高分子微球检测新城疫病毒的研究

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1、高分子微球检测新城疫病毒的研究摘要鸡新城疫是一种能够侵害各种禽类的高度接触性、致死性传染病。新城疫病毒属副粘病毒属，并且被国际兽医局列为对动物危害最大的A类传染病j是世界各国检疫和防疫的重点对象之一。新城疫病毒可引起小鸡、孑L雀、野鸡、鹌鹑、鸽子强烈的临床症状。火鸡一般呈温和经过，鹦鹉和麻雀则差异较大。在敏感鸡群中，发病率和死亡率分别高达100％和90％。某些种类如雀、金丝雀则没有临床症状。高分子微球是一种性能良好的蛋白质载体，因可吸附抗体而特异性地检测相应抗原而常用于免疫分析中的诊断试剂或试剂盒组件。高分子

2、微球的独特性质包括大小、稳定性、粒度均一、具有可吸附能力、可负载有荧光物质等特点。在微球的众多种类中，由人工合成的粒子，表面修饰有醛基、羧基、巯基、羟基、酰胺基、琥珀酰亚胺基等基团。所有这些种类的微球可用作作联结蛋白质的载体，因此高分子微球广泛应用于计量、标准、生物化学、免疫医学、分析化学、化学工业、微电子领域，尤其是在生物医学领域中的免疫分析、细胞因子定量分析、蛋白磷酸化分析方面有很好的应用。本研究是在传统夹心ELIsA方法的基础上，将高分子微球作为载体，结合免疫荧光技术、流式细胞术等实验技术，建立的一种新

3、的血清学方法，并且将此方法与传统的夹心ELISA方法进行重复性、特异性、敏感性对比。本试验初步建立了高分子微球检测鸡新城疫病毒的方法。该方法的敏感性、特异性与传统的夹心ELIsA检测新城疫病毒相当。将己知阳性新城疫鸡胚尿囊液倍比稀释至l：1024，两种方法均可检出。与其它禽类病毒AIVH。亚型、AIV地亚型、传染性支气管炎病毒(IBV)、鸡病毒性关节炎(vAV)、传染性法氏囊(IBDV)、马立克氏病病毒(MDV)等均无交叉反应。该方法的重复性与稳定性优于夹心ELISA方法。本研究为高分子微球检测新城疫病毒的应

4、用、为高分子微球检测其它病原以及多重检测提供了基础和借鉴。关键词；新城疫，高分子微球，检测TheresearchondetectionofNewcastlediseasevimsusingpolymermicmsphereAbstractNewcastlediseaseisacontagiousandfataIvimldiseaSea腩ctingallspeciesofb打ds．TheNewcastledise舾eVirusesbelongt0thePa瑚1”oV砌aeVinls胁1ily，andNDreco

5、gnizedbyOIE嬲IistAinfection，whichareveryh姗血Ito柚imaIs，soitisoneofthemostimpOrtan“nspection柚dpreVentjonobjec招ofalltllecoun订iesa¨overtheworld．clinicalNDvismostsevereiIlcllickens，peafowI，pheas鲫t，quailandpigeons．TurkeysmaydeveIopamjlderfonnoftIledisease．sever．tyo

6、fdiseaseinpsittacineandpasserinebirdsisVariable．Insusceptiblechickens，themorbiditya11dmor￡aljtyratesc粕beashigll嬲100percemarId90percent，respe州vel弘Insomespeciessuchasfinches柚dca【laries，cIin{caIdiseaSemaynotbeobseⅣedP01yrnermjcrDspheresaremnc廿onaIprotejncarrie

7、rs．Duetotheyc锄absorban廿bodiesfor柚alyteco丌espOnding锄ngens，italwaysapplytoimmunoassayasdiagnosticagentoringrediemofdiagnostickns·TheurIiquepropertiesofpolymermicrosphefes，whichincIudetheirr跚geofsizes，stabili取unifo蛳hHandcapacitytoabsorband”tainfIuorescentdye．A

8、mongm锄ytypesofmicrospherestherewere暑ynthes泌dpaticles1Ivi伽aldehyde，carboxyl’sulmydryI，hydroxyl，amide，aIldsuccimide掣oups．A11t11esetypesofmicmspheres、vereusedassupporbforcovalentimmobilizadonofpmteins，sop