珊瑚羟磷灰石牙根复合体的体外构建及体内再植的初步研究

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1、第一军医大学硕士学位论文珊瑚羟磷灰石-牙根复合体的体外构建及体内再植的初步研究姓名：涂小丽申请学位级别：硕士专业：牙周病学指导教师：刘宏伟20030501珊瑚羟磷灰石一牙根复合体的体外构建及体内再植的初步研究珊瑚羟磷灰石一牙根复合体的体外构建及体内再植的初步研究专业：牙周病学研究生：涂小丽导师：刘宏伟教授第一军医大学南方医院摘要目的：①体外分离培养狗的骨髓基质细胞(bonemal—rowstromalcells，BMSCs)，诱导其向成骨细胞分化，初步鉴定其成骨潜能和生物学特性。②探讨BMSCs及

2、与自体牙根复合生长的特性以及珊瑚羟磷灰石(CorallineHydroxyapatite，CHA)作为牙周组织工程学载体吸附BMSCs的可行性。③评价体外培养生长的BMSCs、CHA、牙根复合体原位植入后牙周组织再生的情况，为迸一步完善牙周组织工程研究提供理论依据和实验基础。方法t①抽取毕格(Scagle)犬髂骨骨髓体外分离培养获得骨髓基质细胞，DMEM、新生牛血清培养基进行原代培养，部分传代细胞以含101mol／L地塞米松、50ug／ml抗坏血酸和lOmol／L13—甘油磷酸钠的矿化培养液诱导其

3、向成骨细胞增殖分化，用倒置相差显微镜进行细胞形态学和细胞生长增殖观察。用YonKossa法染色检测体外矿化结节形成、细胞碱性磷酸酶(alkalinePhosphatase，ALP)染色检测BMSCs的成骨活性。②将未经矿化培养的骨髓基质细胞和诱导后的细胞分别接种于自体牙根和珊3鞴掰麓辩获释一擎掇蔑裔体静律辨梅建旋律内再植静初步掰f究鬻一羟瓣藏越交黎。瘸嬲鬻糨靛藏徽镰、糟擒电镳观察BHSC-牙撤芹珂B,穗SC-CHA复卺蝼嚣浆澎惑，势麓ALP絷惫蹬溱鞣辩s辩麟鹭

4、爵篷。蛰擦躲：皤养～髑簸的BMSC-

5、CHA牙缀嶷会体原健植入学撰窝。受验分蠛：实验爨{器麟sc+聪+雾糇；辩照嘏：e黻+矛嘏。⑥16阕箭处璐动物鞭柑，缝缀翡垮焱惩势掇整缀雾溪缀缎麓褥囊壤魏。翡巢；◇侮静分离壤葵瓣臀髓瀵液粼稳经袋件臻弊蘩诱释精装现国明强懿壤餐瀵槛，锩箨妒纯《蚤撵>薅警茨YonKossa荣楚辩戆；蕊我靛蚤稳基旗绷腿碱性磷酸瓣染散阳性。@臀髓基麟缨腿分别与鬻根、e瞅鬟余嚣囊装囊好，著’霹怒臻溅鏊震虢势泌。骨谶蒸震缁黼与牙根、c}{A均衡建磐黪塞镌糖骞毪。④镄穗实验缝缀瓣尊霎g彀缍暴繁嚣：舞骢豢凝釜雾稽骨较对照缀更越成熟、

6、敞密t实验缀牙搬淡蘧形成丰富鳃类磐嚣鹱缨爨瑟。燕疆熬琴稷鬻与琴攘曹乏麓较对照缀鹅疆形成了纤维组蛾腔隙(兴繁鬻袋缝绞绥耱)+、缝谂}固簿努癸鬻臻葬魏霄穰蔫震缩臆串禽霄骨源髓前体纲胞，传代缃隗冀眷羧爨懿凌霉港麓；◇露蕤夔鬟慧蕤毒雾禳窝爨赣羧耩获翳菱套臻游受蠛良好胎生物学特性，珊瑚羟磷毅石群撵舞牙鼹维织量程载然耪辫选簿麓—@黼鼯啜淡琴横渡合赫援入律内稀襻效谣避牙槽骨的弼熊并能黪簌黪壤缓缓整簸《类雾瓣骥爨窳续擒)。霪爨羧薹攘攀穷法囊避渗嚣爨织爵擞具育娜行矬。⑤学艇基鹱细臆鸯望戏必努霹糕缨鼹憋体多}慕漾。装

7、穗添黉靛菱蒺鳃蕤鬻嚣鬟蜒蘧壤聚麓获蕊雾鞭4珊瑚黻磷教石一辩檄复合体舸体外掏建及体内辩植的初步研究PreliminarystudyOUformationofCHA-FangcomplexinvitroandreimplantingMajor：PeriodontologyName：XiaoliTuSupervision：HongweiLiuDepartmentofstomotology,NanfangHospital,ThefirstmilitaryMedicalUniversity,Guangzho

8、u510282ABg融e零Objective：ThemainobjectiveofO'isstudywasasfollows：①TOinduceBone撵8瀚薛stromaJl翻l鞠醯糕惑≥isolatedfrom§ea臻姆differemiatedintoosteoblastsinvitroandidentifytheosteogenicpotentialandbioactivityofBMSCs．@TodiscussthephysicalcharactersofBMSCs’growthcomb

9、inedwithfangandCoratli嫩Hydmxyapati*e(CHA)，@TostudythepossibilityofCHAat峭棚bilI鐾BMSCsactingascarrierofperiodontalfissueeroneering．@Toevoluamthe搿龋掰揪tissue'sregemerationeffectsofimplantingBMSCs-fang-CRAinordertogivetheoreticalevkk徽eandbasicexperim