《科研仪器学》

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1、名解1、流式细胞术：利用流式细胞仪，对处于快速直线流动的单列细胞或生物颗粒进行逐个、多参数、快速的定性定量分析、分选的技术。2、生物芯片（DNA芯片或基因芯片）：DNA杂交探针技术与半导体工业技术相的结合。将大量探针分子固定于支持物上后与带荧光标记的DNA样品分子进行杂交，通过检测每个探针分子的杂交信号强度进而获取样品分子的数量和序列信息。3、RCF（相对离心力）：在离心场中，作用于颗粒的离心力相当于地球重力的倍数，单位是“g”。4、冷冻干燥冷冻干燥（以下简称冻干）就是将含水物质，先冻结成固态，而后使其中的水分从固态升华成气态

2、，以除去水分而保存物质的方法。5、冻干曲线将搁板温度与制品温度随时间的变化记录下来，即可得到冻干曲线。比较典型的冻干曲线系将搁板升温分为两个阶段，在大量升华时搁板温度保持较低，根据实际情况，一般可控制在-10℃至+10℃之间。第二阶段则根据制品性质将搁板温度适当调高，此法适用于其熔点较低的制品。6．PCR技术PCR技术又称为聚合酶链式反应，其基本原理是根据细胞分裂中DNA的半保留复制机理，体外合成目的DNA片段的方法。PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成。7．RT-PCRRT-PCR指逆转录PCR,是指从RNA或m

3、RNA直接扩增获得目的DNA片段的过程.8．荧光定量PCR通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针，对PCR产物进行标记跟踪，实时在线监控反应过程，结合相应的软件可以对结果进行分析，计算待测样品的初始模板量。9分子筛层析技术凝胶颗粒内部呈网孔状结构，分子质量大的蛋白质难以进入凝胶颗粒内部，主要从凝胶颗粒的间隙里通过，所受阻滞作用小，所以大分子蛋白质迁移速度快，先流出凝胶。分子质量小的蛋白质则容易进入凝胶颗粒内部，所受阻滞作用大，所以小分子蛋白质迁移速度慢，后流出凝胶，从而将分子质量大小不同的蛋白质分开。10．离子交换层析技术：蛋白

4、质是两性分子，在一定的pH条件下带有电荷，不同的蛋白质所带有电荷的种类和数量不同，因此它们与带电的凝胶颗粒间的电荷相互作用不同。这样，当蛋白质混合物流经带电凝胶时，电荷吸引作用小的蛋白质先流过，而电荷吸引作用大的蛋白质后流过凝胶，从而把不同的蛋白质分开。11．吸附层析技术由于不同的蛋白质所含有的氨基酸的种类和数目不同，分子表面的极性氨基酸和非极性氨基酸的数目、分布区域不同，因此它与分子比表面积大的吸附剂间的相互作用力大小不同。根据此原理对蛋白质进行分离纯化。12．蛋白质组学蛋白质组(proteome)是指基因组表达的全部蛋白质

5、及其存在方式。13双向电泳技术第一向:等电聚焦（IEF）：等电聚焦是利用蛋白质分子的等电点不同，在一个稳定的、连续的、线形pH梯度中进行蛋白质的分离和分析。第二向:SDS-PAGE电泳：SDS-PAGE电泳是根据SDS和还原试剂将蛋白质分子解聚后亚基的大小，在恒定的pH缓冲系统中的分离。经过双向电泳能将蛋白质在一个二维平面分开。14．生物质谱技术质谱技术是蛋白质组学研究中最为广泛使用的蛋白质鉴定技术。其基本原理是样品分子离子化后，根据不同离子间质荷比（M/Z）的差异来分离并确定分子质量。质谱技术能从复杂的样本中定性、定量分析蛋

6、白质，其灵敏度高，可达到fmol(10-15)乃至amol(10-18)，速度快，现已经成为蛋白质组研究中主要的蛋白质鉴定技术。15．肽质量指纹图谱MALDI-TOF-MS常用于蛋白质的肽质量指纹图谱(peptidemassfingerprinting，PMF)鉴定。PMF是指蛋白质被酶切位点专一的蛋白酶水解后得到的肽片段质量图谱。由于每种蛋白质的氨基酸序列不同，蛋白质被酶水解后，产生的肽片段序列也各不相同，其肽混合物质量数亦具特征性，所以称为指纹图谱(fingerprinting)。16．基质辅助离子化技术试样溶解或悬浮于基

7、质中，激光束辐射到基质和试样分子上。基质吸收激光束能量后汽化，部分试样分子伴随基质的汽化而解吸。基质吸收大部分激光能量，减少了试样分子被激光能量破坏及过度电离成碎片离子。17．核酸分子杂交把亲源关系较近的，不同生物个体来源的变性DNA或RNA单链，经退火处理形成DNA-DNA或DNA-RNA这一过程叫分子杂交。18．Southern印迹杂交原理　　基因组DNA经限制性内切酶消化后进行琼脂糖凝胶电泳，凝胶上DNA经变性后，转印至尼龙膜上，用带有标记（放射性，萤光）目的基因作探针与之杂交，经放射自显显，检测是否含有与探针互补的DN

8、A序列。19．Northern印迹杂交细胞或者组织的总RNA进行琼脂糖凝胶电泳，并将凝胶上RNA转印至尼龙膜上，用带有标记（放射性，萤光）目的基因或其互补RNA作探针与之杂交，经放射自显影，检测是否含有与探针互补的mRNA序列。所以与Southernblot，Northern