碱茅论文:碱茅 胚性愈伤组织 根癌农杆菌 遗传转化 组织褐化

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1、碱茅论文:碱茅再生体系建立及其遗传转化的研究【中文摘要】碱茅(Puccinelliachinampoensis)是一种抗旱、耐盐碱(NaHCO3,Na2CO3)性极强的盐碱地特种植物,它与水稻、小麦一样都属禾本科,但在长期的进化及对盐碱适应过程中,形成了与其它禾本科植物相比极为特殊的抗逆机制,而且具有极强的抗盐碱能力。通过植物组织培养技术建立碱茅再生体系,进一步筛选出高效转基因体系,为以后碱茅的遗传转化研究实验做了准备。本研究以碱茅为试验材料,全面而系统地探讨了影响碱茅种子愈伤诱导的一些主要因素,并通过农杆菌EHA105介导下对GUS基因遗传转化。试验的研究结果为

2、:在碱茅种子愈伤组织的诱导过程中,不同灭菌剂及灭菌时间对种子灭菌效果和诱导情况差异明显,使用70%酒精3min+10%次氯酸钠30min的灭菌处理效果较好。在MS培养基上添加不同浓度的2,4-D对碱茅种子诱导产生愈伤组织的效率不同,最适2,4-D浓度为4mg/L。选择以改造培养基I(N6大量元素、MS微量元素、两倍MS铁盐、五倍MS有机物,其中肌醇的用量不变)作为碱茅种子愈伤组织诱导的基本培养基。不同光照培养条件对碱茅种子诱导产生愈伤组织的效率不同,在短光照(12/12h)、培养温度为...【英文摘要】Puccinelliachinampoensisisaspec

3、ialgramineousplantlikericeandwheat,whichcansurvivewellinthesalineandalkalienvironmentwithseveredroughtandsaltstress.ThedifferencefromriceorwheatisPuccinelliachinampoensishasevolvedaseriesofresistancemechanismviayearsofadaptationinthesalineandalkalisoil.Inthisstudy,transformationsystem

4、ofPuccinelliachinampoensishasbeenconstructedandoptimized,followingwithoptimizedregenerationsystem,throughplanttissuecultur...【关键词】碱茅胚性愈伤组织根癌农杆菌遗传转化组织褐化【英文关键词】PuccinelliachinampoensisembryocallusAgrobacter-iumtumefaciensgenetictransformationtissuebrowning【目录】碱茅再生体系建立及其遗传转化的研究摘要4-5Abstr

5、act5-61绪论9-181.1碱茅的研究进展9-121.1.1碱茅的生物学特性101.1.2碱茅结构解剖研究进展101.1.3碱茅生理生态研究进展10-111.1.4碱茅分子生物学研究进展11-121.2植物组织培养研究进展12-141.2.1外植体选择的研究进展131.2.2各种激素在植物组织培养中的应用13-141.3植物遗传转化受体系统的研究概况14-161.3.1外植体直接分化的遗传转化151.3.2以植物单细胞为受体的遗传转化151.3.3以植物愈伤组织为受体的遗传转化15-161.3.4植物原生质体的遗传转化161.4植物遗传转化方法的研究进展16-

6、171.4.1农杆菌介导法161.4.2基因枪法161.4.3电激法16-171.4.4PEG转化法171.4.5花粉管通道法171.5本研究的目的及意义17-182碱茅再生体系的建立18-352.1材料与方法18-222.1.1材料18-202.1.2方法20-222.2结果与分析22-342.2.1不同灭菌剂对种子灭菌的效果22-232.2.2两种光照条件下对种子诱导愈伤组织的影响23-242.2.3诱导种子的愈伤组织试验的结果与分析24-262.2.4愈伤组织在继代增殖中的调控26-272.2.5愈伤组织芽分化的结果与分析27-342.3本章小结34-353

7、碱茅的遗传转化35-433.1材料与方法35-393.1.1材料353.1.2方法35-393.2结果与分析39-413.2.1碱茅种胚愈伤组织筛选过程中Kana筛选浓度的确定393.2.2除菌方式的优化39-403.2.3菌液不同侵染时间对遗传转化的影响40-413.3本章小结41-43结论43-44参考文献44-49攻读学位期间发表的学术论文49-50致谢50-51

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