EGCG对高脂饮食诱导的肥胖HFA小鼠肠道菌群及脂质代谢的影响

EGCG对高脂饮食诱导的肥胖HFA小鼠肠道菌群及脂质代谢的影响

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时间:2019-05-15

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1、学校代码:10564学号:2015204702分类号:Q93密级:硕士学位论文EGCG对高脂饮食诱导的肥胖HFA小鼠肠道菌群及脂质代谢的影响胡凌指导教师:方祥教授学院名称:食品学院专业名称:微生物学答辩委员会主席:娄文勇教授中国·广州2018年6月华南农业大学学位论文原创性声明本人郑重声明:所呈交的学位论文是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。作者签名:日期:学位论

2、文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,即:研究生在校攻读学位期间论文工作的知识产权单位属华南农业大学。学校有权保存并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许学位论文被查阅或在校园网上发布并供校内师生和与学校有共享协议的单位浏览(除在保密期内的涉密论文外);学校可以公布学位论文的全部或部分内容,可以允许采用影印、缩印或其它复制手段保存、汇编学位论文。本人电子文档的内容和纸质论文的内容相一致。作者签名:日期:导师签名:日期:学位论文提交同意书本学位论文符合国家和华南农业大学关于研究生学位论文的相关规定,达到学位授予要求,同意提交。

3、导师签名:日期:学科带头人签名:日期:摘要肠道菌群被认为与多种疾病发生相关,因此如何调节肠道菌群成为目前研究的一大热点。研究发现影响肠道菌群构成和功能的因素有很多,如饮食、抗生素、宿主基因型、益生菌和疾病等,其中饮食对肠道菌群影响最大。本研究首先利用无菌昆明(KM)小鼠灌胃健康人粪便悬液构建人源菌群(Humanfloral-associated,HFA)小鼠模型,此模型可在一定程度上模拟人肠道菌群生态系统,同时也避免了直接利用人进行肠道菌群研究存在的伦理学限制等问题。在此基础上,一方面利用两种不同饮食干涉HFA小鼠,分别在第1、2、4周收取粪便进行16SrRNA测序,发

4、现不同饮食对HFA小鼠菌群定植的影响。另一方面研究茶多酚的主要功能物质EGCG对肥胖及对肠道菌群的调节作用,为研究茶功能提供理论基础。具体实验结果如下:首先给无菌小鼠灌胃健康人粪便,利用粗饲料和纯化饲料两种饲料干预HFA小鼠肠道菌群,定植4周后,根据16sRNA测序结果,PcoA、UDPMG聚类分析发现粗饲料与纯化饲料处理后肠道菌群发生明显改变,人粪便和粗饲料定植不同时期各组集中在上侧,纯化饲料定植不同时期各组集中在下侧,说明组间差异较大,说明可能饮食条件对肠道菌群结构有一定影响。同时,人粪便的离粗饲料组更近,说明可能粗饲料定植人肠道菌群与人粪便肠道菌群组成结构更为相似

5、。其次,将构建好的HFA模型随机分为两组:高脂组40只和普通组10只,分别喂食高脂饲料和普通饲料,8周后各处死10只,测定小鼠理化指标体重、肝重、附睾脂肪垫重量、血糖血脂含量以及肝脏和附睾脂肪垫苏木精-伊红(HE)染色,并对粪便细菌进行16SrRNA测序分析。将获得的肥胖小鼠随机分为三组,即对照组,0.2%EGCG低剂量组和0.8%EGCG高剂量组,喂食普通饲料,8周后全部处死,测定同上指标。结果表明高剂量组小鼠附睾脂肪垫重量、总胆固醇(Tch)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量均较对照组显著降低(p<0.05),同时脂肪细胞大小较对照组也显著减小(p<0.01),

6、除此之外EGCG干预组肝脏病变程度较对照组有明显好转,且呈剂量效应关系。由此证实,EGCG对肥胖HFA小鼠降脂及肝脏损伤修复有一定的作用。另外,对肠道菌群16sRNA测序,PcoA、UDPMG聚类分析发现高脂饮食改变了肠道菌群结构。从门水平分析,高脂组厚壁菌门占比为(82.1±3.137)%较普通组厚壁菌门(68.07±4.857)%提高了20.6%、拟杆菌门占比(10.14±2.294)%较普通组拟杆菌门的占比(23.18±4.479)%降低了60.9%。另外采用EGCG干预8周后,EGCGI也明显改变了肥胖小鼠的肠道菌群结构。与对照组比较,高剂量EGCG处理后,Pe

7、ptostreptococcaceae科细菌及Romboutsia属细菌较对照组显著增加,并且EGCG处理组厚壁菌门丰度较对照组降低,拟杆菌门丰度较对照组升高。关键词:EGCG;人源菌群小鼠;肠道菌群IIEffectofEGCGonGutMicrobiotaDiversityandFatDepositioninKMMiceHuLing(CollegeofFoodScience,SouthChinaAgricultureUniversity,Guangzhou510642,China)Abstract:Theintestinalflorai

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