转PvP5CS1 基因拟南芥植株对干旱和盐胁迫的反应

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1、作物学报ACTAAGRONOMICASINICA2010,36(1):147−153http://www.chinacrops.org/zwxb/ISSN0496-3490;CODENTSHPA9E-mail:xbzw@chinajournal.net.cnDOI:10.3724/SP.J.1006.2010.00147转PvP5CS1基因拟南芥植株对干旱和盐胁迫的反应1,2211,*1,*陈吉宝赵丽英毛新国王述民景蕊莲1中国农业科学院作物科学研究所/农作物基因资源与基因改良国家重大科学工程/农业部作物种质资源与生物技术重点实验室,2北京100081;南阳师范学院生命科学与

2、技术学院,河南南阳473061摘要:为探索普通菜豆脯氨酸合成酶基因P5CS1在植物渗透胁迫中的作用,本研究应用农杆菌介导法,将PvP5CS1基因转入拟南芥,获得6株阳性转基因株系;通过检测转基因植株与野生型植株在干旱和盐胁迫下种子发芽率,幼苗脯氨酸含量、株系电导率、相对根长和成株死亡率,分析了PvP5CS1基因的表达对改善拟南芥抗渗透胁−1−1迫的效应。结果表明,在150mmolLNaCl和150mmolL甘露醇渗透胁迫下,转基因植株平均相对发芽率分别是−1−1野生型的1.60倍和1.62倍;150、250mmolL甘露醇和150mmolLNaCl处理下,转基因拟南芥植株平

3、均脯氨酸含量分别是野生型的2.68、1.30和1.30倍;平均相对电导率分别是野生型植株的85%、77%和85%;平均相对根长−1分别是野生型植株的1.2、1.3和1.2倍;300mmolLNaCl处理下,转基因植株的平均死亡率为42%,显著低于野生型(90%)(P<0.05);干旱胁迫下,转基因植株的平均死亡率为56%,显著低于野生型(70%)(P<0.05),说明PvP5CS1基因在拟南芥中的表达明显改善了转基因植株的抗旱性和耐盐性。关键词:PvP5CS1;脯氨酸;干旱胁迫;盐胁迫ResponseofPvP5CS1TransgenicArabidopsisPlantst

4、oDrought-andSalt-Stress1,2211,*1,*CHENJi-Bao,ZHAOLi-Ying,MAOXin-Guo,WANGShu-Min,andJINGRui-Lian1NationalKeyFacilityforCropGeneResourcesandGeneticImprovement/KeyLaboratoryofCropGermplasm&Biotechnology,Ministryof2Agriculture/InstituteofCropSciences,ChineseAcademyofAgriculturalSciences,Beijin

5、g100081,China;SchoolofLifeScienceandTechnology,NanyangNormalUniversity,Nanyang473061,ChinaAbstract:Underadverseenvironment,manyplantsincreasetheircellosmoticpotentialthroughaccumulationofintracellularorganicosmolytes-proline.Theprolineaccumulationinplantscannotonlyincreasecellosmoticpotent

6、ialbutalsostabilizepro-teins,membranes,andsubcellularstructuresaswellasprotectcellsagainstoxidativedamagebyreactiveoxygenspecies.Pyr-roline-5-carboxylatesynthetase(P5CS),arate-limitingenzymeinvolvedinthebiosynthesisofprolineinhigherplants,isencodedbyP5CSgene.ThefulllengthcDNAsequenceofPvP5

7、CS1genewassubclonedintopCHF3vectorandtransformedintowildArabidopsisviaAgrobacteriumtumefaciens.Atotalofsixpositivetransgenicplantswereobtained.TheresultofRT-PCRshowedthatthePvP5CS1genewasnormallyexpressedintransgenicplants.TheT4generationpurifiedlinesoftransge

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