龙葵毛状根诱导及其抑菌活性研究

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1、单位代码：10222学号：128043001分类号：Q94佳木斯大学硕士学位论文论文题目：龙葵毛状根诱导及其抑菌活性研究研究生姓名：王丽学科（专业）：植物学导师姓名、职称：李秀霞教授论文答辩日期：2015年6月7日佳木斯大学硕士学位论文论文题目：龙葵毛状根诱导及其抑菌活性研究研究生：王丽学科：植物学指导教师：李秀霞教授单位：佳木斯大学协助指导教师：戚晓利副教授单位：佳木斯大学李修平副教授单位：佳木斯大学单位：学习期限：2012年9月至2015年6月学位授予单位：佳木斯大学学术诚信承诺本人郑重声明：所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得研究成果。尽我所知

2、，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果，也不包含为获得佳木斯大学或其他教育机构的学位或证书所使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中做了明确的说明并表示了谢意。签名：___________日期：____________关于论文使用授权的说明本人完全了解佳木斯大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留送交论文的复印件，允许论文被查阅和借阅；学校可以公布论文的全部或部分内容，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。（保密的论文在解密后应遵循此规定）签名：___________导师签名：____

3、_______日期：____________目录摘要IAbstractIII一、前言1二、文献综述8三、材料与方法13四、结果23五、讨论27六、结论29七、参考文献33八、致谢34九、英文缩写35十、攻读学位期间发表的学术成果36十一、附图43佳木斯大学硕士学位论文摘要龙葵(SolanumnigrumL.)为茄科茄属一年生草本植物，是传统的中草药，全草可入药，所含生物碱能诱导肿瘤细胞凋亡和抑制肿瘤细胞转移，所含多糖可增强机体的免疫能力，临床中龙葵具有抗炎、抗休克、抑菌抗病毒、解热镇痛和祛痰止咳等作用。毛状根在有效药物成分上要比天然栽培植株中含有的有效成分偏高，并且

4、毛状根具有生长迅速、周期短并且生长条件简单等特点，因此可以利用毛状根生产中草药药物成分。以黑龙江省龙葵为实验材料，利用发根农杆菌（Agrobacteriumrhizogenes）A4、C58C1和A1476进行毛状根诱导，主要研究了发根农杆菌种类、外植体类型、菌液浓度、侵染时间、预培养时间和共培养天数等因素对龙葵毛状根诱导的影响，其次还研究了龙葵毛状根对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和芽孢杆菌的抑菌作用，分析了龙葵毛状根与龙葵实生根对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和芽孢杆菌的抑菌活性差异。1．发根农杆菌A4、C58C1和A1476侵染龙葵叶片均能诱导出毛状根，C58C1和A4诱

5、导率较高，分别为56%和54%，但A4诱导的毛状根粗壮且生长较快。2．用菌株A4对龙葵的叶片、茎段和叶柄进行侵染诱导。结果显示：叶片诱导率>茎段诱导率>叶柄诱导率，叶片的毛状根诱导率为51.7%，叶片生根也最早。3．以不同浓度的A4菌液侵染龙葵叶片，OD600的值为0.6时诱导率为58%，诱导率最高。4．用菌株A4对龙葵叶片分别选择不同侵染、预培养和共培养时间进行毛状根诱导，筛选的较佳侵染时间为5min，预培养和共培养时间均为2d时诱导率较高。5．龙葵毛状根PCR的检测结果显示，发根农杆菌的Ri质粒的T-DNA已经整合到了龙葵的毛状根基因组中。6．龙葵毛状根水提物对

6、3种供试菌均有抑制作用，龙葵毛状根对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌效果显著优于龙葵实生根；在3种供试菌中龙葵毛状根水提物对金黄色葡萄球菌的抑菌作用较强。I佳木斯大学硕士学位论文通过实验，初步建立了黑龙江龙葵毛状根诱导体系，并利用产生的毛状根进行了抑菌实验，为大量生产毛状根以及龙葵毛状根的后续研究提供实验基础。关键词：龙葵；发根农杆菌；毛状根诱导；毛状根水提物；抑菌作用II佳木斯大学硕士学位论文StudyontheinductionofhairyrootsofSolanumnigrumL.anditsantibacterialactivityAbstractSolan

7、umnigrumL.wasannualherbandbelongedtoSolanum,whichwasatraditionalChineseherbalmedicine,thewholeplantcouldbeusedasmedicine,thealkaloidsfromSolanumnigrumL.couldinduceapoptosisandinhibitmetastasisoftumorcells,thepolysaccharidesfromSolanumnigrumL.couldenhancethebody'simmunity.Solanumnigru