远志皂苷元抗h/r诱导皮层神经元凋亡的机制初探

远志皂苷元抗h/r诱导皮层神经元凋亡的机制初探

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1、·l166·中国病理生理杂志ChineseJoumalofPat.hophysiolok,y2014,30(7):1166.1171[文章编号]1000-4718【2014)07-1166-06远志皂苷元抗H/R诱导皮层神经元凋亡的机制初探木赵严冬,刘潘虹,李学敏,鲁凡,王华东,一,陆大祥,戚仁斌(‘暨南大学医学院病理生理学系,国家中医药管理局病理生理实验室,暨南大学附属第一医院骨科,广东广州510632)[摘要]目的:初步探讨远志皂苷元(senegenin,Sen)对抗缺氧/复氧(hypoxiwereoxygenation,n/R)诱导大鼠原代皮层神经元凋

2、亡的作用及机制。方法:提取原代大脑皮层神经元,培养至第6d,进行相应的实验处理,分为正常对照组(control组)、模型组(H/R组)、Sen保护处理组(Sen+H/R组)和Sen处理组(Sen组)。流式细胞术检测各组凋亡率。采用Westernblotting检测JNK、P.JNK、c.Jun、p-c.Jun、Bc1-2和Bax的表达变化。结果:H/R组与control组比较,细胞凋亡率显著升高(P<0.05);而H/R+Sen组细胞凋亡率显著低于H/R组(P<0.05),提示Sen可对抗H/R诱导的皮层神经元凋亡,模型构建成功;Westernblottin

3、g结果显示Sen可显著增强H/R模型中JNK和c-Jun蛋白表达,抑制其磷酸化(P<0.05),上调Bcl-2蛋白表达并抑制Bax蛋白表达(P<0.05)。结论:Sen抗H/R诱导神经细胞凋亡,发挥保护作用的可能机制是通过上调JNK和c.Jun蛋白表达,并抑制其磷酸化,进而上调Bd-2表达并抑制Bax表达等来实现的。[关键词]远志皂苷元;神经元;缺氧/复氧;细胞凋亡[中图分类号]R363.2[文献标志码]Adoi:10.3969/j.issn.1000-4718.2014.07.003Preliminarymechanismofsenegeninagains

4、tH/R-inducedapoptosisofprimarycorticalneuronsZHAOYan.dong,UUPan.hong,LIXue—min,LUFan,WANGHua.dong,LUDa.xiang’.OIRen.bin’(DepartmentofPathophysiology,KeyLaboratoryofPathophysiology,StateAdministrationofTraditionalChineseMedi—cine,SchoolofMedicine,DepartmentofOrthopaedics,TheFirstAfi

5、liatedHospital,加nUnivemity,Guangzhou510632,China.E—mail:tqirb@jnu.edu.cD,)[ABSTRACT]AIM:Toexplorethepreliminarymechanismofsenegenin(Sen)oninhibitinghypoxia/reoxygenation(H/R)一inducedapoptosisofprimarycorticalneurons.METHODS:Theculturedcorticalneuronsworerandomlydividedin-tonormalgr

6、oup(controlgroup),modelgroup(H/Rgroup),Sen+t-I/RgroupandSengroup.FlowcytometrywasusedtoevaluatetheefectofSenonH/R—inducedcellapoptosis.TheproteinlevelsofJNK,p-JNK,c-Jun,p-c-Jun,Bc1-2andBaxwerea~sessedbyWesternblotting.RESULTS:TheapoptoticrateinH/Rgroupwasobviouslyhigherthanthatinco

7、ntrolgroup(P<0.05),whiletheapoptoticrateinSen+H/RgroupwasobviouslylowerthanthatinH/Rgroup(P<0.05),suggestingthatthemodelofapoptosiswasestablishedsuccessfully.TheresultsofWesternblottingshowedthatSenincreasedtheexpressionofJNKandc-Jun,inhibitedthephosphorylationofJNKandc-Jun(P<0.05)

8、,increasedtheproteinlevelo

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