细胞膜的通透性实验报告山东大学

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1、山东大学实验报告2013年9月16日科目细胞生物学实验题目细胞膜的通透性细胞膜的通透性【实验目的】1.了解溶血现象及其发生机制。2.了解细胞膜的渗透性及各类物质进入细胞的速度。【实验原理】细胞膜是细胞与环境进行物质交换的选择通透性屏障，是一种半透膜，可选择性地控制物质进出细胞。将红细胞放在低渗溶液中，水分子大量渗透到细胞内，可使细胞胀破，血红蛋白释放到介质中，溶液由不透明的红细胞悬液变为红色透明的血红蛋白溶液，这种现象称为溶血。由于溶质渗透入细胞的速度不同，溶血时间也不同，因此，发生溶血现象所需的时间长短可作为测量物质进入红细胞

2、速度的一种指标。本实验选用红细胞作为细胞膜渗透性的实验材料，将其放入不同的介质溶液中，观察红细胞的变化。溶血（Hemolysis）红细胞破裂，血红蛋白逸出称红细胞溶解，简称溶血。可由多种理化因素和毒素引起。在体外，如低渗溶液、机械性强力振荡、突然低温冷冻（-20℃～—25℃）或突然化冻、过酸或过碱，以及酒精、乙醚、皂碱、胆碱盐等均可引起溶血。哺乳动物血浆的等渗溶液为0.9%NaCl溶液，红细胞在低于0.45%NaCl溶液中，因水渗入，红细胞膨胀而破裂，血红蛋白逸出。在体内，溶血可为溶血性细菌或某些蛇毒侵入、抗原-抗体反应（如输入

3、配血不合的血液）、各种机械性损伤、红细胞内在（膜、酶）缺陷、某些药物等引起。溶血性细菌，如某些溶血性链球菌和产气荚膜杆菌可导致败血症。疟原虫破坏红细胞和某些溶血性蛇毒含卵磷脂酶，使血浆或红细胞的卵磷脂转变为溶血卵磷脂，使红细胞膜分解。【实验用品】1.材料鸡血红细胞。2.试剂0.85%NaCl溶液、0.085%NaCl溶液、0.8mol/L甲醇溶液、0.8mol/L丙三醇溶液、6%葡萄糖溶液、2%TritonX-1003.器材试管、试管架、滴管、显微镜、离心机。【操作步骤】1.取鸡血6ml，加0.85%NaCl溶液4ml，在100

4、0r/min条件下离心5分钟；（RBC压积量不少于0.6mol）2.将上述离心后的红细胞按沉淀量配成50%浓度；（总体积应不少于1.2ml）3.每组取6支试管，分别加入如下溶液各3ml：（1）0.85%NaCl溶液（2）0.085%NaCl溶液（3）0.8mol/L（0.3mol/L等渗）甲醇溶液（4）0.8mol/L（0.3mol/L等渗）丙三醇溶液（5）6%（5%等渗）葡萄糖溶液（6）2%（1.5%等渗）TritonX-1004.向上述6支试管中分别加入50%红细胞悬液1滴，轻摇混匀，观察试管中是否有溶血现象发生（观察时间1

5、小时），记录溶血时间，并于显微镜下观察各溶液的细胞。【实验结果】第3页共3页细胞生物学实验报告·山东大学实验报告2013年9月16日科目细胞生物学实验题目细胞膜的通透性0.85%的氯化钠溶液0.085%的氯化钠溶液0.8mol/L甲醇溶液0.8mol/L丙三醇溶液6%葡萄糖溶液2%TritonX-100第3页共3页细胞生物学实验报告·山东大学实验报告2013年9月16日科目细胞生物学实验题目细胞膜的通透性六组实验最终对照图【注：右侧的试管为（1）】【实验结果】编号溶液类型是否溶血溶血所需要的时间结果分析10.85%氯化钠溶液不溶

6、血作比色用，颜色暗红，浑浊，不透明20.0085%氯化钠完全溶血5s溶液透明，颜色鲜红，由于浓度较大，细胞完全溶血30.8mol/L甲醇完全溶血34s前期细胞部分溶血，然后细胞完全溶血40.8mol/L丙三醇部分溶血28min浓度较小细胞部分溶血56%葡萄糖溶液部分溶血13min4s浓度较小细胞部分溶血66%TritonX-100完全溶血5min20s表面活性剂，结果不明显，溶液浑浊，但颜色鲜红【反思与总结】1、实验数据分析发现第四组丙三醇数据不符合常理，且在镜下很难找到细胞。因此，经组员讨论可能是时间过长导致没有细胞已完全溶血

7、。所以最后重新做了一次第四组的实验，发现在较短时间之内便能观察到溶血的细胞。2、由于细胞在等渗溶液中经过一段时间后也会发生溶血，因此本次的实验的时间为一小时，所以在1小时的时间内应该尽可能地充分利用时间，做好计时工作。3、实验中有几个实验组的反应较快，如果第一次做得不太成功，可以即刻翻工，注意时间。4、再将红细胞的沉淀物放入实验组的溶液中时，应该用弹指法将溶液弹均匀再开始观察。第3页共3页细胞生物学实验报告·