尼洛替尼联合三氧化二砷对k562细胞增殖及凋亡的影响

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1、授予单位代码10089学号或申请号20123002HebeiMedicalUniversity硕士学位论文专业学位尼洛替尼联合三氧化二砷对K562细胞增殖及凋亡的影响研究生：高晓晗导师：郝洪岭教授专业：内科学二级学院：河北省人民医院2015年3月河北医科大学学位论文使用授权及知识产权归属承诺本学位论文在导师（或指导小组）的指导下，由本人独立完成。本学位论文研究所获得的研究成果，其知识产权归河北医科大学所有。河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表与学位论文主要内容相关的论文，第一署名为单位河北医科大学，试验材料、原始数据、申报的

2、专利等知识产权均归河北医科大学所有。否则，承担相应法律责任。研究生签名导师签章:河北医科大学研究生学位论文独创性声明本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特别加以标注和致谢等内容外，文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果，指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写，文责自负。研允生签名：胥晚)酸导师签章:年（月$/曰目录中文摘要………………………………………………………………….1英文摘要……………………………………………………………….…4英文缩写……………………………………………………………….…7研究论文尼洛替尼

3、联合三氧化二砷对K562细胞增殖及凋亡的影响前言…………………………………………………………………8材料与方法…………………………………………………………9结果…………………………………………………………………14附图…………………………………………………………………17附表…………………………………………………………………19讨论…………………………………………………………………21结论…………………………………………………………………24参考文献……………………………………………………………25综述慢性髓细胞白血病的发病机制与治疗……..…

4、………………...30致谢………………………………………………………………………42个人简历…………………………………………………………………43中文摘要尼洛替尼联合三氧化二砷对K562细胞增殖及凋亡的影响摘要目的：本研究通过观察尼洛替尼（AMN107）联合三氧化二砷（ATO）对慢性髓细胞白血病细胞株K562细胞增殖及凋亡的影响，比较药物干预前后BCR-ABL基因表达水平的变化，旨在探讨两药是否具有协同作用，并进一步探讨其作用机制。为寻找慢性髓细胞白血病治疗新方法提供理论基础。方法：体外培养K562细胞，分为对照组与实验组。对照组只加培养基及细

5、胞；实验组分为AMN107组、ATO组和AMN107+ATO组。用不同浓度的AMN107（2.5、5.0、10.0μmol/L）、ATO（1.0、2.5、5.0μmol/L）和AMN107+ATO（选择AMN107组和ATO组的最佳浓度）连续作用于K562细胞72h。MTT法检测药物对K562细胞增殖的影响；AnnexinV-FITC/PI染色法流式细胞仪检测药物对K562细胞凋亡的影响；流式细胞仪检测药物对K562细胞的细胞周期的影响；RT-PCR检测各组K562细胞BCR-ABL融合基因表达水平的变化。统计学软件spss13.0分析结果。结

6、果：1AMN107和ATO对K562细胞增殖的影响同一时间、不同浓度AMN107作用于K562细胞，细胞生长抑制率随浓度的增加而逐渐升高，差异有统计学意义（P＜0.05）。同一浓度、不同时间点AMN107作用于K562细胞，细胞生长抑制率随时间的延长而逐渐增加，差异有统计学意义（P＜0.05）。同一时间、不同浓度ATO作用于K562细胞，细胞生长抑制率随浓度的增加而逐渐升高，差异有统计学意义（P＜0.05）。同一浓度、不同时间点ATO作用于K562细胞，细胞生长抑制率随时间的延长而逐渐增加，差异有统计学意义（P＜0.05）。同一浓度，不同时间点

7、的AMN107联合ATO作用于K562细胞，细胞生长抑制率随时间的延长而逐渐增加，较两药单独应用能更快达到1中文摘要IC50，差异有统计学意义（P＜0.05）。同一时间点，AMN107联合ATO较两药单独应用细胞生长抑制率更高，差异具有统计学意义（P＜0.05）。2AMN107和ATO对K562细胞凋亡的影响1umol/LATO作用于K562细胞48h后细胞凋亡率较对照组无明显差异（P＞0.05）。2.5umol/L和5umol/LATO作用于K562细胞48h后细胞凋亡率较对照组明显增加，差异有统计学意义（P＜0.05），且细胞凋亡率随浓度的

8、增加而增加。不同浓度AMN107作用于K562细胞，细胞凋亡率随浓度的增加而逐渐增加，差异有统计学意义（P＜0.05）。AMN107联合ATO组较两药