樱桃S基因型及自交不亲和机制研究

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1、山东农业大学博士学位论文樱桃S基因型及自交（不）亲和机制研究姓名：陈晓流申请学位级别：博士专业：果树学指导教师：束怀瑞;陈学森2003.5.1关于学位论文原创性和使用授权的声明本人所呈交的学位论文，是在导师指导下，独立进行科学研究所取得的成果。对在论文研究期间给予指导、帮助和做出重要贡献的个人或集体，均在文中明确说明。本声明的法律责任由本人承担。本人完全了解山东农业大学有关保留和使用学位论文的规定，同意学校保留和按要求向国家有关部门或机构送交论文纸质本和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权山东农业大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可

2、以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。保密论文在解密后应遵守此规定。论文作者签名：蔼些导师签名钰日期：趁后z夕英文缩略表缩写英文名称中文名称LBMLV-RTbpBSAddH，ODEPCEBE．COliEDl’AlPTGMOPSNaoAcPCRRT-PCRSTESDSTtisX-galcDNASIGSISSISCCTABdNTPRAPDmRNARNAaseB．D．匍聚糖S．RNaselEFPICBBLuria-bertanimediumMoloneymurineleukemiavirusreversetranscritationasebasep

3、airBovineserumalbuminDistilledanddeionizedwaterdiethylpyrocarbonateethidiumbromideEscherichiacoilDisodiumethylendiaminetetr-acetate(EDl’ANa‘2H20isopropylthio·13·D-galactoside3-rN-morpholino)propanesulfonieSodiumacetatepolymerasechainreactionreversetranscriptionpolymerasechainreactio

4、nsodiumchloride，Tris．CI，EDTAsodiumdodecylsulfatetrishydryxymethylaminomethane5-Bromo-4--chloro·3·indolyl-13-D-galactosidecomplementaryDNASelf-incompatibilityGameto曲yticSISporophyticSISelf-compatibilityCetyltriethylammonniumBromideDeoxyribonucleosidetriphosphateRandomlyAmplifiedPolym

5、orphismDNAMessengerRNARibonucleaseRibonucleicacidCalloseSgene’SRNaseIsoelectricfocusinggelelectrophorestslsoelectricpointComassblueB．250LB培养基小鼠反转录病毒由来的逆转录酶碱基对牛血清蛋白重蒸水焦碳酸二乙酯溴化乙锭大肠杆菌二水乙二胺四乙酸二钠异丙基．13-D一硫代半乳糖苷3一(N．吗啉代)丙磺酸醋酸钠聚合酶链式反应反转录聚合酶链式反应STE缓冲液十二烷基硫酸钠三羟甲基氨基甲烷5-溴·4一氯-3·吲哚-B-D．半乳糖苷互补DN

6、A自交不亲和，配子体自交不亲和孢子体自交不亲和自交亲和十六烷基三乙基溴化铵脱氧核糖核苷三磷酸随机扩增多态性DNA信使RNA核糖核酸酶胼胝质s基因表达的核糖核酸酶等电聚焦凝胶电泳等电点考马斯亮蒋B．2sn山东农业大学博士学位论文摘要欧洲甜樱桃僻aviumL)．是重点发展的早熟果树，其自交不亲和性是影响生产的重要因素。现有主栽品种多数不知道S基因型。确定S基因型，对配置授粉树、选配杂交亲本、探讨自交不亲和的分子机制及选育自交亲和品种都非常重要：中国樱桃僻pseudocerasusL．)具有自交亲和、果实发育期短、部分类型树体矮化等特殊的重要资源性状，对培育自交亲和

7、、早熟、矮化的优良品种有重要价值。本研究主要利用s基因特异PCR、田间杂交座果率调查、花粉管生长观察和等电聚焦凝胶电泳等手段，克隆了甜樱桃品种的s基因，确定了山东省主栽品种的s基因型，探讨了甜樱桃自交不亲和及中国樱桃自交亲和的机制，建立了确定S基因型的技术体系，可直接用叶片DNA，根据s基因特异PCR片段大小来确定s基因型。压要结论如下：1．根据蔷薇科S基因核酸序列的高度保守区娩和RC4区的序列设计引物PruC2和PruC4R，对叶片基因组DNA做s基因特异PCR扩增，克隆测序各s基因的扩增片段并在genebank上搜索。结果证明，在电泳中显示的相同大小的PC

8、R片段，是同一种S基因。各S基因扩增片