鸡解偶联蛋白UCP基因与生长和体组成性状关系的遗传学研究

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1、东北农业大学博士学位论文鸡解偶联蛋白（UCP）基因与生长和体组成性状关系的遗传学研究姓名：赵建国申请学位级别：博士专业：动物遗传育种与繁殖指导教师：李辉2003.5.1鸡解偶联蛋白(UCP)基因与生长和体组成性状关系的遗传学研究摘要胖以及脂肪沉积机理的研究具有重要理论与现实意义；对于人类来讲，肥胖与相关并严重影响入们的身心和心理健赓；对于农业动物，肥胖刚导致饲料转化率的下降、肉品质的降低及可食部分的减少，另外对动物肥胖分子机制的研究可以为人类肥胖的研究提供有益的动物模型。UCP是分布于线粒体内膜的质子转运体，能够将氧化呼吸产生的

2、能量以热量的方式散发从而调控能量代谢，已有多个证据表明UCP基因部分解释了肥胖产生的原因W本研究利用PCR-SSCP、直接测序和PCR—RFLP的方法检测到UCP基因的多个SNPs／在中国地方鸡神、AA肉鸡和海兰蛋鸡串进行UCP基因SN"?s的群体遗传学分析；针对不同群体(中国农大F2资源家系和东北农大肉鸡高低脂双向选择品系)的特点建立合适的统计分析模型，进行UCP基因SNPs与生产性状的相关分析。利用RT-PCR和NorthernBlot的方法检测了UCP基因在鸡心脏、肝脏、脾脏、肺、肾脏、胃、小肠、脑、肌肉、脂肪lo种组织中

3、的表达情况。在AA肉鸡和海兰蛋鸡中分别进行肉鸡料和蛋鸡謇斗的饲养试验，于1日龄，2、4、6、8、10周取各组织样；随机取6只7周龄AA肉鸡分为两组，试验组注射腕岛素，对照组注射等剂量的生理盐水，连续注射4天后屠宰取样；以鸡GAPDH基因作为内源对照，利用RT-PCR的方法测定了不同处理组骨骼肌串UCP基囡的mRNA表达水平；克睦铡庠了鸡UCP基匮构5令农含子序歹{3，并用UCP基因的cds区域、内含子2和内含子3序列构建了系统发生树。结果表明：(1)在UCP基因不同区域总共发现7个SNPs，分别是3'-UTR区域的c135IT、

4、G1412A、C1191T、Atl97C，内含子2区域的C1240A和C883AfAccessionNo．AF433170)：Exon2区域的T660C(AccessionNo．AF287144)。、(2)3’．UTR的四个突变位点在备品种中的群体遗传学分析结果表明．C135IT和G1412A突变产生的三种基因型的频率在北京油鸡与白耳鸡、石岐杂、蛋鸡问的差异极显著(P

5、{97c突变．除北京油鸡与AA肉鸡问，白耳鸡和蛋鸡间外，在各品种间差异极显著(P<0．01)。肝重、肝脏重／屠体重最大，显著大于AA和BB基因型个体。BB基因型个体的肝率显著小于AA和AB基因型个体。在第五、第六世代中的肉鸡腹脂双向选择品系中A1197C突变产生的HH、HI、Il三种基因型间蕴脂重、腹脂率差异显著(P

6、P<0．01)．HH与HI基因型个体的6．t0周龄体重明显较大。第六世代中的肉鸡腹鼯双向选释品系中内含子2区域的C1240A产生的三种基因型个体间活重、屠体重、肝重、肌胃重差异显著(P

7、o．05)才(4)RT-PCR和Northern杂交的结果都表明，鸡的UCP基因只特异性在骨骼肌表达。7(5)基因发现趋势；对于肉鸡，与饲喂蛋鸡料相比，饲喂肉鸡料时UCP基因表达水平在各周龄均较高，而在蛋鸡中则观察不到这样的规律。同样饲喂肉鸡料的肉鸡和蛋鸡，6周龄以后，蛋鸡中的UCP(6)(7)克隆测序了鸡UCP基因的5个内含子，其长度分别为126，534，576，79，92bp鸡UCP基因至少包括6个外显子。以cds序列构建的基因进化树与物种进化树一致。关键词：鸡，解偶联蛋白基因，单核苷酸多态性，屠体性状，系统发生树组织表达n

8、鸡解偶联蛋白(UCP)基因与生长和体组成性状关系的遗传学研究Uncouplingproteinsarememberofthemitoehondrialmembranetransporterfamily,pm∞ntinthemitochondrialinnerme