牛传染性鼻气管炎阻断ELISA抗体检测方法的建立与应用

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1、学校名称：华中农业大学分类号：学校代码：10504密级：华中农业大学硕士学位论文牛传染性鼻气管炎阻断ELISA抗体检测方法的建立与应用DevelopmentandApplicationofBlockingElisaforDetectionofAntibodiesAgainstInfectiousBovineRhinotracheitisVirus研究生：王单晶学号：2011302120028指导教师：刘正飞教授董晓辉学位类型：兽医硕士领域：华中农业大学动物科技学院动物医学院中国武汉CollegeofAnimalHusbandryCollegeofAnimalVeterinary

2、MedicineofHuazhongagriculturaluniversity，WuhanChina华中农业大学学位论文独创性声明及使用授权书学位论文是否保密否如需保密，解密时间年月日⋯独创性声明l炒燃燮矬料本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成；果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发{表或撰写过的研究成果，也不包含为获得华中农业大学或其他教育机构的学位或证书l而使用过的材料，指导教师对此进行了审定。与我一同Z-作的同志对本研究所做的任}何贡献均已在论文中做了明确的说明，并表示了谢意．研究生签名：王单晶时间：Ⅵ

3、l弓年占月f弓日学位论文使用授权书本人完全了解华中农业大学关于保存、使用学位论文的规定，即学生必须按照学校要求提交学位论文的印刷本和电子版本；学校有权保存提交论文的印刷版和电子版，并提供目录检索和阅览服务，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。本人同意华中农业大学可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容，为存在馆际合作关系的兄弟高校用户提供文献传递和交换服务，同时本人保留在其他媒体发表论文的权力。注；请将本表直接装订在学位论文的扉页和目录之间牛传染性鼻气管炎阻断ELISA抗体检测方法的建立与应用IIIIIIIII目录摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．iAbstract⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯iii缩略语表(Abbreviation)⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。V第一章前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯11．1牛传染性鼻气管炎的病原学⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯l1．2牛传染性鼻气管炎的流行病学⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯21．3牛传染性鼻气管炎的临床症状⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯21．4牛传染性鼻气管炎的诊断⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

5、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯31．5牛传染性鼻气管炎的防治⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯41．6研究目的及意义⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯4第二章材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯62．1实验材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯62．1．1毒株、细胞、抗体及试剂盒⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．62．1．2实验仪器及耗材⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．62．13主要的实验试剂及配制⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．72．1．4实验动物⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

6、⋯⋯⋯．92．2实验方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯92．2．1病毒粒子的灭活⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．92．2．2小鼠免疫⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．102．23免疫小鼠血清效价的测定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯lO2．2．4细胞融合⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯112．2．5阳性融合细胞的筛选、克隆及建株⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯122．2．6腹水的制备及纯化⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯132．2．7单克隆抗体生物学特性的鉴定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1

7、42．2．8辣根过氧化物酶标记单克隆抗体⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯172．2．9IDEXX传染性牛鼻气管炎病毒gE抗体检测试剂盒⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯l82．2．10IBR阻断ELISA抗体检测方法的建立⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．192．2．11IBR阻断ELISA抗体检测方法的临床应用⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．2l第三章结果与分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．223．1病毒粒子的灭活⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。223．2免疫小鼠血清效价的测定⋯⋯⋯⋯⋯