常用培养基的配制

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1、常用培养基的配制(一)营养琼脂培养基【用途】供细菌总数测定、保存菌种、细菌纯化、一般细菌培养、血琼脂培养基基础之用。【成分】牛肉膏3gNaCl5g蛋白胨10g琼脂20g【pH值】7.2±0.2【制法】上述成分称取38g加蒸馏水1000ml,经121.3℃30min高压灭菌备用。(二)蛋白胨水培养基【用途】供细菌培养、吲哚试验之用。【成分】蛋白胨10g氯化钠5g【pH值】7.6【制法】将上述成分溶于1000ml蒸馏水中,过滤,分装于试管,每管2~3ml,经121.3℃20min高压灭菌备用。(三)半固体培养基【用途】供观察细菌动力、菌种保存、H

2、抗原位相变异试验等。【成分】蛋白胨10g氯化钠5g琼脂2.5~3g【pH值】7.6【制法】上述成分加入1000ml蒸馏水中,加热溶解,分装于试管,每管3~4ml,经121.3℃20min高压灭菌备用。(四)营养肉汤培养基【用途】供一般细菌培养、转种、复苏、增菌等,也可用于消毒效果的测定。【成分】蛋白胨10g氯化钠5g牛肉粉(牛肉浸汁)3g【pH值】7.2±0.2【制法】将上述成分溶于1000ml蒸馏水中,分装小试管,每管2~3ml,经121.3℃20min高压灭菌备用。(五)葡萄糖蛋白胨水培养基【用途】供甲基红试验及V-P试验之用。【成分】蛋

3、白胨5g葡萄糖5gK2HPO4(K2HPO4·3H2O)5g(0.65g)【pH值】7.0~7.2【制法】将上述成分溶于1000ml蒸馏水中,过滤,分装试管,每管2~3ml,经112.6℃20min高压灭菌备用。(六)伊红美蓝培养基(EMB培养基)【用途】弱选择性培养基,用于分离肠道致病菌,特别是大肠杆菌。【成分】蛋白胨10g乳糖10g伊红0.4g美兰0.065g琼脂14gK2HPO42g【pH值】7.2±0.4【制法】上述成分称取36g加蒸馏水1000ml摇匀,经121.3℃15min高压灭菌,待冷却至60℃左右倾注灭菌平皿备用。(七)S-

4、S琼脂培养基【用途】供沙门氏菌、志贺氏菌的选择性分离培养之用。【成分】蛋白胨5g乳糖10g牛肉粉5g三号胆盐3.5g琼脂17g柠檬酸钠8.5g柠檬酸铁1g硫代硫酸钠8.5g中性红0.025g煌绿0.00033g【pH值】7.0±0.1【制法】上述成分称取60g加蒸馏水1000ml,加热煮沸至完全溶解,待冷却至60℃左右倾注灭菌平皿备用。(八)中国蓝蔷薇酸琼脂培养基【用途】供肠道致病菌的分离鉴别之用。【成分】蛋白胨10g乳糖10g牛肉粉3g琼脂13g氯化钠5g中国蓝0.05g玫红酸0.1g【pH值】7.0±0.2【制法】称取本品40g加蒸馏水1

5、000ml,煮沸溶解后,112.6℃30min高压灭菌,待冷却至60℃左右时倾注灭菌平皿备用。(九)沙保弱氏琼脂培养基【用途】供真菌的分离培养,菌种保存之用。【成分】蛋白胨10g麦芽糖(葡萄糖)40g琼脂20g【pH值】5.5~6.0(一般不调节)【制法】上述成分加蒸馏水1000ml,煮沸溶解后,112.6℃15min灭菌,待冷至60℃左右时倾注灭菌平皿备用。(十)血琼脂培养基【用途】供观察某些细菌的溶血作用,分离培养营养要求较高的细菌之用。【成分】普通营养琼脂培养基100ml脱纤维羊血(或兔血)5~10ml【pH值】7.6【制法】将普通营养

6、琼脂培养基121.3℃20min高压灭菌,待冷却至50℃左右时,加入无菌脱纤维羊血(或兔血)轻轻摇匀,不要发生气泡,倾注灭菌平皿或制成斜面备用。(十一)0.1%石炭酸琼脂平板培养基【用途】供分离变形杆菌和被变形杆菌污染的其他细菌之用。【成分】普通营养琼脂培养基100ml石炭酸1g【pH值】7.6【制法】上述成分121.3℃15min高压灭菌,倾注灭菌平皿备用。(十二)液体硫乙酸盐培养基(FT)(需氧菌、厌氧菌培养基) 【用途】用于药品和生物制品的无菌检验,检测好氧菌、厌氧菌。【成分】胰酪胨15gL—胱氨酸0.5g葡萄糖5g酵母膏粉5g氯化钠2

7、.5g硫乙醇酸钠0.5g刃天青0.001g琼脂0.75g【pH值】7.1±0.2【制法】称取本品29.3g加入1000ml蒸馏水中,搅拌加热至完全溶解,分装于试管,121.3℃15min高压灭菌备用。(十三)庖肉培养基【用途】用于一般厌氧培养,肉毒梭菌及厌氧梭状芽孢杆菌的检验(GB标准)。【成分】牛肉渣、牛肉浸液。【pH值】7.4~7.6【制法】肉浸汤剩余的肉渣装入中试管内,约1~1.5cm高。加入肉汤培养基5ml,再加入1:3液体石蜡(或凡士林),高0.2~0.3cm。经112.6℃15min高压灭菌,保存于4℃冰箱备用。

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