东方蜜蜂微孢子虫(I)

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1、万方数据11蜜蜂杂志(月刊)JOURNALOFBEE(Monthly)NO．72008Jul．东方蜜蜂微孢子虫黄文诚(中国农业科学院蜜蜂研究所，北京100081)蜜蜂孢子虫病通常是指西方蜜蜂被蜜蜂孢子虫(NosemaapisZander1909)寄生发生的一种慢性病，在北方由于越冬期间长病情较重。病情严重时，染病蜜蜂往往在冬末和早春在巢内和巢门前及其他地方下痢，使蜜蜂孢子虫孢子污染巢脾、蜂箱、蜜源及水源。一般在夏季受感染的蜜蜂数量下降，秋季以后又呈现上升趋势。感染的蜜蜂对花粉的消化、泌浆和饲喂幼虫能力

2、减弱，提早开始采集活动，寿命缩短，大多死于巢外。近年来发现东方蜜蜂也有孢子虫寄生，其孢子在形态、病理和遗传学上与蜜蜂孢子虫不同，而且已经从东方蜜蜂传染到西方蜜蜂，使欧洲许多国家西方蜜蜂的越冬死亡率大大提高，产蜜量严重下降，引起蜜蜂专家的关注。梁正之f’报道，1978年广东省从化县有个中蜂场在春季采荔枝蜜时被意蜂盗过，此后该县有几个中蜂场发生了严重的孢子虫病，成蜂大量死亡，蜂王停止产卵，共有十几群蜂死亡。从发病情况、病症和测定的孢子大小(4．8～8．9斗mx2．3～3．5¨m)来看，像是西方蜜蜂的蜜蜂微

3、孢子虫感染了中蜂。瑞典乌普萨拉的瑞典农业大学Dr．IngemarFries囝在1995年访问中国时，在东方蜜蜂(Ap／sceFo_舰a)(我们通常叫中华蜜蜂，简称中蜂)采集到了微孢子虫孢子，经过仔细研究，它们与寄生在西方蜜蜂的蜜蜂微孢子虫孢子在形态大小、极丝圈数以及16SSSUrRNA基因序列不同，定名为东方蜜蜂微孢子虫(NosemaceFo_I脚Frieseta1．1996；简称中蜂微孢子虫)。他们还在第34届国际养蜂大会报道了感染西方蜜蜂的蜜蜂微孢子虫可以感染东方蜜蜂。虽然巾蜂微孢子虫和蜜蜂微孢子

4、虫的孢子大小在光学显微镜下差别不明显，还是有少许差异。中蜂微孢子虫孢子比蜜蜂微孢子虫孢子稍微小一点，长度约短1¨m。来自中蜂的中蜂微孢子虫孢子长4．74-0．46“m，范围3．3～5．5斗m，n=25；宽度2．7±0．25pm，范围2．3～3．0“nl，n=25tZl。黄少康等【3l(2006)报道，来自意蜂的微孢子虫孢子大小为5．35±0．52×2．84±0．15恤m，来自中蜂的微孢子虫孢子大小为4．68-t-O．60×2．19±0．36斗m。检查孢子的超微结构，可看出中蜂微孢子虫孢子的极丝较短，有

5、20～23圈，蜜蜂微孢子虫孢子的极丝有26～32罔141。孢子虫的165SSUrRNA基因测序能明显区分这两种寄生虫。这两种孢子的另#1-的区别是在新感染的中肠内孢子的分布。在西方蜜蜂中肠上皮细胞中发现蜜蜂微孢子虫的成熟孢子时，在相邻的上皮细胞永远有它们的营养细胞(裂殖子)，或许是由于孢子的细胞内发芽，结果在上皮细胞之间横向传播(Fries1989)。然而，中蜂微孢子虫在中蜂体内感染时，在宿主细胞内也有发育成熟的孢子，感染好像是单独感染上皮细胞的孤岛。这种现象解释为缺乏横向传播，因为在感染中蜂孢子虫的

6、巾蜂上皮细胞内没发现排空的孢子12J。台湾黄伟峰等人四从患孢子虫病的西方蜜蜂采集的孢子，采用聚和酶链式反应(PCR)，对SSUrRNA测序，发现该片段与西方蜜蜂微孢子虫的基因序列相似度只有86％，而与中蜂微孢子虫的序列相似度为96％。因此，这种孢子虫并非是以往所鉴定的蜜蜂孢子虫，而是近似于中蜂孢子虫。爱尔兰皇后学院Dr．Paxton【6】报道，他在2005年春季与越南河内的蜜蜂研究和发展中心的Dr．DinhQuitTam会面时，了解到该中心的东方蜜蜂和西方蜜蜂都患有孢子虫病。以后经过分子遗传学检测，发

7、现他们的蜜蜂只受到了中蜂微孢子虫的感染。Dr．Higes领导的一组西班牙蜜蜂病理学家发现，在2005年中蜂微孢子虫已经在西班牙的西方蜜蜂中广泛传播，并指出这种寄生虫已经冲出亚秒H171。他们于2006年9月在布拉格召开的第2次欧洲蜜蜂会议上报告法国、德国和瑞士也有中蜂微孢子虫病。他们认为西班牙在2005—2006年冬季蜂群的严重损失(在一些地区蜂群损失率高达40％)与中蜂微孢子虫病有联系。以后他们从世界各地征集样本，通过检测表明，中蜂微孢子虫已在北美、南美、加勒比地区、欧洲和亚洲都有发现。Flottu

8、ml81报道，当年发表的一项研究，饲喂西方蜜蜂含有125000粒中蜂微孢子虫孢子的糖浆，感染率是100％。3日后不到5％的上皮细胞受到感染，第6天2／3的上皮细胞被寄生。饲喂不含孢子糖浆的对照组，只有1只蜜蜂在第6日死亡。在第6天66．7％的感染蜜蜂死亡，第7天94．1％，第8天全部死亡。这种病在上皮细胞间扩散极快，到第3天就产生了成熟孢子。另一研究表明，中蜂微孢子虫孢子在欧洲蜜蜂体内于2天内从30000粒增加到140000粒，再过2日增加到140000