残耳软骨细胞与脂肪干细胞共培养体内构建软骨的实验研究

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1、万方数据组织工程与重建外科杂志2011年4月第7卷第2期doi：10．3969，j．issn．1673—0364．20儿．02．004残耳软骨细胞与脂肪干细胞共培养体内构建软骨的实验研究张洁蒋海越何乐仁赵延勇杨庆华韩娟宋宇鹏·75··论著·【摘要l目的验证残耳软骨细胞与脂肪来源的间充质干细胞(AdiposederivedstemceIls，ADsCs)共培养，体内构建软骨的可行性。方法分离培养同一先天性小耳畸形患者来源的残耳细胞及脂肪干细胞。24只裸鼠随机分为4组：①实验组，接种残耳软骨细胞及脂肪干细胞，两种细胞以l：l比例混合，细胞浓度为5．0×10，cel

2、ls，mL；②对照组1，接种单纯残耳软骨细胞，细胞浓度为5．O×107cell“mL；③对照组2，接种单纯ADscs，细胞浓度为5．O×107ceus，mL；④对照组3，接种单纯残耳软骨细胞，细胞浓度为2．5×107cells，mL。每组接种6只裸鼠，每只接种0．2mL。体内培养10周后取材。通过对新生组织的大体观察、测量湿重、糖胺多糖含量测定、组织学及免疫组化染色等方法对各组新生软骨进行比较。结果实验组、对照组l与对照组3产生不同组织量的软骨样组织，对照组2形成纤维样组织；实验组平均湿重及糖胺多糖含量达到对照组l的88％以上，对照组3平均湿重低于对照组l的4

3、0％：HE染色示实验组、对照组1与对照组3的标本均有软骨陷窝形成．对照组2未见软骨陷窝形成：Ⅱ型胶原免疫组化染色示实验组、对照组l与对照组3均可见Ⅱ型胶原表达；对照组2未见Ⅱ型胶原表达。结论体内共培养条件下，残耳软骨微环境可有效促进脂肪干细胞向软骨方向分化，残耳软骨细胞与脂肪干细胞共培养体内构建软骨具备可行性。【关键词】共培养脂肪干细胞残耳软骨细胞体内【中图分类号】Q813．1+2【文献标识码】A【文章编号】1673—0364(2011)02一0075一05TheExpe—m明talstllmesoftheTis踟eEn西眦eringCa州lagebyCo—C

4、IIlt叫ilIgMicrotiaCh叫drocytes锄dAdipo∞砸豁ue—DeriVedStemCells伽ⅥvDz4ⅣG点e，Jz4ⅣGH咖蛾删￡ere马Z鼢0y删够¨ⅣGQi珧崛删Ⅳ胁n，SD，vGy印e略忍∞斑

5、su臀¨Ho叩it吐傩i鹏seAco如啊0，胁舭d＆妇nce，&可i昭J00J张吼打地corre印D蒯哺眦tb开肌^『G日叻伽俾一肿越艮Ji哪曲面∽暾o^醵co州．【Abst憎ct】objec廿veT0explorethefeasibilitvofthechondrogenesisbyco—cuhuringmicmtiachondrocy

6、tesandhumnadiposetissue—derivedstemcells汛锄o．Me恤0dshADSCsandmicrotiachondrocyteswereisolated流∞i抛．24nudemiceweremndomlydividedinto4groups：①Expgmup'injeetedwithmicmtiachondrocytesandhADSCsbyamixingratioofl：1andtheceUconcentI‘ationwas5．0×107cells，mL；②Ctrllgroup，injectedwithonlymicrotiac

7、hondmcytes锄dtheceUconcentrationwas5．o×107cells^llIJ；⑧Ctrl2group，injectedwitlIonlyhADSCsand山eceUconcemrationwas5．0×l护cell妇k④Ctrl3gmup，injectedwit}lonlymicmtiachondroc”esa11dtIlecellconcentrationw船2．5×107ceUs／mL．6nudemicewereinjectedeachgroupatadose0fo．2mLAnsampJeswerehanrested10weeks

8、aftercuJtu—ng抽鄯西o．Grossobser腿tio玎，averagewetweights，glycos锄inoglvc狮(GAG)qu蚰tification，histology蚰dimmunohistochemistywereusedtoevaluatethechondrogenesis0faUgmups．ResultsInExp，Ctrl1，andCtd3孕oup，allthespecimensfo册edhomogeneouscanilage—liketissuewi出typicalhistolo舀caJstlllctureatdif玷rent

9、extent．InCtll2gmup'