杏鲍菇液体菌种培养条件的研究

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1、http://www.paper.edu.cn杏鲍菇液体菌种培养条件的研究11222马立芝袁建平马浩吴薇高振江1廊坊师范学院生物系河北廊坊065000；2中国农业大学北京100088zjgao@cau.edu.cn摘要:本文采用L9（34）正交试验设计，多指标综合平衡法,以菌球的干重、密度、直径为检验指标，研究了温度、装量、接种量、转速不同组合对杏鲍菇液体菌种各项指标的影响。经过试验分析，从中筛选出最适合杏鲍菇液体菌种生长的四因素最佳组合为温度30℃、装量100ml、接种量15%、转速210r/min。关键词:杏鲍菇液体菌种培养条件菌球[1]杏鲍菇，又名刺芹侧耳，伞菌目

2、侧耳科侧耳属。菌肉肥厚，质地脆嫩，有杏仁香味，[2][3]口感极佳，是味道很好的一种平菇，有“平菇王”之称。药用价值可提高免疫功能，具有抗癌、降血脂、润肠胃、美容的效果。其氨基酸、矿质元素、寡糖含量都相当高，具有很[4][6]高的营养价值。因此，受到国内外消费者的青睐，是很有推广价值的一种珍稀食用菌。本研究对液体菌种培养条件温度、转速、装量、接种量的不同组合进行研究，为杏鲍菇液体菌种的生产提供良好的科学依据。通过一系列试验及结果分析，找出适合杏鲍菇液体菌种生长的摇瓶培养条件，为实现杏鲍菇液体菌种固体栽培生产模式的推广应用作初步准备。1．材料与方法1.1实验材料1.1.1

3、菌种杏鲍菇母种由廊坊市绿丰食用菌公司提供。1.1.2仪器设备电热鼓风干燥箱（500×500×500），霉菌培养箱（MJ-160B型），立式电热压力蒸汽灭菌器（LDZX-40Ⅱ），双数显汽浴恒温振荡器（TH2-82A），80目筛网。1.1.3培养基及其制备○1斜面培养基（PDA培养基）马铃薯20%蔗糖2%琼脂2%马铃薯去皮，切成块煮沸30min，然后用二层纱布过滤，再加糖及琼脂，加热至琼脂溶化后补足水定容，然后115[11]℃湿热灭菌30min。○2一级摇瓶培养基葡萄糖3%蛋白胨0.2%KH2PO40.05%MgSO40.05%VB110mg/L酵母浸粉0.5%琼脂0.4

4、%将以上成分加热至琼脂溶化后定容。然后[11]121℃湿热灭菌30min。○3二级摇瓶培养基黄豆粉6%葡萄糖3%蛋白胨0.2%KH2PO40.05%MgSO40.05%VB110mg/LPH自然将称好的黄豆粉放入白瓷缸中加热并煮沸几分钟，然后加入MgSO4、KH2PO4、VB1等成分最后倒入1000ml量筒中定容。最后按试验要求（表2的9个处[11]理）分装到500ml锥形瓶中，然后121℃湿热灭菌30min。○4平板培养基成分及其制备同斜面培养基。1.2实验方法-1-http://www.paper.edu.cn1.2.1菌种制备○1一级菌种的制备母种经斜面活化之后，

5、在超净工作台无菌条件下，用接种铲取20.5cm左右的菌块接种于装有150ml一级培养基的500ml三角瓶中，每瓶3块，恒温25℃静置2天，然后移入THZ—82A恒温振荡器中培养，温度25℃、转速180r/min，振荡培养5天。○2二级菌种的制备在无菌条件下将一级菌种按表2的9个处理的不同接种量接种于装有不同装量的二级培养基的500ml三角瓶中，然后在THZ—82A恒温振荡器中按表2的9个处理不同的条件要求培养5天。1.2.2最佳培养条件试验按装量（A）、温度（B）、转速（C）、接种量（D）四因素三水平（详细设计见表1）4设计L9（3）正交试验，试验设9个处理，每个处理4

6、个重复（详见表2）。按不同处理中对培养条件的不同要求将9个处理放在恒温振荡器上振荡培养5天。然后测量菌球干重、菌球密度、菌球直径。1.2.3测定内容及方法[12]1.2.3.1菌球密度将培养好的摇瓶摇匀后，取1ml培养液于培养皿中，直观计数，取3次求平均值。[12]1.2.3.2菌球直径取1ml培养液倒入培养皿中，按1ml培养液含菌球大小的数量比，取15个菌球在培养皿中排成一列，测总长度，然后计算单个菌球直径，取3次求平均值。[13]1.2.3.3菌球干重将培养液用80目筛网过滤出菌球，清水洗涤数次，然后放入干燥箱105℃烘干2小时，冷却后称重，然后再放入干燥箱中105

7、℃烘干半小时再称重，直到两次称重的重量差不超过2mg即为恒重。2．结果与分析2.1不同处理对杏鲍菇液体菌种各项检验指标的影响及极差分析2.1.1不同处理对杏鲍菇液体菌种各项检验指标的试验结果不同处理对杏鲍菇液体菌种各项检验指标的试验结果见表2。2.1.2不同指标的优方案筛选2.1.2.1菌球干重的优方案各因素不同水平对菌球干重的影响见表3。由表3得知，A因素的第一水平干重量最大，B因素的第三水平干重量最大，C因素的第一水平干重量最大，D因素的第三水平干重量最大。因此，对于菌球干重来说A1B3C1D3是优方案。2.1.2.2菌球密度的优方案