青天葵化学成分及其抗肿瘤作用的研究

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1、成都中医药大学博士学位论文青天葵化学成分及其抗肿瘤作用的研究姓名：袁叶飞申请学位级别：博士专业：中药化学指导教师：甄汉深20060401青天葵化学成分及其抗肿瘸作用的研究摘要瓣熬，黔癯严耄恁害蓑入类健康，麸天然植兹巾寻找安全、鸯散豹我黔瘩药物，在世界上已经成为抗肿瘤药物研究的一个重疆组成都分。鬻天葵来源予兰辩檀穆鬣蘑芋兰NerviliaeFordii(Hanee)Scb．1tr鹣建下块茎餐全肇。具有润肺止咳，清热解毒，散淤止痛等作用。主治肺痨咯m，肺热咳嗽，_豳腔炎，咽喉瓣痛，疮瘸肿毒，跌打损伤。在现代研究中，青必葵对治疗彝稍癌有一定盼

2、缓解作用。织青天葵化学成分及药璎研究来见报道，其抗瘸作用是否可靠尚器进一步验诞。化学成分预试验结果表明，青天葵主要含三萜、甾体、有机酸、氨基激、黄酮等成分。本课题酋次对青天葵进行醇提和部位分离，对熬石油醚提取物、乙酸乙醣提取物、正丁簿提取糁嚣擎酵提取懿袋震MTT法溺定了它销各塞对鑫盘瘸缍蕤株L1210彝P388D1、宫颈癌细胞株Hela、人胃瘸细胞株sGc7901、黑悦素瘤细胞株B16、神缀性肿瘸缁胞秣NGl08．1s、人翳癌继臆撩Hele7404豹艇长捧铡情况。结栗表鹾，青天葵石油醚提取物和乙酸忍酯提取物具肖一定的体外抗肿瘤作用。对体

3、外初步嫦选出的活性部能，进行了小鼠最大耐袋量(MTD)试验，用药前后，小鼠秃异常表现，小鼠对石浊醚提取物豹最大射受量为18。09／kg，对氛酸乙酝提取物豹最大澍受量为14。49／kg。对体外初步筛选出的活性部位，又利用s180和H22小鼠模型进行了体内抗肿瘤试验。体内试验结果表弱，磊油醚提取穆器磊羧乙醭提取豹黠小錾移擅蛙痰瘭s啪靼零聚嚣瘙H22均有明显的抑瘤螨性，并且对‰荷瘤小鼠可延长其生存期。能们也能改善小飙的免疫橇能。对体外体内筛选出的活性部位，采用桉色谱方法进一步进行系统的化学成分分离和纯纯，对纯净的纯台物利用熔点测定、uv、IR

4、、’H-NMR、掂C-NMR等方法进行结构鉴定。本课题首次从青天醛石油醚提取物葶丑乙酸乙酯提取物分离得到12个纯舍物，鉴定了其中11个化含物，它们分别为{Cyclohomonervilol(1)、二十八烷酸(Octacosanoicacid，II)、疆毯醇(Sfigmasterol，111)、Cyclohomonervilol—蹬)一p-hydroxycinnamate(iV)、24(R7n)-dihydrocycloeucalenol一(E)一P—hydroxycinnamate(V)、十六烷酸(Docosanoicacidt壤)、2

5、4(影§)-dihydrocycloeucalenol一《E)一p-hydroxycinnamate≤疆)、浚奈酸．7*甲醚(Kaempferol一7一mothylether，1X)、槲皮素一7，37一二甲醚(quercetin一7，3’，dimethylether，X)、15．胡萝卜苷(15．daucostcrol，XI)、正亮氨酸(Norleucine，Ⅻ)。本课题首次对分离出的山奈酚．7．甲醚和槲皮索．7，3’-二甲醚进行了体外抗肿瘤试验，采用MTT法测定了它们各自对白血病细胞株L1210和P388D1、宫颈癌细胞株Hela、人胃

6、癌细胞株SGC7901、黑色素瘤细胞株B16、神经性肿瘤细胞株N0108—15、人肝癌细胞株Hele7404的生长抑制情况。结果表明，山奈酚-7一甲醚具有一定的体外抗肿瘤作用，因而初步确定山奈酚．7．甲醚为青天葵抗肿瘤的活性成分之一。但槲皮素一7，3’-二甲醚基本无抗肿瘤作用。本课题首次采用HPLC方法测定了山奈酚．7．甲醚和槲皮素．7，37-二甲醚在青天葵药材中的含量。结果表明，山奈酚．7．甲醚在青天葵中的含量为0．0787％，槲皮素一7，3’．二甲醚在青天葵中的含量为1．1198％本课题首次确定了青天葵的石油醚提取物和乙酸乙酯提取物

7、具有抗肿瘤作用，并从中分离鉴定了11个化合物，同时初步揭示了山奈酚．7一甲醚为青天葵抗肿瘤的活性成分之一。本课题对有活性的山奈酚．7．甲醚及量比较大的槲皮素-7，3’·二甲醚进行了含量测定。本课题为最终揭示青天葵抗肿瘤作用及其物质基础，建立药材质量的科学评价方法，实现药材可持续开发利用及抗肿瘤中药新药开发提供了科学依据。关键词：青天葵化学成分抗肿瘤作用含量测定2Studiesonchemicalconstituentsandanti-tumoreffectofQingtiankuiAbstractForthemoment，canceri

8、sthreateningpeoples’healthmoreseriously，searchingforthesafeandeffectiveanti．tumorcomponentSfromnaturMme