黄芩素对MRSA抑菌活性及其机制的初步研究

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1、分类号：密级：学校代码：学号：遣掌研耗大学10165201011199硕士学位论文黄芩素对MRSA抑菌活性及其机制的初步研究作者姓名：学科、专业：研究方向：导师姓名：云宝仪微生物学微生物生化谢明杰教授2013年04月学位论文独创性声明本人承诺：所呈交的学位论文是本人在导师指导下所取得的研究成果。论文中除特别加以标注和致谢的地方外，不包含他人和其他机构已经撰写或发表过的研究成果，其他同志的研究成果对本人的启示和所提供的帮助，均已在论文中做了明确的声明并表示谢意。学位论文作者签名：学位论文版权的使用授权书本学位

2、论文作者完全了解辽宁师范大学有关保留、使用学位论文的规定，及学校有权保留并向国家有关部门或机构送交复印件或磁盘，允许论文被查阅和借阅。本文授权辽宁师范大学，可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库并进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文，并且本人电子文档的内容和纸质论文的内容相一致。保密的学位论文在解密后使用本授权书。学位论文作者签名：主!≥兰兰指导教师签名：签名日期：年月日辽宁师范大学硕士学位论文摘要黄芩素(bmcNein)作为黄芩中的一种黄酮类化合物，具有广泛的生物活性和药理

3、作用，如抗菌、抗癌、抗病毒、保肝、利尿、清除自由基等生物功能。目前关于黄芩素的抑菌活性报道较多，但关于黄芩素的抑菌机理尚不十分明确。本文以耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)为供试菌，通过研究黄芩素对MRSA的抑菌活性、细胞膜通透性、蛋白质含量、对DNA拓扑异构酶的影响、药物与DNA的结合方式以及其对限制性内切酶的影响等方面，来系统阐述黄芩素的抑菌活性和抑菌作用机制。结果如下：(1)本文通过牛津杯法和TTC染色法对黄芩素的抑菌活性进行研究，实验结果显示黄芩素对MRSA的抑菌活性较为显著，其最低抑菌浓度为0．

4、04m∥mL。(2)通过扫描电镜、检测细胞内电导率和大分子物质(DNA和RNA)等实验来测定细胞膜的渗透性，实验结果显示黄芩素只能微小改变细胞膜的渗透性，并未破坏细胞膜及细胞壁的完整性。(3)通过SDS．PAGE进行蛋白谱带分析，实验结果表明黄芩素对MRSA菌体蛋白质的合成有明显的抑制作用，在16h时加药组比对照组降低了44．62％。(4)通过琼脂糖凝胶电泳法来研究黄芩素对MRSA拓扑异构酶的活性影响。实验结果表明黄芩素能够抑制DNA拓扑异构酶的活性，当其浓度为0．05mNmL时能够抑制拓扑异构酶I和II的

5、活性，浓度为0．2mNmL时可完全抑制拓扑异构酶I和II的活性。(5)通过琼脂糖凝胶电泳法和紫外可见光光谱法测定了黄芩素与DNA的作用方式，结果出现减色效应和红移现象，实验说明黄芩素抑制拓扑异构酶的活性是通过与DNA结合导致的，并且发生的是嵌入结合作用。(6)通过限制性内切酶电泳图谱检测黄芩素与DNA的结合位点，结果显示黄芩素与DNA作用后，Taq酶的酶切图谱发生改变，说明黄芩素的结合位点可能是在DNA的T与CGA之间的碱基位置。关键词：黄芩素；耐甲氧西林金黄色葡萄球菌；抑菌活性；抑菌机制黄芩素对MRSA抑

6、菌活性及其机制的初步研究AntibacterialactivityandmechanismofbaicaleinonMRSAAbstractbaicaleinasanaturallyoccurringflavonoidcompoundsofScutellariabaicalensisGeorgi，ItiSwidelybiologicalactivitiesandpharmacologicalactionsbecauseofitsanti．bacterial，Anti．tumor，Anti．virus，pro

7、tectliverandotherwideavailabilitycharacters．Inrecentyears，therearemanystudieshaveinvestigatedtheeffectoftheantibacterialactivities，buttheantibacterialmechanismswerereportedless．Baicalein(BAI)iSaneffectivebactericide．Inthisstudy，theantibacterialactivityandm

8、echanismexperimentsofbaicaleinonMRSAwerecarriedoutbydeterminingconductivityandcontentofmacromoleculesofmembranepenetrability，proteinsynthesischangesandtheinhibitionofDNAtopoisomeraseactivitiesandmanneroftheef