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1、第51卷第4期武汉大学学报(理学版)Vol.51No.42005年8月J.WuhanUniv.(Nat.Sci.Ed.)Aug.2005,489~492文章编号:1671-8836(2005)04-0489-04壳聚糖抗庭院植物病原真菌的活性1,2212221覃彩芹,龙晶,李会荣,匡银近,徐东生,兰国胜,刘义(1.武汉大学化学与分子科学学院,湖北武汉430072;2.孝感学院化学系,湖北孝感432100)摘要:分别用过氧化氢和溶菌酶降解壳聚糖,制备得到了系列分子量(3.8105,7.81
2、04,4.8104,1.74310,2.310)的壳聚糖样品.采用平板法研究了壳聚糖系列样品对大叶黄杨炭疽病、沿阶草炭疽病、广玉兰炭疽病和对节白蜡腐烂病等庭院植物病原真菌的体外抗菌性能.结果表明:水不溶性壳聚糖酸溶液均表现出抑菌活性,且随着浓度的增大而抑菌活性增强;中等分子量(7.8104)壳聚糖比大分子量(3.8105)壳聚糖和低分子量(1.7104,2.3103)壳聚糖抗菌作用强.关键词:壳聚糖;分子量;庭院植物;植物病原真菌;抑菌活性中图分类号:O636.1文献标识码:A
3、大叶黄杨、广玉兰、沿阶草是常见的庭院绿化植进;土豆琼脂糖培养基(PDA):水1000mL、土豆物,对节白蜡不仅是好的盆景植物,还是国家二级珍200g、糖10g、琼脂20g,调节pH值为7.0;供试的稀濒危植物.大叶黄杨炭疽病、广玉兰炭疽病、沿阶大叶黄杨炭疽病、沿阶草炭疽病和广玉兰炭疽病的草炭疽病和对节白蜡腐烂病等植物病原真菌,对其病原菌种(Colletotrichumgloeosporioides),对节白各自的宿主均有严重的危害,直接影响庭院的观赏蜡腐烂病病原菌种(Valsasp.),是采用常规方法从和
4、绿化.对于这类植物病原真菌,目前一般采用化学患病的植株中分离获得.方法防治.然而在人类居住的地方,特别是室内植1.2过氧化氢降解法制备水不溶性壳聚糖样品[1]物,使用传统的化学农药和生物农药显然不合适.使用机械搅拌将壳聚糖原料分散到2%的醋酸甲壳素是自然界一种丰富的天然多糖,壳聚糖溶液中,壳聚糖用量约为5%(m/V),加入过氧化是其脱去乙酰基的产物,无毒无害,可生物降解.壳氢,控制温度70,在预定的时间内取出一定量的聚糖在pH<6.0的介质中C-2位的氨基形成阳离反应混合物,用NaOH溶液调节pH值至
5、9.0,加入[2]子,具有抑菌作用,可开发为一种新型的环保农适量Na2SO3溶液(至体系不能再使淀粉-KI试纸变[3~5]药.壳聚糖对真菌的抑制作用已有不少报道,但色为止).固体产物用去离子水洗涤,抽干,经50是对于分子量在其中的作用规律尚不清楚.真空干燥,得水不溶性产品.本文以系列分子量壳聚糖为材料,研究它们对1.3酶催化降解法制备水溶性壳聚糖样品上述4种庭院植物病原真菌的作用,并初步探讨了将壳聚糖原料20g溶解到500mL的2%的醋其作用机制,为研制新型庭院绿化植物病害抑制剂酸溶液中,加溶菌酶1g
6、,在47的水浴中搅拌12提供依据.3h,用截留分子量为3.010的超滤膜将反应液超滤得到清液.滤液减压浓缩至原体积1/5,调pH1实验部分9.0,加乙醇沉淀,抽干,沉淀用乙醇洗涤3次,抽干1.1主要材料后放在盛有P2O5的干燥器内真空干燥,得水溶性产脱乙酰度85.5%的壳聚糖原料(CS)由湖北裕品.峰生物工程有限公司提供;超滤仪和Omega超滤膜1.4壳聚糖分子量的测定(NMWLOSOO1C11型)从美国PallFiltron公司购分子量的测定以凝胶渗透色谱,TSKG-5000收稿日期:20
7、04-11-10基金项目:国家自然科学基金(20472066);湖北省科技攻关项目资助(2004AA101C59)作者简介:覃彩芹(1965-),男,博士,教授,现在孝感学院从事天然多糖化学生物学研究.E-mail:qincq@sohu.com490武汉大学学报(理学版)第51卷和TSKG-3000联柱,RI-101示差检测器,在TSP2.2壳聚糖溶液的抑菌作用P1000型高效液相色谱仪上测定.标准样品为已知广玉兰炭疽病、对节白蜡腐烂病、沿阶草炭疽病分子量的日本Tosoh葡聚糖标准品,流动相0
8、.2和大叶黄杨炭疽病等4种病原菌在PDA培养基中-1-1molLHAc/0.1molLNaAc缓冲液,流速为经过培养,当空白对照中病原菌已长满培养基时,含1.0mL/min,数据由JS-3050江申色谱工作站处有0.50%HAc+0.50%CS(水不溶性壳聚糖)的理.培养基中的病原菌却没有生长的迹象.这表明上述表1中列出了壳聚糖(CS0)和经H2O2降解所4种水不溶性壳聚糖CS0,CS1,CS2和CS3的酸溶得的水不溶性产
