耐苯并咪唑类杀菌剂木霉菌株的筛选及耐药机理研究

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1、山东农业大学硕士学位论文耐苯并咪唑类杀菌剂木霉菌株的筛选及耐药机理研究姓名：周红姿申请学位级别：硕士专业：植物病理学指导教师：刘开启2003.6.1关于学位论文原创性和使用授权的声明本人所呈交的学位论文，是在导师指导下，独立进行科学研究所取得的成果。对在论文研究期间给予指导、帮助和做出重要贡献的个人或集体，均在文中明确说明。本声明的法律责任由本人承担。本人完全了解山东农业大学有关保留和使用学位论文的规定，同意学校保留和按要求向国家有关部门或机构送交论文纸质本和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权山东农业大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他

2、复制手段保存论文和汇编本学位论文。保密论文在解密后应遵守此规定。论文作者签名：世导师签名：之上曼雀日期：建竺i：』：山山东农业火学硕．仁学位论文摘要本文进行了生防木霉菌株的筛选以及生防效果的测定，通过在含多菌灵平板培养基、紫外线照射和亚硝基胍对菌株进行诱导，筛选耐苯并眯唑类杀菌剂的木霉菌株，并对木霉菌耐病相关蛋白进行了分离纯化及理化特性测定。自然界分离的木霉菌株，经离体筛选和温室活体筛选，共获得8株木霉生防菌株(Ty-10—2，LT-2，T1—1·2，Tj-5—4，Ty-11-1，Tj一1l-3，Ty-11-3，Ti．3．3)。这些菌株生长速度快、抑菌作用强，抑菌效果都在70％以上，活体

3、筛选的防效达50％以上，能有效防治黄瓜灰霉病，且效果稳定。，将获得的8株木霉菌在含药平板培养基中培养、紫外线照射和用亚硝基厩诱导。在含药平板培养基中培养筛选得到Ty．11-3，Ty_10一2，Tj一5．4和LT-24株耐多菌灵木霉菌。用紫外线和亚硝基胍诱导没有筛选出耐药性菌株。供试菌株在含药平板培养基上培养24h，耐药菌株分生孢子萌发，不耐药菌株的分生孢子不萌发，且耐药菌株的菌丝前端畸形，较正常菌丝细短，生长紧凑。可溶性蛋白和酯酶同工酶电泳分析表明，耐药菌株中可溶性蛋白种类及含量发生变化，细胞内可溶性蛋白总含量增加。究其原因可能诱导处理使原木霉菌株中一些基因发生突变，或者产生耐性基因，使

4、耐药相关蛋白产物增多，同时一些基因转录活性降低或者不转录，导致相关蛋白减少。酯酶同工酶的测定结果显示，耐药菌株条带减少或者减弱，可能经过含药培养基的诱导处理，编码酯酶同工酶的基因发生突变，同时也有一些基因的转录活性减弱甚至消失。丫

5、关键词：木霉菌；多菌灵；耐药性；可溶性蛋白；酯酶同工酶耐苯并眯唑粪黍藩翩木褥菌株的筛选及辩药机理姘究ABSTRACTThescreeningofbiologicalisolatesandtheassayofbioeontrolmechanismofTrichodermawerestudiedsystematicallyinlaboratorychamberan

6、dgreenhouseinvivo。AfterthetolerantrelatedproteinsinTfichodermastrainspurified，theirphysicalandchemicalcharactersweredetected．Eightbiocontrolisolateswerescreenedfromisolatesbycomparingtheirbiologicalactivitiesinvitroandvivoingreenhouse，includingTy-10·2，LT-2，Tl-l一2，蜀-5-4，强-11-1，Tj-11-3，黟ll·3，弼·3—3，

7、whichhadfastgrowthratesandhi}gherinhibitiontograymould(Bortrytiscinerea)，andhadstableinhibition．Thediseasecouldbecontrolledby70percentand50percentinvivo+Fourisolateswerescreenedfromisolatesbyinducedbythesubstratewithcarbendazim，测raysandnitrosoguanidine，including霹一5-4,萄·3-3，Ty一11·3，LT-2．Nonehadscr

8、eenedfromUVraysandnitrosoguanidine+Afterculturedfor24hours．conidiosporesoftolerantisolatesweregerminatedbuttheonesofsensitiveisolatesdidn’t．Comparedwiththesensitiveisolates，thehyphaefrontofthetolerantisolatesisthinnera