中均有明显表达,其中SKOV3细胞表达量高于其他两种细胞;2、SKOV3细胞经不同浓度【浓度(ng/ml)=0、5、10、25、50、100】EGF处理后行Westernblot法检测提示EGF浓度为10ng/ml时FOXM1的表达量最高(P<0.05);3、SKOV3细胞经不同浓度【浓度(ng/ml)=0、5、10、25、50、10

6、0】EGF处理后行cck8检测提示10ng/ml浓度的细胞吸光度最高(P<0.01);浓度为10ng/ml的EGF作用于SKOV3细胞作为实验组,不加EGF作为对照,Transwell小室迁移实验24h后电镜拍照提示实验组细胞迁移率大于对照组(P=0.002),侵袭实验24h后电镜拍照提示实验组细胞迁移率大于对照组(P=0.015);4、三种靶向FOXM1的siRNA感染SKOV3细胞后Westernblot证实siRNA-FOXM1-801的沉默效果最好;cck8法检测siRNA-FOXM1-801沉默FOXM1后能显著抑制SK

7、OV3细胞I中文摘要EGF/FOXM1在卵巢癌转移中的作用及作用机制研究增殖(P=0.005);cck8法检测FOXM1–siRNA-801沉默FOXM1后吸光度提示对照组(未加EGF)和实验组(EGF=10ng/ml)统计结果无明显差异(P=0.882)。结论:FOXM1基因在卵巢癌组织中过表达,三株卵巢癌细胞株中均有FOXM1的过度表达,以SKOV3细胞的表达量最高;EGF浓度为10ng/ml时促进SKOV3细胞中FOXM1的表达作用最明显以及增强SKOV3细胞的增殖、侵袭能力,敲除FOXM1基因后EGF失去对细胞增殖的影响,

8、从而证明EGF可能通过EGF/FOXM1通路对卵巢癌细胞的增殖、转移等有间接调控作用。关键词:卵巢癌;EGF;FOXM1;SKOV3细胞;细胞增殖;细胞侵袭作者:王璐指导老师:陈友国IIEGF/FOXM1在卵巢癌转移中的作用及作用机制研究英文摘要T

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