基于分枝菌酸分析法鉴定分枝杆菌临床株

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1、．4o．中闺防瘩挛志2011年1月第33卷第1期Eg]陈献雄，杨倩婷，徐六妹，朱秀云，廖明风，陈心眷．采用于扰素释放反应试验和PPD皮试对深圳市高校学生结核分枝杆菌潜伏感染筛查的研究[J]．临床肺科杂志，2009，14(6)：737738．[10]HougardyJM，SchepersK，PlaceS，DrowartA，LechevinV，VerseheureV，DebrieAS，DohertyTM，VanVoorenjp，LochtC，MascartF．Heparin—bindinghemagglutinininducedIFN—gammareleaseasadiagnosti

2、ctoolforlatenttuberculosis[J]．PLoSOne，2007，3；2(1O)：e926．[11]LalvaniA，PathanAA，DurkanI{，WilkinsonKA，WhelanA，DeeksJJ，ReeceWH，LalifM，PasvolG，Hil1AV．En—hancedcontacttracingandspatialtrackingofMycobacterium￡-berculosisinfectionbyenumerationofantigen～specificTcellsEJ]．Lancet，2001，357(9273)：2017—202

3、1．(收稿日期：2010—09—30)[12]TanLH，Kamarulzaman．Preventingtuberculosisinhealthcare(本文编辑：范永德)·短篇论著·基于分枝菌酸分析法鉴定分枝杆菌临床株～计一一_星王巨～m存～lHw北一n～赵一m凤，～S仪一¨～一李一国利。王海英。景辉。王学谦白人骁陆芸赵文君(1．天津市天津医院天津300211；2．解放军总医院第二附属医院结核病研究所北京100091；3．山东省胸科医院汉光国际感染性疾病研究中心济南250013)非结核分枝杆菌(NTM)病具有与结核病临床院汉光国际感染性疾病研究中心提供；18株由北京表现相似的全

4、身中毒症状和局部损害，在无菌种鉴市结核病胸部肿瘤研究所提供；25株由解放军总医定的情况下，与结核病难以区别。NTM与TB对抗院第二附属医院分枝杆菌专业实验室提供；23株由结核药物的敏感性大不相同，不同的NTM对药物天津市疾病预防控制中心结核病控制中心提供。仪的敏感性也不相同，根据不同菌种化疗方案应有所器与试剂同文献心。不同[。因此，分枝杆菌菌种鉴定不仅在流行病学1．2实验方法，上，而～一且在～临床～一诊一断一和治一疗一上一均一有重要意义。本实1．2．1菌株的培养、分枝菌酸样品的制备和色谱条验室建立了具有自己技术特点的～分枝菌酸(Mycolic件同文献]。acids，MA)分析方法

5、]，构建了50种分枝杆菌标1．2．2鉴定步骤与依据第一步根据分离株谱峰准菌株的MA指纹谱库，特别是解决了文献未能的族数进行分类，确定单、双、三族峰型。第二步根区分的8种分枝杆菌的种问鉴定问题。用该方法鉴据分离株图谱的相对保留时间和相对峰高特征与相定分枝杆菌临床分离株国内尚未见报道，为此我们应的标准图谱比对，最相似的标准图谱所代表标准做了初步研究。菌株即为初步鉴定结果；第三步同时测定相应标准菌株样品，如二者图形基本一致，得最终鉴定结果。l材料和方法在所涉及的l9种分枝杆菌中，脓肿分枝杆菌指纹图1．1材料标准菌株：分枝杆菌标准株来源于谱在6～16min之间、偶然分枝杆菌指纹图谱在5～

6、ATCC且由中国药品生物制品检定所分枝杆菌专16min之间、耻垢分枝杆菌指纹图谱在4．5～业实验室提供。临床分离株：26株由山东省胸科医12min的图谱是稳定的，供比对用。基金项目：天津市应用基础研究计划面上项目(O7JCYBJCo87oo)通讯作者：王巨存E—mail：wanucun2o0O@yahoo．Corn．cn中l习防瘩枭恚2011年1月第33卷第1期·41·一●●●●●●=一=～牛分枝杆菌蟾蜍分枝杆菌jI戈登分枝杆菌堪萨斯分枝杆菌偶然分枝杆菌鸟分枝杆菌胞内分枝杆菌瘰疬分枝杆菌爱知分枝杆菌一不产色分枝杆菌耻垢分枝杆菌副偶然分枝杆菌海分枝杆菌金色分枝杆菌浅黄分枝杆菌新金色

7、分枝杆菌图1分枝杆菌分枝菌酸指纹图谱(a为标准株图谱b为临床分离株图谱Is为内标)中l习坊痔枭志2011年1月第33卷第1期指纹图谱是基本一致的，92个临床分离株都鉴定到2结果种，其中包括鸟和胞内分枝杆菌。Joseph等采用山东省胸科医院提供的临床分离株，经16SHPLC方法分析了3107个临床分离株，经与标准rRNA基因测序鉴定为胞内(16株)、脓肿(3株)、戈株图谱比对，99．5的临床分离株得到鉴定，但登(2株)、瘰疬(1株)、偶然(1株)、堪萨斯(1株)、土MAC不能区分。