氯化镧对原代大鼠星形胶质细胞毒性作用机制研究

《氯化镧对原代大鼠星形胶质细胞毒性作用机制研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、中国医科大学硕士学位论文氯化镧对原代大鼠星形胶质细胞毒性作用机制研究姓名：鲁帅申请学位级别：硕士专业：卫生毒理学指导教师：蔡原20090401实验分组将LaCl3用无血清的DMEM配制，使终浓度分别为0．25，0．5，1．0，2．0mmol／L，对照组使用无血清DMEM。研究方法l、大鼠星形胶质细胞的原代培养及其免疫细胞化学法鉴定2、MTT法测定氯化镧对星形胶质细胞增殖能力的影响3、荧光探针法测定氯化镧对细胞内【ca2+]i的影响4、流式细胞仪法测定氯化镧对线粒体膜电位的影响5、化学比色法测定氯化镧对线粒体

2、和胞浆中细胞色素C含量的影响6、流式细胞仪法测定氯化镧对细胞凋亡的影响7、流式细胞仪法测定氯化镧对细胞周期的影响8、倒置显微镜下观察星形胶质细胞形态学变化结果1、免疫细胞化学法鉴定星形胶质细胞结果GFAP免疫组化完全后，镜下可见绝大部分细胞胞浆被染成棕黄色，在倒置显微镜下每张玻片选择10个视野，计数阳性细胞所占比例，阳性率可达90％以上，因此可将此原代培养的细胞作为星形胶质细胞的模型。2、MTT法测定细胞增殖能力结果氯化镧对星形胶质细胞有一定的细胞毒性，随着染毒剂量的升高和染毒时间的延长，星形胶质细胞的存活

3、率逐渐降低，并表现出一定的剂量．效应关系(P<0．05)。3、细胞内[Ca2+】i的变化细胞外液无钙组星形胶质细胞内[Ca2+】i升高，并随着镧暴露浓度的增加，细胞内[Ca2+]i显著升高，与对照组比较有明显差异(P<0．05)；细胞外液含钙组星形胶2质细胞内[Ca2+】i亦升高，与对照组比较有明显差异(P

4、体和胞浆中细胞色素C含量变化镧暴露各组星形胶质细胞线粒体中细胞色素C含量降低，胞浆中细胞色素C含量升高，与对照组比较有明显差异(P

5、胞形态学改变对照组细胞呈多角形，胞体较大，生长密集；0．25mmol／L组和0．5mmol／L组细胞形状发生改变，胞体伸长，树突增粗，并可观察到少量脱壁细胞；1．0mmol／L组可观察到细胞数量明显减少，部分细胞出现皱缩变圆；2．0mmol／L组细胞脱壁现象严重，死亡细胞过多。结论1、氯化镧可是体外培养的星形胶质细胞存活率降低；细胞内游离钙离子浓度升高。2、氯化镧能够破坏线粒体功能，使星形胶质细胞线粒体膜电位(Win)下降；胞浆内Cytc含量升高，线粒体中Cytc含量降低。33、氯化镧可使体外培养的星形胶质

6、细胞凋亡率增加，细胞形态发生改变。关键词镧；星形胶质细胞；钙；线粒体；细胞色素C；凋亡4●英文论著摘要StudyonthetoxicmechanismofLanthanuminastrocytesPrefaceRareEarth(RE)iscomposedof17kindsofelements，includinglanthanumtoEuforthelightrareearthelements，whileGdtoLufortheheavyrareearthelements．RecentyearsRareEa

7、rthhasbeenwidelyusedinagriculture，animalhusbandry,industry,nationaldefenseandhigh—techindustries，aSwellasbiomedicalresearch，thescientificcommunitybytheGovernmentandthegeneralimportance．However，withawiderangeofrareearthdevelopmentanduse．willmakeitmoreandmor

8、eintotheenvironment，foodchainandthefoodchaintOhumanbeingsintheirdailyliveswhichinevitablycomeintocontactwith，orloworhighlevelsofrareearth．Therefore，rare—earthelements，aswellastheecologicalenvironmentforhumanh