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《大鼠胃平滑肌细胞收缩模型及其药物研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、hines。Pharmacolog:calBullezi、2003Jun;19(6):675一8675中国药理学通报C大鼠胃平滑肌细胞收缩模型及其药物研究郑礼崔艳英李宝刚王淑仙,(中国医药研究开发中心药理毒理研究室北京102206);一中国图书分类号R975R332利于排除整体组织的扩散屏障和组织间的异质性影A文10一一一,,文献标识码章编号011978(2003)06067504响尤其是神经系统的影响不仅可以对药物的作用摘要目的建立胃平滑肌收缩的实验模型并且对相应治,、机制进行深入的研究而且为筛选药物提供了经济。,疗药物的作用进行评价方法采用分离大
2、鼠胃底平滑肌简便而且快速的筛选方法。本试验建立胃平滑肌细,用胶原酶和胰蛋白酶进行消化培养得到离体平滑肌细胞悬,胞收缩的试验模型并观察部分神经介质及其拮抗。,液Trypanblue稀释法检查用通过带刻度显微镜观察和剂的影响。标测细胞的形态,和长度并观察在不同的时间范围内细胞形1态和长度的变化情况,计算细胞存活率和存活时间。于细材料:sar,。、it250一3009胞(ACh)5一5-动物舍W大鼠体重悬液加人各种神经介质乙酞胆碱经色胺(o·J一‘:eeSa、,Ip25(SigmHT组、)营养液的组分(mml)H织胺(Hi引起刺激反应同时加人其相应的拮抗剂
3、Z..、2、、,;a;;;(atropine(DoDiph)产品)NCI115KHPO21KCI58MgC1阿托品)多潘立酮mp)苯海拉明(时观..:。·‘察细胞形态,06;CaCI20259I一和长度的前后变化从而对模型和药物的作用进每次使用前临时加人.。,,行评价结果每IXIO6以上个细glueose26V/V)igma只大鼠胃底均能收获%(的氨基酸(S产品)调节,,.。.胞细胞存活率在95环以上细胞至少可存活2shACh。pH=74,,lxl。一8:.S·能引起胃平滑肌细胞的收缩具有明显的量效关系消化液的配制于营养液内加人15火IOU·.。oI
4、厂‘(350atropineml即可产生最大收缩反应%)对乙一‘Case,L的胶原酶(ollgena)而成同时加入胰蛋白酶。一酞胆碱的拮抗作用有明显的量效关系5HT对大鼠胃底。抑制因子(Soybentrypsininhibitor)平滑肌细胞具有明显的收缩作用,并有明显的量效关系。仪器:二氧化,;;碳培养箱德国产品恒温水浴Do一,mp能够拮抗5HT的细胞收缩作用并具有一定的量效u。yps。一,Oml倒置显微镜关系5HT的量效曲线比较平坦可能至少有2种受体参2与细胞,方法的收缩作用它们引起细胞收缩的最大效应分别为.:20.7%和10.5%。HIS引起的
5、平滑肌细胞收缩,在1火21胃平滑肌细胞的分离方法取材动物脱臼处,,,。·,一’3一一‘I一’1丫死迅速取出胃沿小弯剪开用临时配制的营养液101只1。mol内有明显的量效关系高于,,2。·,10一’oI一’Diml收缩作用明显减弱其收缩作用能被ph拮洗净放在含有培养液的蜡版上通以含有95%0,,抗。结论用分离大鼠胃底平滑肌然后用胶原酶和胰蛋白(含5%COZ)的气体除去浆膜和私膜然后将肌条,酶进行消化培养,得到离体平滑肌细胞悬液,细胞存活率在剪成约2mm火6mm的条状放人含有胶原酶的消,.,、一S95%2shACh5HTHI,。以上细胞至少可存活和对平滑
6、化液内整个操作过程15min内完成,、o肌细胞均有明显得收缩作用阿托品Dmp和Diph对它们组织的消化:利用胶原酶和胰蛋白酶对组织进。分别具有抑制作用,,行消化从而可以得到游离的细胞参考文献方3。法卜〕并加以改进肌条用15ml消化液消化45;;;;关键词大鼠胃平滑肌细胞收缩体外神经介质拮抗剂,,min然后用孔径为500拼m的尼龙网过滤转移到另外的15ml新鲜的消化液中进行第二次消化45,胃肠道疾病是一组多发的常见病约占世界正,-nlIn常人群的15%其中胃肠道运动功能障碍(gastro平:2,滑肌细胞的分离第次消化完成后尼龙网,intestinalm
7、otilitydisorder)的发病率最高占胃肠,,过滤用至少40ml不含胶原酶的营养液冲洗3次道疾病的70%以上。目前,对于胃肠道运动功能障,然n,后再转人不含胶原酶的营养液培养25一30mi碍的治疗药物的筛选模型一般都停留在整体或器,:Z分离过程中不断通人95%O十5%CO的气体,,官水平对于细胞水平还有待于建立和研究这样有,r·一’,31℃恒温轻轻摇晃10min之后尼龙网过,,2002一11一19,一01一04收稿2003修回滤收集滤液即可得到胃底平滑肌游离细胞悬液用:,,,。:。,作者简介郑礼男37岁副研究员研究方向胃肠道药理学TryPan
8、blue稀释法检查通过带刻度显微镜观察和:一,一:z.Tel01080714198Emailnipl@263
