胚胎干细胞生物学鉴定

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1、人胚胎生殖千细胞的生物学鉴定中文摘要目的：组织块培养法培养人胚胎生殖干细胞(EG细胞)，通过检测细胞所表达的阶段特异性胚胎抗原I和3(stage-Sl∞Cificembryonicantigen一1、3。SSEA-1、SSEA-3)，对未分化的人EG细胞进行特异性的生物学鉴定。方法：取5-一9周流产人胚胎的背侧肠系膜和生殖腺嵴，进行组织块体外培养，在培养液中不添加细胞因子，以同源胚胎的成纤维细胞作为饲养层细胞，利用免疫细胞化学的方法，对组织块培养的细胞表达的SSEA-1、SSEA．3进行检测；取5=9周人胚胎生殖腺嵴做石蜡切

2、片，采用免疫组织化学的方法，对生殖腺嵴中的原始生殖细胞(primordialgermcells，POCs)进行SSEA．1、SSEA．3的检测。结果：石蜡切片免疫组织化学方法显示，5-9人周胚胎生殖腺嵴中有大量成条索状排列、SSEA-1、SSEA．3呈阳性表达的PC挖s；体外培养过程中，在胚胎成纤维细胞上生长的单个EG样细胞及其集落，均表达SSEA．1、SSEA．3。结论：本实验组织块培养所获细胞来源于PGCs，为未分化的人EG细胞。关键词：阶段特异性胚胎抗原；胚胎生殖干细胞；原始生殖细胞研究生：李芳导师：陈永珍△坚堕皇堕王

3、塑望塑竺塑兰垄塞—————————I墨!：!堕Bio-assayofHumanEmbryonicGermCellsAbstract0bjective：IdentifythehumanembryonicgermcellsbyobservingtheexpressionofitsspecificsurfacemarkersSSEA-1、SSEA一3．Methods：Humanembryonicgenitalridges，dorsalmesenteries(5—9weekspost-fertilization)werecultur

4、edwithoutanyc”okiIles，whilethefibroblastsderivedfromtheisogenousembryoWereusedasthefeederlayer．WedetectedtheexpressionofSSEA一1、SSEA一3onthecultivatedcellswhichsimilartotheembryonicgermcells,throughimmunohistochemistry；Paraffinsectionswerepreparedfromtheembryonicgeni

5、talridgesof5-9weekspost-fertilizationtoshowthePGCs，byobservingtheexpressionofSSEA-1、SSEA-3onthePGCs，throughimmunocytochemistry．Results：AbundantPGCswithpositiveexpressionofSSEA一1andSSEA·3，arrangedinirregularcords，werefoundintheembryonicgenitalri姑eSof5-9weekspost-fer

6、tilization．Whileculturedinvitro，boththesinglecellandtheclusterofcellswhichgrewontheembryofibroblastsshowedthepositiveexpressionofSSEA-1、SSEA-3。Conclusion：CellsculturedinsuchacultivatesystemcamefromPGCs，anddefinitelywereundifferentiatedhumanembryonicgermcells．Keywor

7、ds：stage-specificembryonicantigen-1、3：embryonicgermcell；primordialgermcellsWrittenby：lifangSupervisedby：ChenYongzhenprofessorII苏州大学学位论文独创性声明及使用授权声明学位论文独创性声明本人郑重声明：所提交的学位论文是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，也不含为获得苏州大学或其它教育机构的学位证书而使用过的材

8、料。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人承担本声明的法律责任。研究生签名：垄蔓日期：型学位论文使用授权声明苏州大学、中国科学技术信息研究所、国家图书馆、清华大学论文合作部、中国社科院文献信息情报中心有权保留本人所送交学位论文的复印件和电子文档，可以采用影印、