林蛙油对冷应激小鼠肾上腺超微结构的影响

《林蛙油对冷应激小鼠肾上腺超微结构的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、林蛙油对冷应激小鼠肾上腺超微结构的影响【摘要】目的观察林蛙油在冷应激下对小鼠肾上腺超微结构的影响。方法48只小鼠随机分为对照组、冷应激组、林蛙油组，连续灌胃14d。将冷应激组和林蛙油组各取12只小鼠进行耐寒实验；冷应激组和林蛙油组剩余小鼠每天灌胃30min后，置-10℃冰箱中30min，共14d，观察肾上腺超微结构。结果林蛙油组小鼠存活率高，与冷应激组差异显著（P＜0.05）。超微结构显示，冷应激组小鼠肾上腺超微结构出现损伤，而林蛙油组小鼠细胞结构变化不明显。结论林蛙油对肾上腺组织细胞结构具有保护作用，能增强小

2、鼠的耐寒能力。【关键词】林蛙油；冷应激；肾上腺；超微结构林蛙油含有多种营养成分和生理活性物质。传统中医证实其具有健脾胃、滋阴补肾、润肺生津之功效。对体虚气弱、气血亏损、精力耗损、记忆力不佳、神经性头痛、神经衰弱均有疗效。现代医学研究表明，林蛙油具有明显抗疲劳、抗衰老、抗氧化、调节血脂、调节人体内分泌等多种保健作用〔1～4〕，但尚未见林蛙油在冷应激情况下对机体保护作用的研究报道。本实验观察了林蛙油对冷应激情况下小鼠肾上腺超微结构和耐寒能力的影响。1材料与方法61.1样品来源林蛙油为吉林桦甸产市售，按成人日摄入量5

3、g/60kg体重的5倍设计。将林蛙油泡发12h后，蒸15min，用组织匀浆机打成匀浆液。1.2实验动物昆明种成年雄性小鼠48只，4月龄体重28～30g，长春生物制品研究所动物室提供，适应1w，随机分为3组：对照组、冷应激组和林蛙油组，每组16只，自由摄食和水。1.3实验方法1.3.1耐寒实验对照组和冷应激组灌胃0.2ml生理盐水，林蛙油组灌林蛙油匀浆液0.2ml，连续14d，末次灌胃1h后，将冷应激组和林蛙油组各取12只小鼠放在-10℃冰柜中，每隔30min观察1次，小鼠总数中死亡一半为界，记录各组小鼠死亡数，

4、计算存活率。存活率＝每组小鼠存活数/每组实验小鼠数×100%。各组每天上午9点进行灌胃。1.3.2肾上腺超微结构观察剩余的小鼠继续灌胃，每天灌胃30min后，冷应激组和林蛙油组置-10℃冰箱中30min，共进行14d，于末次实验1h后,各组取小鼠3只，1%戊巴比妥钠水溶液腹腔注射麻醉，固定在解剖台上，开胸暴露心脏，左心室插管，固定，剪开右心耳，灌注37℃的生理盐水至肝脏流出液不见血色为止，再注入4℃62%多聚甲醛2.5%戊二醛固定液，先快后慢，灌注20ml左右。开腹取右侧肾上腺，去除周围的脂肪组织,1%锇酸后固

5、定，梯度丙酮脱水，Epon812包埋，LKM超薄切片机切片，透射电子显微镜JEM1200EX进行观察照相。1.4统计学方法用SPSS11.0统计软件进行统计分析。2结果2.1林蛙油对小鼠耐寒能力的影响冷应激组和林蛙油组小鼠存活数分别是3只和9只，存活率为25%和75%，二组比较差异显著(P＜0.05)。2.2林蛙油对冷应激小鼠肾上腺超微结构的影响对照组肾上腺皮质束状带和网状带细胞索粗，细胞间隙小；细胞体积较大，核呈圆形，核仁明显，核内常染色质多，胞质内可见较多线粒体、脂滴；血窦内皮细胞核较大，呈扁平形，窦腔窄

6、。肾上腺髓质细胞体积较大，核仁明显，核内常染色质多，胞质内有较多的线粒体和分泌颗粒。冷应激组肾上腺皮质束状带和网状带细胞索变细，细胞间隙增大；细胞体积小，细胞核小，呈固缩状，胞质致密，细胞器不易辨，线粒体少，嵴呈致密状。血窦内皮细胞体积小，内皮细胞核固缩，胞质致密，血窦腔较大；肾上6腺髓质细胞之间出现间隙，核膜不规整，局部胞质致密，胞质内细胞器少，分泌颗粒减少，出现一些小空泡。林蛙油组细胞结构变化不明显。见图1、图2。图1各组肾上腺皮质束状带细胞（×4000）图2各组肾上腺髓质嗜铬细胞（×4000）3讨论冷应激

7、常引起神经内分泌功能及免疫功能紊乱，同时冷应激可引起脂质过氧化增强，产生大量自由基。寒冷应激发生的机制几乎涉及到所有的器官和组织，其中主要以神经内分泌为主，通过交感肾上腺髓质系统、下丘脑垂体肾上腺皮质系统及下丘脑垂体甲状腺轴等实现，引起肾上腺糖皮质激素和盐皮质激素分泌增加〔5〕。肾上腺作为机体的重要内分泌腺，其所分泌的激素调节机体的生理活动。本研究结果显示，服用林蛙油后，肾上腺皮质束状带和网状带细胞索较冷应激组明显增粗，细胞较大，核内常染色质多，异染色质少，胞质内有丰富的线粒体、滑面内质网和脂滴。血

8、窦内皮细胞呈扁平形，窦腔较窄。肾上腺髓质细胞之间连接紧密，核仁明显，胞膜规整，胞质内有丰富的线粒体和分泌颗粒。提示在冷环境下林蛙油对肾上腺细胞具有保护作用。6随着年龄的增加，机体自身机能的减退，内环境稳定能力与应激能力下降。冷应激对机体是一种应激因素，并继发和加重多种疾病。寒冷可诱发脑卒中〔6〕，天气寒冷可增加50岁以上妇女因卒中或心脏病发作入院人数〔7〕。冷应激可使机体抗氧化功能发生