水仙温度诱导脂质运载蛋白基因NtTIL的克隆与表达分析

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1、园艺学报，2016，43(1)：161–167.ActaHorticulturaeSinicadoi：10.16420/j.issn.0513-353x.2015-0505；http：//www.ahs.ac.cn161水仙温度诱导脂质运载蛋白基因NtTIL的克隆与表达分析1,*2,*1111,**丁安琪，冯莹，朱里莹，徐世荣，秦军，潘东明12（福建农林大学园艺产品贮运保鲜研究所，福州350002；泉州师范学院资源与环境科学学院，福建泉州362000）摘要：采用PCR法，从水仙（Narcissustazettavar.chinensis）鳞茎主芽中分离

2、克隆到1个温度诱导脂质运载蛋白基因NtTIL。该基因含有567bp开放阅读框，编码188个氨基酸。该基因属于lipocalin-2superfamily基因家族；推导的氨基酸序列含有SCR1、SCR2和SCR33个植物lipocalin的典型结构域，与小麦、拟南芥等植物的同源性大于75%；编码的蛋白为稳定酸性亲水蛋白，不含有信号肽，进行N末端朝外由外到内的跨膜运动。qRT-PCR结果分析表明，水仙生长发育过程中鳞茎膨大期NtTIL表达量较低；休眠期表达量先升高后降低。推测NtTIL对水仙鳞茎主芽休眠具有一定调控作用。关键词：水仙；温度诱导运载蛋白；克隆

3、；表达；夏休眠+中图分类号：S682.21文献标志码：A文章编号：0513-353X（2016）01-0161-07CloningandExpressionAnalysisofTemperature-inducedLipocalininNarcissustazettavar.chinensis1,*2,*1111,**DINGAn-qi，FENGYing，ZHULi-ying，XUShi-rong，QINJun，andPANDong-ming1（InstituteofPostharvestScienceandTechnologyofHorticultu

4、ralProducts，FujianAgricultureandForestryUniversity，2Fuzhou，350002，China；SchoolofResourceandEnvironmentalScience，QuanzhouNormalUniversity，Quanzhou，Fujian362000，China）Abstract：Anencodingtemperature-inducedlipocalin（TIL）geneNtTILwasseparatedandcloningbyPCRinNarcissustazettavar.chin

5、ensis.TheopenreadingframeofNtTILwas567bp，encodingaproteinof188aminoacids.BiologicalsoftwareforNtTILproteinanalysisshowedthat：Thegenebelongstolipocalin-2superfamilygenefamily；typicaldomainsdeducedfromaminoacidsequencecontainedSCR1，SCR2andSCR3threeofbotanicallipocalin.It’shomology

6、greaterthanwheat，Arabidopsisandotherplants75%.Sequenceanalysesrevealedthatthisproteinwasstableandhydrophilicwithoutsignalpeptides；transmembranemovementwasfromoutsidetoinsideintheoutwardN-terminus，thentransmembrane.Andtherelativeexpressionofthisgenewassurveyedbyreal-timequantitat

7、ivePCRduringdifferentgrowthstage.Theresultsshowedthatitsrelativeexpressionduringdifferentgrowthstagewasdifferent；theNtTILexpressionwaslowinbulbswellingstage，expressionincreasedandthenreducedindormancystage，andexpressionincreasedslightlyinflowerdifferentiationstage.Inconclusion，i

8、t收稿日期：2015–10–31；修回日期：2015–12–11基金项目：福建省高水平大学建设