蓝刺头的组织培养和植株再生的研究

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1、摘要野生花卉蓝刺头(EchinopslatifoliusTausch．)具有较高的观赏及应用价值，具有很大的市场潜力，是一种亟待研究开发的新型花卉。本研究在引种驯化蓝刺头两年的基础上，对其群体进行优良单株的选择，并将选出的优良单株进行根段扦插繁殖。以根段扦插得到的不定芽、叶片为外植体，建立了蓝刺头的组培快繁和植株再生体系，并对其中的影响因素进行了研究；同时以根段为外植体对建立蓝刺头的再生体系进行了尝试。试验结果如下：l，用加权系数法对所选植株进行综合评分，晟终选出符合切花标准的四个类型的优良单抹L2、L8、L13、L24。2．建立了以不定芽为外植体的蓝刺头的组培快繁体系。最适的

2、芽增殖培养基为MS-k6-BA2．0mg·L-1+NAA0．2mg-L-‘，芽增殖系数达15．3，平均芽长为4．2cm；不添加任何植物生长调节物质的MS培养基是蓝刺头无菌苗最佳的壮苗培养基；无菌苗生根以大量元素减半的MS培养基附加0．5mg·L_1的NAA和l_0mg-L_1的IBA效果最好。组培苗的移栽基质可选择等比例混合的草炭与河沙。3．对以根段为外植体的蓝刺头的再生体系的研究。结果表明，蓝刺头的根内生菌多，且有共生菌存在，很难得到完全无菌的材料。多次试验发现，先用0．1％升汞处理15min，无菌水冲洗一次，然后用o．1％升汞浸泡15min，相比其它处理可以得到较好的效果。

3、另外，试验表明，2,4-D和KT组合虽然可以产生大量愈伤组织，但这些愈伤却没有芽点分化；根段在3．0mg·L_16-BA附加0．2或0．8mg-L-1的NAA组合中可以产生大量疏松的愈伤组织，再经过培养后产生绿色芽点，但是得到的不定芽玻璃化现象严重，可以在不添加植物生长调节物质的MS培养基中进行壮苗。4．以根插苗叶片为外植体建立了蓝刺头高效的植株再生体系。结果表明，基本培养基MS附加6-BA1．0mg．L-l及NAAO．1mg．L-1是蓝刺头叶片最适的分化培养基；在展适分化培养基中添加2．0rag．L．1的硝酸银可以缩短不定芽分化的时间，提高再生率和分化芽数；叶片暗培养15d后

4、转到光下，不定芽的再生率也有明显的提高。在不添加任何植物生长谓节物质的MS培养基中对再生的不定芽培养，壮苗，生根培养基I／2MS+NAA0．5mg·L-1+IBM．0mg·L-1IBA中生根，然后进行炼苗移栽。另试验中发现，在添加硝酸银的培养基中培养的蓝刺头叶片表面产生大量的不定芽，而且不定芽生长健壮；仅在叶片切口处有少量的愈伤产生，其上也有不定芽的发生；因此，在添加硝酸银后蓝刺头不定芽产生的途径发生了改变，变成以直接发生为主，愈伤组织途径为辅。关键词：蓝刺头；不定芽：叶片；组培快繁；再生体系IIAbstractBroadlenfGlobethistleisawildflowe

5、r,withhi．ghornamentalandapplyvalue．Onthefoundationoftwo-yeardomestication．excellentplantswereselectedoutandpropagatedincolonyofEchinopslatifoliusTansch．．TherapidpropagationandregenerationsystemwasestablishedfromleavesandadventifiousesofEchinopstaafot／usTausch．．alsosomeaffectionsintheexperime

6、ntⅥ，efcstudied．Wealsoresearched011regenerationsystenlfromrootings，andthepresentofadventitiouswasobservedOUhistologicalandmorphologicallevel．Results、Me∞asfollows：1．AccordingtointegrativegradeofEchinopslatlfoliusTausch．，WCselectedoutfourtypesofexcellentplants：L2、L8、L13、L24．2．RapidpropagationWa

7、sestablishedfromadventitiousesofEchinopslatifoliusTausch．．TheoptimummultiplicationmediumWasMS+6．BA2．0mg·L-1+NAA0．2mg·L-1．withproliferationquotiety15．3，meannumberofadventitious4．2．MSwithoutanyplantgrowthregulatorsWasthebestsubculturemedium．Microshoo