纳米银对PCR 体系中DNA 合成的影响及其机理研究

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1、农业生物技术学报,2010年,第18卷,第5期,第876~881页JournalofAgriculturalBiotechnology,2010,Vol.18,No.5,876~881研究报告ALetter纳米银对PCR体系中DNA合成的影响及其机理研究*刘鹏鹏关荣发刘明启黄光荣戴贤君中国计量学院,杭州310018*通讯作者,rfguan@163.com摘要为研究纳米银对PCR体系中DNA合成的影响及其作用的分子机制,把不同粒径(38、61、83 和130 nm)、不同浓度(5、10、25、50、100 和250滋g/mL)的纳米银加入PCR体系中,观察纳米银粒子对

2、DNA 合成量的影响;并用紫外可见光谱方法分析其作用机制。结果显示,38和61nm 纳米银对PCR体系中的DNA合成的影响明显强于83和130nm 纳米银组,抑制作用呈现较为明显的粒径效应关系。在不同浓度纳米银对PCR体系中DNA合成量的影响中发现,纳米银浓度逸10滋g/mL时,纳米银可明显抑制PCR体系中的DNA 合成,且其抑制作用呈现较为明显的剂量效应关系。综合琼脂糖凝胶电泳和紫外可见光谱,认为纳米银抑+ 制DNA合成的主要原因是对聚合酶、引物和模板的吸附作用。并认为纳米银粒子释放的少量的Ag 是纳米银影响DNA合成的又一关键性的因素。关键词纳米银,PCR,毒性

3、,分子机制EffectofPCRAmplificationwithNanosilveronDNASynthesisandItsMechanism *LiuPengpeng GuanRongfaLiuMingqi HuangGuangrong DaiXianjun ChinaJiliangUniversity,Hangzhou310018,China*Correspondingauthor,rfguan@163.comDOI:10.3969/j.issn.16747968.2010.05.007AbstractToinvestigatetheeffectofPCRam

4、plificationwithnanosilveronDNAsynthesisanditsmechanism, theeffectofPCRamplificationwithnanosilveronDNAsynthesiswasobtainedbytheobservationofdifferent sizes(38,61, 83and130nm)anddifferentconcentrations(5, 10, 25, 50, 100and250滋g/mL)ofnanosilverparticlesinpolymerasechainreactions(PCRs).a

5、ndtheUVvisiblespectroscopywasusedtoanalyzeitsmolecularmechanism.TheresultsshowedthatwhenPCRswereexposedtofoursizesofnanosilverparticlesrespectively withinadoserange,theeffectofPCRamplificationwith38and61nmnanosilvergroupswasmuchstrongerthan thatof83and130nmnanosilvergroups.WhenPCRswere

6、exposedtodifferentconcentrationsofnanosilverparticles,wefoundthatnanosilvercouldinhibittheDNAsynthesisobviouslywhenthedose≥10滋g/mL,andits inhibitionshowedasignificantdoseeffectrelationship.IntegratedagarosegelelectrophoresisandUVvisiblespectrum,weclaimthattheadsorptionofpolymerase,prim

7、ersandtemplatesbynanosilveristhemainreasonfor+ inhibitionofDNAsynthesis.Inaddition,asmallamountofAg releasedbyslivernanoparticlesisanotherkey factorforinhibitionoftheDNAsynthesis.KeywordsNanosilver,PCR,Toxicity,Molecularmechanism 银是一种安全广谱的抗菌材料。银被纳米化后,产生强力的杀菌作用(Sharmaetal.,2009)。纳米银展其

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