测定项目及方法

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1、实验测定项目及方法好果率:好果率(%)=(好果数/果子统计总数)×100%以未发生病害,冷害,机械性损伤和霉变的果实为好果,通过技术和数学的方法进行统计。果实硬度:应用果实硬度计(GY-1型果实硬度计)。果实硬度计设计原理果实硬度是指水果单位面积(S)承受测力弹簧的压力(N),它们的比值定义为果实硬度(P)。P=N/SP—被测水果硬度值105帕或(公斤每平方里米)N—测力弹簧压在果实面上的力N牛顿或(公斤)S—果实的受力面积平方米或(平方厘米)GY-1果实硬度计使用方法测量前:转动表盘,使驱动指针与表盘的第一条刻度线对齐(GY-1型的为刻度线2,G

2、Y-2和GY-3型的为刻度线0.5);将待测水果削去1平方厘米左右的皮。测量:用手握硬度计,使硬度计垂直于被测水果表面,压头均匀压入水果内,此时驱动指针开始驱动指示指针旋转,当压头压到刻度线(10毫米)处停止,指示指针指示的读数即为水果的硬度,取三次平均值。测量后:旋转回零旋钮,使指针复位到初始刻度线。电导率:电导率仪测定(DDS-12A型数字式电导率仪)使用方法:1.量程选择共5挡,分别是2μS/cm、20μS/cm、200μS/cm、2mS/cm、20mS/cm,档位数字为该挡的最大测量值,电导率仪超过此数字时不再显示数字,应该换档。使用高周时

3、需同时按下20mS/cm及200μS/cm档位。读数超过200μS/cm时用高周,超过2S/cm时用DjS-10型Pt黑电极。2.电容补偿用以抵消电极连接的电容器。在接有电导电极但电极未浸入溶液时,按下2μS/cm挡按钮,用电容补偿调节器调零。3.常数调节用调节器调节至与电容常数一致。4.温度补偿通常置于25℃。测定是将电极插入测定液,按下相应的档位即可读数。丙二醛含量:硫代巴比妥酸比色法公式:C(μmol/L)=6.45(A-A)-0.56A式中:A、A、A分别代表450nm、532nm和600nm波长下的吸光度值。用公式可直接求的植物样品提取液

4、中MDA的浓度,进一步算出其在植物组织中的含量。材料、仪器、试剂:材料:所选植物材料仪器:研钵、试管、可调加样器、恒温水浴锅、冷冻离心机、分光光度计。试剂;1.5%三氯乙酸(TCA)。2.0.67%(W/V)硫代巴比妥酸(TBA)用10%的TCA配制。步骤:1.取0.5g植物样品,加5%TCA5ml,研磨后所得匀浆在3000r/min下离心10min。2.取上清液2ml,加0.67%TBA2ml,混合后在100℃水浴上煮沸30min,冷却后再离心一次。3.分别测定上清液在450nm、532nm和600nm处的吸光度值。并按照公式算出MDA浓度。多酚

5、氧化酶活性:多酚氧化酶活性;儿茶酚比色法器材与试剂1、仪器:低温离心机、s22pc分光光度计2、试剂:儿茶酚、pH4.6磷酸缓冲液3、材料:所用实验材料实验步骤:1.称取实验材料0.5克,加入2.5mLpH7.2磷酸缓冲液,少许PVP,研磨匀浆,转移到离心管,再用2.5mLpH7.2磷酸缓冲液冲洗研钵,合并提取液。4℃5000rpm离心15分钟,上清液即为粗酶液。2.在试管中,加入2.5mLpH7.2磷酸缓冲液,1.5mL儿茶酚以及1mL粗酶液,空白调零以1mL磷酸缓冲液代替粗酶液。3.A值测定:加入粗酶液后迅速混匀,立刻于525nm下测定反应体系

6、的A值,每隔30秒记录一次,共记录5次。4.计算酶活力。按下式计算PPO活性=U/mingFWA值增加0.001定义为一个酶活力单位。计算所测材料的PPO活性。选择A值变化均匀的三组数值求平均值。过氧化物酶活性:愈创木酚比色法材料、仪器、试剂:材料:所用实验材料。仪器:可见光分光光度计;离心机;研钵;容量瓶;量筒;试管;吸管。试剂:0.05mol/LpH5.5磷酸缓冲液;0.05mol/L愈创木酚;2%HO;20%三氯乙酸。实验步骤:(一)酶液的制备取5.0g洗净去皮的实验材料,放入研钵中。加适量的磷酸缓冲液研磨成匀浆。将匀浆全部转移到离心管中,于

7、3000rmp离心10min,上清液转入25ml容量瓶中。沉淀用5ml磷酸缓冲液再提取2次,上清液并入容量瓶中,定容至刻度,低温下保存备用。(二)过氧化物酶活性测定酶活性测定的反应体系包:0.05mol/L磷酸缓冲液2.9ml,2%HO1.0ml,0.05mol/L愈创木酚1.0ml和1.0ml酶液。用加热煮沸5min的酶液为对照,反应体系加入酶液后,立即于37℃水浴中保温15min,然后迅速转入冰浴中,并加入20%三氯乙酸2.0ml终止反映,然后过滤(或5000r/min离心10min),适当稀释,470nm波长下测定吸光度。结果计算:以每分钟A

8、变化0.01为1个过氧化物酶活性单位(U)过氧化物酶活性【U/(g·min)】=(ΔA×V)/(W×V×0.01×t)式中

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