生物化学核酸的合成

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时间:2019-05-12

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1、核酸的生物合成第一节DNA的生物合成第二节RNA的生物合成第三节基因工程的简介DNA是生物遗传的主要物质基础,生物机体的遗传信息以密码的形式编码在DNA分子上,表现为特定的核苷酸排列顺序,并通过DNA的复制由亲代传递给子代。在后代的生长发育过程中,遗传信息自DNA转录给RNA,然后翻译成特异的蛋白质,以执行各种生命功能,使后代表现出与亲代相似的遗传性状。中心法则1964-1970劳氏肉瘤病毒的遗传方式致癌RNA病毒病毒(复制)复制转录DNARNA蛋白质翻译逆转录1958年,遗传信息的单向Reversetranscription中心法则中心法则总结了生物体内遗传信息的流动

2、规律,揭示遗传的分子基础,不仅使人们对细胞的生长、发育、遗传、变异等生命现象有了更深刻的认识,而且以这方面的理论和技术为基础发展了基因工程,给人类的生产和生活带来了深刻的革命。蛋白质翻译转录逆转录复制复制DNARNA中心法则的遗传流向有5条途径1、DNA→DNA:DNA复制(以DNA为模板合成DNA)2、RNA→RNA:RNA复制(以RNA为模板合成RNA)3、DNA→RNA:DNA转录(以DNA为模板合成RNA)4、RNA→DNA:反(逆)转录(以RNA为模板合成DNA)5、RNA→Protein:翻译复制:亲代DNA或RNA在一系列酶的作用下,生成与亲代相同的子代D

3、NA或RNA的过程。转录:以DNA为模板,按照碱基配对原则将其所含的遗传信息传给RNA,形成一条与DNA链互补的RNA的过程。翻译:亦叫转译,以mRNA为模板,将mRNA的密码解读成蛋白质的AA顺序的过程。逆转录:以RNA为模板,在逆转录酶的作用下,生成DNA的过程。第一节DNA的生物合成一、DNA的半保留复制二、与DNA复制有关的酶和蛋白质三、DNA的复制过程四、逆转录五、DNA的损伤修复DNA双链线状双链环状单链线状:动物病毒MVM单链环状:噬菌体φX174真核细胞染色体DNA噬菌体T2,T5,T7,λ,P22E-Coli染色体DNA线粒体DNA叶绿体DNA多瘤病毒

4、DNA,病毒SV40DNA噬菌体λ和φX174的复制型回顾DNA的结构特点:3‘5‘3‘5‘一、DNA的半保留复制定义:由亲代DNA生成子代DNA时,每个新形成的子代DNA中,一条链来自亲代DNA,而另一条链则是新合成的,这种复制方式叫半保留复制(semiconservativereplication)使E.coli在含有唯一氮源15N(15NH4Cl)的培养基中培养,使得细菌的亲代DNA中含有15N,具有较高的密度。  将生长在15NH4Cl培养基的E.coli转移到含有唯一氮源14N(14NH4Cl)培养基中培养。如果DNA是半保留复制,那么E.coli在含有14N

5、氮源介质中复制一轮后分离出的DNA分子应当是14N和15N各占50%的杂化分子(一条15N-DNA链和一条14N-DNA链),分子的密度处于14N和15N之间。进行半保留复制第二轮产生的DNA分子中,有一半不含有15N,表现出低密度;另一半是14N和15N各占50%的杂化DNA分子,表现出中等密度。通过平衡密度梯度离心,不同密度的DNA分子可以按照它们在铯盐中的浮力彼此分开,密度高的DNA分子出现在离心管的低部,密度最低的出现在离心管的上部,中等密度的位于中部。DNA的半保留复制实验依据1958年Meselson&stahl用同位素示踪标记加密度梯度离心技术实验,证明了

6、DNA是采取半保留的方式进行复制.[15N]DNA[14N-15N]DNA[14N]DNA[14N-15N]DNA半保留复制的实验证据:1958年Meselson和Stahl用同位素15N标记大肠杆菌DNA,首先证明了DNA的半保留复制。DNA的半保留复制的生物学意义:DNA的半保留复制表明DNA在代谢上的稳定性,保证亲代的遗传信息稳定地传递给后代。DNA这种复制的稳定性,依靠碱基互补配对和DNA聚合酶对碱基的正确选择和校对来实现。DNA复制方向在证明DNA的半保留复制方式后,人们又利用放射性同位素标记的胸腺嘧啶追踪E.coli细胞分裂时新合成的DNA,证实了复制是双向

7、进行的。   高倍电子显微镜照片显示DNA复制时,首先要形成一个“泡”,这个“泡”是DNA复制起点处的双链局部解旋。亲代DNA解旋,DNA新链合成的部位象一个“叉子”,又称为复制叉(replicationforks)。后来的遗传学和生物化学研究证明,复制开始于一个特殊的位置并且是大多是双向进行的,存在着两个复制叉,以同一速度移动直至汇合在终止部位。DNA复制可以朝一个方向(单向复制,unidirectional),也可以朝两个相反方向进行(双向复制,bidirectional,主要)。二、与DNA复制有关的酶和蛋白质原料:四种脱氧核苷三磷

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