《自身抗体网络版》PPT课件

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1、自身抗体谱 在风湿病中的意义安徽医科大学第一附属医院风湿免疫科徐建华概述自身抗体:指针对自身细胞内、细胞表面和细胞外抗原的免疫球蛋白,见于多种风湿性疾病,尤其在弥漫性结缔组织病中更为常见,对临床风湿病诊断意义重大。目前用于临床的常见自身抗体有抗核抗体谱、抗中性粒细胞胞浆抗体、抗磷脂抗体、类风湿因子、抗线粒体抗体等。1抗核抗体谱抗DNA抗体抗核糖体P抗体抗组蛋白抗体抗ENA抗体抗Sm抗体抗U1RNP抗体抗Ro/抗SSA抗体抗La/抗SSB抗体肌炎特异性抗体(MSA)抗合成酶抗体抗SRP抗体抗Mi2抗体与系统性硬化相关的抗

2、体抗拓扑异构酶1抗体抗着丝点抗体(动粒)抗核仁抗原的抗体抗中性粒细胞胞质抗体C-ANCAP-ANCA抗磷脂抗体狼疮抗凝物抗心磷脂抗体β2糖蛋白抗内皮细胞抗体类风湿关节炎相关抗体类风湿因子(RF)抗CCP抗体抗核周因子抗体自身免疫性肝病相关抗体SMA,LKM,SLA,AMA,Sp100,gp210等2自身抗体的临床意义自身抗体在CTD中有特殊意义疾病的筛选具有诊断意义的标记与病情及预后相关与某些临床表现相关与疾病的发病机制有关评估风湿性疾病重要的参数之一研究疾病的重要方向之一3自身抗体检测方法间接免疫荧光法(IF):不溶

3、性成分酶联免疫吸附法(ELISA);放射免疫法(RIA);对流免疫电泳法(CIE);免疫双扩散法(ID);免疫印迹法:针对可溶性成分(如ENA、DNA、凝血因子、补体)4抗核抗体(AntinuclearAntibody,ANA)传统定义:将针对细胞核内成分的抗体称为ANA。 现在对ANA靶抗原的理解已从细胞核扩大到整个细胞。 是指抗核酸(nucleicacid)和核蛋白(nucleoprotein) 抗体的总称。5ANA测定原理和方法:间接免疫荧光法(IIF):现多以Hep-2细胞(人喉癌上皮细胞)为底物(Ag),其以

4、核质丰富而极大地提高了ANA检测的阳性率和滴度。是系统性红斑狼疮(SLE)的标准筛选试验。我们实验室采用欧蒙荧光检测系统,将1:100作为血清起始稀释度,所以如果是低滴度的1:100阳性,只能视为一个临界可疑值,临床意义不大。ANA作为自身免疫性结缔组织病的筛选试验必须强调高滴度。6ANA的意义ANA(+)结果的出现率取决于以下因素:分析系统:由于不同厂家ANA检测系统的起始稀释度和稀释因子不同,因而不同厂家的ANA滴度结果不能直接进行比较。区分血清(+)与(-)的选定的滴度值,未加稀释的正常人血清可有1/3的呈阳性A

5、NA反应。是SLE独立的诊断条件之一。滴度本身与疾病的活动度并不相关,没有评价预后的意义。筛查风湿病,敏感性高。ANA(+)可出现在多种情况下,特异性差。7ANA(+)的原因风湿性疾病SLE多发性肌炎干燥综合征硬皮病血管炎RA正常的健康人女性>男性,出现率随年龄而增加风湿性疾病患者亲属?孕妇药物诱导慢性肝脏疾病慢性肺部疾病慢性感染血液系统异常恶性肿瘤8SLE患者使用IIF法测定ANA阴性的一些解释技术方面临床方面经皮质激素或免疫抑制剂治疗。终末期肾病。隐蔽ANA:与循环中免疫复合物结合,沉积于组织。由于大量蛋白尿而从肾

6、脏丢失。9ANA的荧光染色型别细胞核:核均质型(DNA、组蛋白和核小体等)核颗粒型(Sm、uRNP、SS-A、SS-B、Ku、I和Ⅱ型周期蛋白)核膜型(板层素、gp120等)核仁型(SCL-70、PM-SCL、RNA多聚酶、原纤维蛋白等)核浆点型(着丝点、核多点及核少点型)细胞浆:胞浆颗粒型(线粒体、Jo-1、核糖体等)胞浆纤维型:波形蛋白、原肌球蛋白和肌动蛋白等分裂期细胞阳性:纺垂体、中间体、中心体等根据产生的荧光模型、靶抗原的分布部位分类如下:10核颗粒型:核粗颗粒型11抗核抗体染色类型核仁型(nucleolar)

7、12均质性(homogeneous)13斑点型(speckled)14ANA的荧光类型ANA试验的结果中一般会报告其分型,这些分型可能与某一特定的抗原反应活性相关。分型相关疾病核仁型硬皮病着丝点型CREST综合征周边型SLE斑点型/弥散型混合性结缔组织病(MCTD)15ANAs的分类:抗DNA抗体抗组蛋白抗体抗非组蛋白抗体抗着丝点抗体:抗核小体抗体16抗DNA抗体已确认出两大类抗体特异性:天然的双链DNA(dsDNA):对诊断SLE特异性高变性的单链DNA(ssDNA)多数实验室采用以下方法进行测定:放射免疫分析法(R

8、IA,Farr分析法):定量酶联免疫吸附法(ELISA):定量间接免疫荧光法(IIF,短膜虫法):半定量抗体水平与疾病活动度相关,随着疾病活动的控制,抗dsDNA抗体滴度可以下降或消失。抗dsDNA抗体与SLE肾损伤有关:DNA形成免疫复合物在肾小球基底膜沉积,或抗dsDNA抗体直接作用于肾小球抗原。强烈提示其致病作用。17抗核糖

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