细菌代谢产物的检测及鉴定

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1、细菌的分类及鉴定同济医院检验科细菌的生物化学试验原理：由于细菌各自的酶系统不同，新陈代谢的产物也有所不同，而这些产物又各具有不同的生物化学特性。为此，可利用生物化学的方法来鉴别细菌的类别，这种试验称为细菌的生化反应试验常用检查方法碳水化合物代谢试验氨基酸和蛋白质代谢试验碳源利用试验呼吸酶类试验抑菌试验碳水化合物代谢试验糖（醇、苷）类发酵试验原理由于细菌含有发酵不同糖类的酶，故分解糖的能力不同，终末产物亦不一致。应用鉴定细菌最主要的试验，特别对肠杆菌科细菌的鉴定尤为重要。氧化一发酵试验(O／F试验)原理氧化型：仅在有氧环境中分解葡萄糖发酵型：在有氧或无氧环

2、境中都能分解葡萄糖产碱型：在有氧或无氧环境中都不能分解葡萄糖结果：两支培养基均无变化为产碱型；两支培养基均产酸为发酵型；若不加石蜡的培养基产酸为氧化型。应用：肠杆菌科细菌（发酵型）非发酵菌（产碱型/氧化型）葡萄球菌（发酵型）微球菌（氧化型）β-半乳糖苷酶试验原理：有的细菌可产生β-半乳糖苷酶，能分解邻-硝基酚β-D-半乳糖苷(ONPG)，而生成黄色的邻-硝基酚，在很低浓度下也可检出。结果：菌悬液呈现黄色为阳性反应，一般在20～30min内显色。应用：迅速及迟缓分解乳糖的细菌ONPG试验为阳性，而不发酵乳糖的细菌为阴性。本试验主要用于迟缓发酵乳糖菌株的快速

3、鉴定。七叶苷水解试验原理：七叶苷七叶素黑色化合物培养基：七叶苷培养基、胆汁七叶苷培养基。细菌枸橼酸铁结果：培养基变为黑色为阳性，不变色者为阴性。应用：D群链球菌（+）其它链球菌（-）甲基红试验原理：葡萄糖丙酮酸混合酸（pH)醇酮醛（pH)红色反应（+）橘黄色（-）细菌甲基红试剂培养基：葡萄糖蛋白胨水培养基。应用：大肠埃希菌（+）产气肠杆菌（-）肠杆菌科中沙门菌属、志贺菌属、枸橼酸杆菌属、变形杆菌属等为阳性，而肠杆菌属则为阴性。V-P试验原理：葡萄糖丙酮酸乙酰甲基甲醇二乙酰红色化合物（+）培养基：葡萄糖蛋白胨水培养基细菌OH-O胍基结果：在数分钟内出现红色

4、为阳性；如无红色出现且于35℃4h后仍如故者即为阴性。应用：常与甲基红试验一起使用，因为前者阳性的细菌，后者通常为阴性。产气肠杆菌（+）大肠埃希菌（-）蛋白质和氨基酸代谢试验吲哚试验原理色氨酸吲哚玫瑰吲哚（红色）应用肠道杆菌的鉴定。大肠埃希菌（+）沙门菌属（-）对二甲基氨基苯甲醛硫化氢试验原理含硫氨基酸硫化氢硫化铅/硫化亚铁（黑色）应用肠杆菌科菌属间的鉴定。细菌醋酸铅/硫酸亚铁尿素（脲）酶试验原理：无色尿素氨红色应用：肠杆菌科中变形杆菌属的鉴定。细菌苯丙氨酸脱氨酶试验原理苯丙氨酸苯丙酮酸10%氯化铁绿色化合物应用：肠杆菌科的鉴定变形杆菌属、摩根菌属、普罗

5、威登斯菌属（+）氨基酸脱羧酶试验原理：氨基酸特异性脱羧酶胺＋CO2指示剂变色应用：肠杆菌科细菌的鉴定。如肺炎克雷伯菌赖氨酸为阳性，鸟氨酸为阴性。明胶液化试验原理：明胶明胶酶氨基酸失去凝固力应用：肠杆菌科细菌的鉴定。如沙雷菌、普通变形杆菌、阴沟肠杆菌等。碳源利用试验枸橼酸盐利用试验原理枸橼酸盐碳酸盐+氨（pH)溴麝香草酚蓝绿色深蓝色应用：肠杆菌科细菌的鉴定埃希菌属、志贺菌属、爱德华菌属（-）呼吸酶类试验细胞色素氧化酶试验原理盐酸二甲基对苯二铵醌类化合物（深紫色）应用奈瑟菌属、假单胞菌属（+）肠杆菌科（-）细菌Cyt氧化酶过氧化氢酶（触酶）试验原理某些细菌分

6、泌过氧化氢酶，使过氧化氢生成水和初生态氧，继而形成氧分子出现气泡。应用金黄色葡萄球菌、奈瑟菌属（+）链球菌属（-）（血浆）凝固酶试验原理金葡血浆凝固酶应用：致病性葡萄球菌的鉴定游离结合（凝聚因子）协同因子凝血酶纤原纤维蛋白胆汁溶菌试验原理胆盐、去氧胆酸钠和牛黄胆酸钠能选择性的溶解肺炎链球菌。应用肺炎链球菌（+）甲型链球菌（-）CAMP试验B族链球菌