人教版教学课件基因工程的基本操作程序

《人教版教学课件基因工程的基本操作程序》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、一.2基因工程的基本操作程序DUCK179制作复习:基因工程的基本操作步骤提取目的基因，目的基因与运载体结合，将目的基因导入受体细胞，目的基因的表达和检测看课本P8的图DUCK179制作一、目的基因的获取1、目的基因：主要指的是编码蛋白质的结构基因，也可以是一些具有调控作用的因子2、获取方法：（1）、从基因文库中获取目的基因。（2）、人工合成例:利用PCR技术扩增目的基因DUCK179制作从基因文库中获取目的基因①、什么叫基因文库？将含有某种生物不同基因的许多DNA片断，导入到受体菌的群体中，各个受体菌分别含有这种生

2、物的不同基因，称为基因文库基因文库基因组文库部分基因文库（cDNA文库）DUCK179制作基因组文库与部分基因文库的关系DUCK179制作基因文库的构建模式图通过对受体菌的培养而储存基因DUCK179制作②如何从基因文库中得到所需要的基因？依据：目的基因的有关信息。如：根据基因的核苷酸序列基因的功能基因在染色体上的位置基因的转录产物mRNA基因翻译产物蛋白质等特性。DUCK179制作③利用PCR技术扩增目的基因PCR:聚合酶链式反应：是以DNA变性、复制的某些特性为原理设计的前提条件是必须对目的基因有一定的了解，需要

3、设计引物。DUCK179制作PCR技术原理及反应过程原理：DNA双链复制反应过程：1加热至90～95℃目的基因DNA解链2冷却至55～60℃，引物结合到互补DNA链3加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从从引物起始互补链的合成DUCK179制作DUCK179制作二、基因表达载体的构建1、基因表达载体的组成复制原点目的基因启动子终止子标记基因等思考：作为基因工程表达载体，只需含有目的基因就可以完成任务吗？为什么？DUCK179制作启动子：位于基因的首端的一段特殊的DNA片断，它是RNA聚合酶识别和结合的部位，有了它才

4、能驱动基因转录出mRNA，最终获得蛋白质调节基因操纵基因结构基因RNA聚合酶半乳糖苷酶酶酶RNA聚合酶启动子结构蛋白基因RNA聚合酶DUCK179制作终止子：位于基因的尾端的一段特殊的DNA片断，能终止mRNA的转录标记基因的作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将有目的基因的细胞筛选出来DUCK179制作总结：表达载体需由哪几部分组成复制原点启动子目的基因终止子标记基因它们的作用是？DUCK179制作三、目的基因导入受体细胞1、导入植物细胞常用的方法是什么？具体过程是怎样的？2、导入动物细胞常用的方法是什么

5、？基本操作程序是怎样的？3、导入大肠杆菌的方法是怎样的？钙离子有什么作用？哪些细胞可以作为目的基因的受体？DUCK179制作1、导入到植物细胞常用的方法有农杆菌感染法（双子叶植物和祼子植物）、基因枪法（单子叶植物）和花粉通道法2、导入到动物细胞常用的方法是显微注射法（先提纯目的基因，再体外注射入卵细胞或受精卵中，最后将含目的基因的受精卵移植到输卵管或子宫中发育成新个体。3、导入到大肠杆菌（原因？）时先用Ca2+处理成感受态后与溶有载体DNA的缓冲液混合,吸收DNA分子,完成转化DUCK179制作DUCK179制作四、

6、目的基因的检测与鉴定导入目的基因后需要检测哪些方面？各采取什么方法？什么是DNA分子探针？检测时的DNA探针通过什么原理来检测目的基因和相应的mRNA？利用抗体－抗原杂交检测的原理是什么？DUCK179制作四、目的基因的检测与鉴定1、分子水平的检测：分子杂交技术2、个体生物学水平的签定DUCK179制作