免疫亲和柱-高效液相色谱在白酒赭曲霉毒素A检测中的应用

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1、酿酒科技2009年第3期(总第177期)·LIQUOR—MAKINGSCIENCE＆TECHNOLOGY2009No．30"o1．177)免疫亲和柱一高效液相色谱在白酒赭曲霉毒素A检测中的应用孑】、林超(江苏食品职业技术学院，江苏淮安223003)摘要：将免疫亲和柱一高效液相色谱一荧光检测器相结合，测定白酒中赭曲霉毒素A的含量。建立了测定白酒中赭曲霉毒素A的方法。该方法用2％NaHCO，和15％NaCI的水溶液对白酒中赭曲霉毒素A进行提取，然后通过OchraTest免疫亲和柱净化，采用Agilent—C％柱(4．6mm

2、x300mid，5m)，流动相为乙腈一水一乙酸(体积比为50：49：1)，流速O．80mlJmin，激发波长335nnl，发射波长465nlTl，柱温30℃，进样量2OL。结果表明，赭曲霉毒素A在1．0xl0-9～10x10g／mE时，浓度与峰面积呈线性关系(．9981)，加标回收率为93_33％～97．40％，最低检出限为0．12x10-9g／mL，相对标准偏差分别为2．16％、3．13％和5．19％。关键词：检测方法；白酒；赭曲霉毒素A；免疫亲合柱；高效液相色谱中图分类号：TS262．3；TS261．7；0657．

3、72文献标识码：B文章编号：1001—9286(2009)03—0113—03ApplicationofImmunoafinityColumns-HPLCMethodintheDeterminationofOchratoxinAContentinLiquorlsUNLin．chao(JiangsuFoodScienceCollege，Huaian，Jiangsu223003，China)Abstract：ImmunoafinitycolumncombinedwithHPLCandfluorescencedetector

4、wasusedforthedeterminationofochratoxinA(OTA)con—tentinliquor．Itwasanewly-developeddeterminationmethod．Bythismethod,ochratoxinAinliquorWasextractedby2％NaHCO3and15％NaC1，thenpurifiedbyOchraTestimmunoafinitycolumn．ThechromatographicconditionsincludedAgilent-C~column

5、(4．6minx300mill，5m)andthemobilephaseconsistingofamixtureofacetonitrile，waterandaceticacidby50：49：1(v／v)．Theflowratewas0．80mL／min．Excitingwavelenghwasat335ILrnandemissionwavelenghwasat465nIn．Columntemperaturewasat30℃．ThesampledoseWas2OL．TheresultsshowedthatwhenOT

6、Acontentwasat1．0xl0egmLto10xl0g／mL．perfectlinearitybetweenconcentrationandpeakarearatioWasobtained(r=O．9981)，therecoveryratewas93．33％to97．40％，andthedetectionlimitWas0．12x10eCmL，therelativestandarddeviation(RSD)Was2．16％3．13％、5．19％respectivelyKeywords：determinatio

7、nmethods；liquor；ochratoxinA：immunoafinitycolumns；HPLC赭曲霉毒素A(OchratoxinA)简称OTA，是曲霉属和真菌毒素特异性抗体制成的一种净化柱，具有选择性高、青霉属的一些菌种的有毒代谢产物，属真菌毒素之一[1】。特异性强【9】、快速和准确的特性。样品提取液通过免疫亲赭曲霉毒素包含A、B、C等7种结构类似的化合物．其中和柱时，保证了真菌毒素与样品基质的有效分离，降低了以赭曲霉毒素A的毒性最大【2】。赭曲霉毒素能引起肾脏检测方法的检出限。缩短了检测时间，减少了溶剂用

8、量。的严重病变、肝脏的急性功能障碍[31、脂肪变性、透明变精确度高，回收率高。本文利用免疫亲和柱净化一高效液性及局部性坏死【4】，而且还有致畸性、致突变性、免疫抑相色谱一荧光检测器相结合检测白酒中赭曲霉毒素A，建制和致癌性嘲。赭曲霉毒素广泛的存在于谷类、大豆、绿立了一种简便、快速、灵敏、准确检测白酒中赭曲霉毒素豆、花生、香料、干果