小鼠 IL-17A Elisa试剂盒

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1、www.blkwsw.com小鼠IL-17A定量分析酶联免疫检测试剂盒本试剂盒仅供科研使用。用于体外定量检测小鼠血清、血浆或细胞培养上清液中的IL-17A浓度。使用前请仔细阅读说明书并检查试剂组分是否完整,如有疑问请与北京博凌科为生物科技有限公司联系，我们将提供力所能及的帮助。如您有其它需求，请登录北京博凌科为生物科技有限公司网站或致电本公司。IL-17A简介：白介17A，一类新的细胞因子家族，一般是由一个二硫键连接的同型二聚体。每个肽链含有155个氨基酸残基，分子量约为17.5kDa。白介17家族共有六个成员，其中具同型二聚体结构，分

2、子量约为32kDa的白介17A主要由活化的T记忆细胞产生，刺激机体的免疫。许多证据都表明IL-17A具有调控免疫反应的功能。IL-17A调控T细胞造血系统细胞间的通讯已被证明。T细胞产生的IL-17A通过NF-κB通路的作用，诱导成纤维细胞产生IL-6,IL-8,ICAM-1和G-CSF等细胞因子。IL-17A也可通过刺激T细胞来提高T细胞本身的扩增和提高在骨关节炎患者软骨中NO水平的增高。最近的研究表明，IL-17A家族的细胞因子在炎症性疾病、自身免疫病和肿瘤等发生中均有重要的作用。几种如气管炎、类风湿性关节炎、腹膜炎引起的粘连和脓肿

3、、肠炎、异体移植、牛皮癣、肿瘤和几种硬皮病等疾病中都检测出IL-17A表达水平的提高。IL-17A调节通路在关节软骨、骨、半月板、脑、造血组织、肾、肺、皮肤和肠中都起着重要的作用，表明IL-17在这类组织中不仅是免疫作用，而且在该类组织的正常和病态的平衡间扮演一个重要的作用。检测原理:本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法检测样本中小鼠IL-17A的浓度。小鼠IL-17A捕获抗体已预包被于酶标板上，当加入标本或参考品时，其中的小鼠IL-17A会与捕获抗体结合，其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。当加入生物素化的抗小鼠IL-17A抗体后，抗小

4、鼠IL-17A抗体与小鼠IL-17A接合，形成夹心的免疫复合物，其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。随后加入辣根过氧化物酶标记的亲合素。生物素与亲合素特异性结合，亲合素连接的酶就会与夹心的免疫复合物连接起来；其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。最后加入显色剂，若样本中存在IL-17A将会形成免疫复合物，辣根过氧化物酶会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质，在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测，读其450nm处的OD值，小鼠IL-17A浓度与OD450值之间呈正比，通过参考品绘制标准曲线，对照未知样本中OD值，即可算出标本中小鼠IL-17A浓度

5、。小鼠定量分析酶联免疫检测试剂盒组成:组分规格预包被板12条或6条样本分析缓冲液1瓶5ml/3ml标准品稀释液10ml/5ml标准品2/1支(冻干)生物素化抗体1瓶10ml/5mlHRP连接的酶结合物1瓶10ml/5ml浓缩洗涤液20×30ml/瓶TMB底物1瓶10ml/5ml终止液1瓶5ml/3ml封板胶纸3/2张说明书1份标本收集:1.标本的收集请按下列流程进行操作：BeijingBLKWBiotechnologyCo.,Ltd.Tel:010-57158602/52872342blkwbio@blkwbio.comwww.blkw

6、sw.comA.细胞上清标本离心去除悬浮物后即可；B.血清标本应是自然凝固后，取上清，避免在冰箱中凝固血液；C.血浆标本，推荐用EDTA的方法收集；D.若待测样本不能及时检测，标本收集后请分装，冻存于－20℃，避免反复冻融。2.血清标本不应添加任何防腐剂或抗凝剂；3.标本应清澈透明，检测前样本中如有悬浮物应通过离心去除；4.请勿使用溶血，高血脂或污染的标本检测，否则结果将不准确。注：正常小鼠血清或血浆样本请用标本缓冲液做倍比稀释后再检测。注意事项:1.试剂盒请保存在2～8℃。2.浓缩洗涤液因在低温下可能有结晶，请水浴加热使结晶完全溶解后

7、再配制工作液。3.若标准品复溶后，请在三天内用完。4.底物请勿接触氧化剂和金属。5.加样时，请及时更换枪头，避免交叉污染。6.严禁混用不同批号的试剂盒组份。7.充分混匀对保证反应结果的准性很重要，在加液后请轻轻叩击边缘以保证混匀。8.室温反应，请严格控制在25～28℃。9.洗涤过程是至关重要的，洗涤不充分会使精确度下降并导致结果误差较大。10.试验中标准品和样本检测时建议作双复孔。11.加样过程中避免气泡的产生。12.血清和血浆标本的检测时，检测抗体的孵育时间应适当延长。检测前准备工作:1.试剂盒自冰箱中取出后应置室温平衡20分钟；每次

8、检测后剩余试剂请及时于2～8℃保存。2.将浓缩洗涤液用双蒸水或去离子水稀释(1份加19份水)。3.标准品:加入标准品稀释液0.4ml至冻干标准品瓶中使IL-17A终浓度达到1000pg/ml，静置15分钟后