消毒效果监测

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1、一、医疗器械灭菌效果的检测：采样时间；在灭菌处理后，存放有效期内采样。（一）常规监测1、检测方法：缝合针、针头、手术刀片等件医疗器械各5件，分别投入5ml的无菌洗脱液中。注射器则取5副在5ml无菌肉汤中分别抽吸5次。手术钳、镊子等大的医疗器械取2件，用棉拭子反复涂擦采样，将棉拭子投入5ml无菌洗脱液中。振打80次,吸取1ml接种平皿做活菌计数，37℃培养48h，计算菌落数。2、结果判定：平板上无菌生长为灭菌合格。3、注意事项：若消毒因子为化学消毒剂时，采样液中应加入相应的中和剂。（二）无菌检验1、无菌检验前准备（1）洗脱液与培养基无菌检验：无菌试验前3天，于需-厌氧培养基

2、中各接种1ml洗脱液，分别至30~35℃与20~25℃培养72h，应无菌生长。（2）阳性对照管菌液制备：试验前一天取金黄色葡萄球菌（CMCC26003）新鲜培养物，接种1环至需-厌氧培养基内，在30~35℃培养16~18h，用0.9％无菌氯化钠溶液稀释10cfu/ml备用。取生孢梭菌（CMCC6494）的需氧菌、厌氧菌培养基新鲜培养物1环接种于相同培养基内，30~35℃培养16~18h，用0.9％无菌氯化钠溶液稀释10cfu/ml备用。取白色念珠菌（CMCC98001）真菌琼脂培养基斜面新鲜培养物1环，接种于相同培养基内，20~25℃培养24h，用0.9％无菌氯化钠溶液稀

3、释10cfu/ml~10cfu/ml备用。2、无菌操作：（1）取缝合针、针头、刀片等小件医疗器械5件直接侵入6管需--厌氧培养管（其中1管作阳性对照）与4管霉菌培养管。培养基用量为15ml/管。（2）取5副注射器，在5ml洗脱液中反复抽吸5次，接种需-厌氧培养管（6管，其中1管作阳性对照）与霉菌培养管（共4管）。接种量：1ml注射器为0.5ml，2ml注射器为1ml，5~10ml注射器为2ml，20~50ml注射器为5ml，培养基用量为2ml以下为15ml/管，接种量5ml为40ml/管。（3）手术钳、镊子等大件医疗器械取2件用棉拭子涂擦采样，投入5ml无菌洗脱液中，接种

4、于需-厌氧培养管（6管，其中1管作阳性对照）与霉菌培养管（共4管）。接种量为1ml/管，培养基用量为15ml/管。3、培养：将需-厌氧培养管以及阳性与阴性对照管均于30～35℃培养5天。霉菌培养管与阴性对照管于20～25℃培养7天。4、结果判定：阳性对照在24h内应有菌生长，阴性对照无菌生长，需-厌氧培养管及霉菌培养管无菌生长，可判为灭菌合格。★如需-厌氧培养管及霉菌培养管中任何1管显混浊并证明有菌生长，应重新取样，分别复测2次，如各管无菌生长仍可判为灭菌合格。5、注意事项：（1）在洁净度100级区域中进行，严格无菌操作。（2）采样后送检时间不得超过6h，样品保存于4℃，

5、则不超过24h。（3）如消毒因子为消毒剂，采样液中应加入中和剂。（4）采样面积，100cm2。（5）设好阳性、阴性对照。二、手和皮肤消毒效果检测：1、采样时间，在消毒后立即采样。2、采样方法（1）手，手曲面手指跟到手指端（一只手约30cm2），采样液10ml。（2）皮肤，5cm×5cm。采样液10ml。3、检验方法取1ml采样液做活菌计数，37℃培养48h。4、采样结果计算：平板上菌落数X稀释倍数细菌总数（cfu/cm2）=---------------------------------采样面积（cm2）5、结果判定：（1）I、II类区域工作人员，细菌总数≤5cfu/c

6、m2，并未检出致病菌为消毒合格。（2）III类区域工作人员，细菌总数≤10cfu/cm2，并未检出致病菌为消毒合格。（3）IV类区域工作人员，细菌总数≤15cfu/cm2，并未检出致病菌为消毒合格。●母婴同室、婴儿室、新生儿室及儿科病房的工作人员，不得检出沙门氏菌及其他致病菌。6、注意事项：（1）采样器材应无菌。（2）采样液中应含相应的中和剂。（3）阳性对照的设定问题。（4）消毒时间要求，外科手消毒3分钟、卫生手消毒1分钟，皮肤消毒5分钟。三、物体表面消毒效果监测1、采样时间：消毒处理后采样。2、采样方法用5cm×5cm灭菌规格板，采样面积≥100cm2。门把手等不规则表

7、面直接用棉拭子采样。3、采样液10ml（含中和剂）。4、检验方法：同上5、结果判定：（1）I、II类区域，细菌总数≤5cfu/cm2，并未检出致病菌为消毒合格。（2）III类区域，细菌总数≤10cfu/cm2，并未检出致病菌为消毒合格。（3）IV类区域，细菌总数≤15cfu/cm2，并未检出致病菌为消毒合格。母婴同室、婴儿室、新生儿室及儿科病房的物体表面，不得检出沙门氏菌。四、空气消毒效果监测1、采样时间：消毒后、操作前进行采样。2、采样方法：（1）布点：室内面积≤30m2，设内、中、外对角线3点，内外点距墙1m；室内面积>3